本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理匯編

2024-05-30 09:33 64閱讀次數(shù)

收藏 評(píng)價(jià) 舉報(bào)

• 分享

立即下載

參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

登錄或新用戶注冊(cè)

• 微信登錄
• 密碼登錄
• 短信登錄

請(qǐng)用手機(jī)微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊(cè)新賬號(hào)

微信掃碼，手機(jī)電腦聯(lián)動(dòng)

注冊(cè)登錄即表示同意《儀器網(wǎng)服務(wù)條款》和《隱私協(xié)議》

賬  號(hào)：

密  碼：

圖片碼： 看不清？
換一張？

手機(jī)和郵箱號(hào)注冊(cè)新賬號(hào)>> 忘記密碼？

手機(jī)號(hào)：

圖片碼： 看不清？
換一張？

短信碼： 獲取短信碼

手機(jī)和郵箱號(hào)注冊(cè)新賬號(hào)>> 忘記密碼？

更多資料

• FH1164-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；C17.2

  FH1164-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；C17.2[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• FH1273-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C

  FH1273-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞；NE-4C[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• FH-M167-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞說明書

  FH-M167-小鼠神經(jīng)干細(xì)胞說明書[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• FH-R165-大鼠神經(jīng)干細(xì)胞說明書

  FH-R165-大鼠神經(jīng)干細(xì)胞說明書[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 神經(jīng)干細(xì)胞的微環(huán)境（上）

  神經(jīng)干細(xì)胞的微環(huán)境（上）來源：威正翔禹生物/締一生物版權(quán)所有，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。威正翔禹生物擁有Ausbian特級(jí)胎牛血清，養(yǎng)細(xì)胞就用Ausbian血清！它低內(nèi)毒素，高品質(zhì)，讓細(xì)胞更健康！同批號(hào)跟蹤，讓您的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更穩(wěn)定！全程無凍融，讓細(xì)胞表現(xiàn)更出色！按：細(xì)胞微環(huán)境對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育和動(dòng)態(tài)平衡非常重要。不同細(xì)胞類型其微環(huán)境也不同。本文根據(jù)國(guó)外StemBook相關(guān)章節(jié)編譯，內(nèi)容是神經(jīng)干細(xì)胞微環(huán)境。但其他類型細(xì)胞微環(huán)境模式與之相近，因此，該文所描述的神經(jīng)干細(xì)胞微環(huán)境可看作是細(xì)胞微環(huán)境的一個(gè)范式。在哺乳動(dòng)物中，神經(jīng)干細(xì)胞在發(fā)育早期出現(xiàn)，并且在生物體的整個(gè)壽命期內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)保持活性。在發(fā)育過程中，它們呈現(xiàn)不同的細(xì)胞形態(tài)并且駐留在不斷變化的微環(huán)境中，同時(shí)保留干細(xì)胞的基本性質(zhì)：多潛能和自我更新能力。本章將介紹神經(jīng)干細(xì)胞的基本形態(tài)特征，以及其微環(huán)境的基本結(jié)構(gòu)成分和信號(hào)分子。在早期的神經(jīng)發(fā)育過程中，當(dāng)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育模式建立時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞被稱為神經(jīng)上皮細(xì)胞;它們位于其他神經(jīng)上皮細(xì)胞中間，并且暴露于各種信號(hào)中，例如視黃酸，刺猬蛋白和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子。當(dāng)神經(jīng)發(fā)生開始時(shí)，由于各種類型的神經(jīng)元祖細(xì)胞、分化細(xì)胞和細(xì)胞外信號(hào)分子的出現(xiàn)，干細(xì)胞被轉(zhuǎn)化為徑向膠質(zhì)細(xì)胞，并且其微環(huán)境的復(fù)雜性增加。Z后，在成年期間，神經(jīng)干細(xì)胞呈現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)，并且存在于被稱為神經(jīng)源性小室（neurogenicniches）的特定的微環(huán)境中。就在這些神經(jīng)源性小島上，其神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在與胚胎發(fā)育過程中相似機(jī)制的控制下不斷產(chǎn)生。1、胚胎神經(jīng)干細(xì)胞微環(huán)境神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的發(fā)育是一個(gè)復(fù)雜的過程，依賴于在時(shí)間和空間上極ng確調(diào)節(jié)的一系列機(jī)制。在嚙齒動(dòng)物中，存在于成年大腦中的大多數(shù)細(xì)胞在胚胎發(fā)生期間在大約一周的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生并遷移到它們各自的目的地。胚胎CNS是一種動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)，它的尺寸不斷增加，而負(fù)責(zé)構(gòu)建大腦的干細(xì)胞/前體細(xì)胞群體駐留在兩個(gè)明顯且相對(duì)較小的增殖區(qū)域中。**個(gè)是心室區(qū)（VZ），其中具有神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）性質(zhì)的上皮細(xì)胞大約在胚胎期第8天出現(xiàn)，所有正在發(fā)育和成熟CNS細(xì)胞，包括成年NSCs，都來自于它（Alvarez-Buylla等，2001）。經(jīng)過一段時(shí)間的NSC/前體細(xì)胞擴(kuò)增，隨著神經(jīng)發(fā)生的開始，第二個(gè)祖細(xì)胞群體開始從VZ中不對(duì)稱分裂的細(xì)胞中產(chǎn)生并且向底部遷移。它們稱為中間祖細(xì)胞或基礎(chǔ)祖細(xì)胞（intermediateprogenitorsorbasalprogenitors）。這些細(xì)胞對(duì)稱分裂以產(chǎn)生神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。它們遍及CNS和端腦。端腦中含有這些細(xì)胞的區(qū)域稱為室下區(qū)（SVZ;Martinez-Cerdeno等，2006;Smart，1972,1973）。1.1VZ的微環(huán)境從細(xì)胞形態(tài)學(xué)上看，早期NSC微環(huán)境似乎是均一的（Pinto和Gotz，2007）。它由特征性雙極細(xì)胞組成（NEP），一端為頂端，連接VZ區(qū)，一端連接到軟腦膜，為基底區(qū)。NEP細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞核發(fā)生周期性基底-頂部易位，其有絲分裂總是發(fā)生在心室區(qū)，而S期發(fā)生在Z基底區(qū)域（Gotz和Huttner，2005;Pinto和Gotz，2007）。神經(jīng)上皮的厚度隨時(shí)間增加，以適應(yīng)NEP細(xì)胞的數(shù)量增加。偶爾產(chǎn)生的神經(jīng)元，迅速遷移到神經(jīng)組織的軟腦膜（pialsurface）。在大多數(shù)情況下，在嚙齒動(dòng)物中，NEP細(xì)胞開始表達(dá)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物，并呈現(xiàn)更細(xì)長(zhǎng)的形態(tài)。為了反映這種轉(zhuǎn)變，新出現(xiàn)的神經(jīng)干細(xì)胞/祖細(xì)胞類型現(xiàn)在被稱為徑向膠質(zhì)細(xì)胞（RG），并保留了NEP細(xì)胞的雙相形態(tài)和細(xì)胞核動(dòng)力學(xué)遷移特征。隨著神經(jīng)組織的增厚，大量神經(jīng)元產(chǎn)生，RG的基底端延長(zhǎng)以保持與軟腦膜的附著（Rakic，2003）。因此，RG似乎是**能夠感測(cè)和整合來自至少四種不同微環(huán)境信息的胚胎CNS細(xì)胞：1）VZ區(qū)，主要由RG細(xì)胞胞體和頂端突起組成，以及新生成的遷移走的神經(jīng)元;2）SVZ區(qū)，由基礎(chǔ)祖細(xì)胞和新生成的神經(jīng)元/神經(jīng)膠質(zhì)組成;3）幔層（Mantle），由有絲分裂后的細(xì)胞組成;4）軟腦膜的基底層，它是一層RG基底軸突連接的富含細(xì)胞外基質(zhì)的膜。盡管目前尚不清楚這些微環(huán)境中細(xì)胞外信號(hào)通路是否存在，但Z近的一項(xiàng)研究顯示負(fù)責(zé)啟動(dòng)神經(jīng)膠質(zhì)發(fā)生的神經(jīng)元分泌細(xì)胞因子（心肌營(yíng)養(yǎng)因子1;Barnabe-Heider等人，2005）的存在。由于不同神經(jīng)細(xì)胞類型的產(chǎn)生和血管密集網(wǎng)絡(luò)的出現(xiàn)，幔層微環(huán)境的復(fù)雜性隨著發(fā)展的進(jìn)展而增加（Herken等，1989）。還觀察到VZ復(fù)雜度的一起增加（Pinto和Gotz，2007），盡管這不是結(jié)構(gòu)上顯而易見的，因?yàn)閂Z主要是雙相神經(jīng)元的，“相同”的RG只有幾個(gè)插入的小的祖細(xì)胞（Gal等人，2006;Hartfuss等，2003）。然而，不同標(biāo)志物的免疫染色和細(xì)胞命運(yùn)研究的結(jié)果，表明具有不同功能和譜系的RG亞型的存在（Hartfussetal，2003;Hartfussetal，2001;Malatestaetal，2000;Plachtaetal，2004;Williams和Price，1995），并且已經(jīng)確定，RG根據(jù)它們不同的位置特征（背側(cè)腹，尾狀尾，Guillemot，2005），攜帶有不同的內(nèi)在信息。Z后，應(yīng)該指出，存在于VZ/SVZ內(nèi)部或外部有分泌生長(zhǎng)因子或形態(tài)發(fā)生因子的特定區(qū)域的存在。（Assimacopoulos等，2003;Shimogorietal，2004）1.2.胚胎NSC微環(huán)境的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)1.2.1內(nèi)部調(diào)控NSC/前體細(xì)胞的行為由外在和內(nèi)在機(jī)制控制?？寺∩L(zhǎng)的胚胎第10天的皮質(zhì)祖細(xì)胞產(chǎn)生**個(gè)神經(jīng)元，然后產(chǎn)生神經(jīng)膠質(zhì)，類似于體神經(jīng)元發(fā)生在膠質(zhì)發(fā)生之前（Qian等人，1998;Qian等，2000）。后續(xù)研究顯示，該內(nèi)在定時(shí)器延伸到“正確”哦順序生成不同皮質(zhì)神經(jīng)元亞型（Shen等，2006）。此外，移植實(shí)驗(yàn)已經(jīng)顯示，祖細(xì)胞在異位移植時(shí)保持其內(nèi)在的潛力（Darsalia等，2007;Olsson等，1998）。已經(jīng)顯示許多轉(zhuǎn)錄因子在NSC/祖細(xì)胞增殖和/或分化中起作用。這些包括編碼基本螺旋-環(huán)-螺旋（bHLH）轉(zhuǎn)錄因子（Bertrand等人，2002），SRY相關(guān)HMG盒（SOX）家族轉(zhuǎn)錄因子（Episkopou，2005），核受體雌激素受體（Brannvall等，2002），過氧化物酶體增殖物激活受體γ（Wada等，2006）和核受體共YZ子N-CoR（Hermanson等，2002）。許多上述因素的功能損失或功能已被證明足以改變祖細(xì)胞的表型、細(xì)胞周期和命運(yùn)，而它們與細(xì)胞的環(huán)境無關(guān)（Bertrand等，2002;Campbell，2003;Guillemot，2005）。涉及細(xì)胞內(nèi)在性狀控制的另一種機(jī)制是表觀遺傳修飾。表觀遺傳調(diào)控涉及組蛋白和DNA修飾，它們能改變?nèi)旧|(zhì)的凝聚狀態(tài)，從而改變了基因的活性。組蛋白修飾包括甲基化，乙?；土姿峄Ｉ窠?jīng)元基因啟動(dòng)子的組蛋白乙?；唤M蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（HATs）和脫乙酰酶（HDAC）調(diào)節(jié)，并且組蛋白乙?；瘜?duì)于未分化神經(jīng)祖細(xì)胞中這些基因的YZ是必需的（Ballas和Mandel，2005）。此外，與分化的神經(jīng)元相比，增殖型NSCs具有不同的組蛋白甲基化模式（Biron等，2004）。Z后，MiRNA也可以作為神經(jīng)元祖細(xì)胞行為的內(nèi)在調(diào)節(jié)因子（Cao等，2006），這是一個(gè)在不久的將來可以快速進(jìn)展的領(lǐng)域。1.2.2彌散信號(hào)微環(huán)境（外在因素）可通過彌散信號(hào)和/或介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與ECM相互作用的分子，來調(diào)節(jié)神經(jīng)元前體細(xì)胞的行為。這些彌散信號(hào)在組織內(nèi)可形成梯度，并且可以在遠(yuǎn)離信號(hào)源的區(qū)域傳遞信號(hào)。因此，在發(fā)育的CNS內(nèi)的每個(gè)位置，神經(jīng)干細(xì)胞/祖細(xì)胞會(huì)遇到信號(hào)的獨(dú)特組合，以指示細(xì)胞區(qū)域特異性的行為。在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化中具有關(guān)鍵作用的主要分子群是生長(zhǎng)因子。幾種骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP），作為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）家族的成員，沿著發(fā)育中腦的背部中線表達(dá)，是中線發(fā)育所必需的（Bertrand和Dahmane，2006;Campbell，2003）。BMP2和4的過度表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞增殖減少和早熟神經(jīng)元的分化（Li等，1998）。添加YZ劑可逆轉(zhuǎn)這種作用（Li和LoTurco，2000）。截短的BMPI型受體的體內(nèi)過表達(dá)提供了BMPs促進(jìn)增殖細(xì)胞分化的作用的另外的證據(jù)（Li等，1998）。此外，幾種成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGFs），特別是FGF8和FGF3在前腦神經(jīng)脊、中腦后腦屏障等表達(dá)（Mason，2007）。FGF表達(dá)譜在發(fā)育過程中的復(fù)雜性增加，并且小鼠，小雞和斑馬魚都有所不同。FGF活性不僅對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)的區(qū)域分化，而且對(duì)于其他功能也是至關(guān)重要的，例如前腦細(xì)胞（Storm等人，2003）和中腦后腦區(qū)域細(xì)胞（Chietal，2003）需要FGF8才能存活。此外，F(xiàn)GF-2（或bFGF）是體外廣泛使用的促分裂原，能將胚胎端腦和神經(jīng)管的前體細(xì)胞保持在祖細(xì)胞狀態(tài)（Kalyani等，1997;Kilpatrick等，1993;Murphy等人，1990;Vescovi等人，1993）。bFGF缺陷小鼠由于NSC/前體細(xì)胞數(shù)量減少而使腦容積變?。╒accarino等人，1999）。FGF家族在胚胎干/前體細(xì)胞行為中扮演的角色也受到所有FGF受體（FGFR）在體內(nèi)表達(dá)的支持（Bansaletal，2003）。FGFR4被證明在大鼠神經(jīng)管神經(jīng)上皮細(xì)胞中高度表達(dá)（Kalyani等，1999），而大鼠背側(cè)端腦神經(jīng)上皮細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)主要表達(dá)FGFR1和3，這些受體是對(duì)稱細(xì)胞分裂自我更新的關(guān)鍵（Maricetal，2007）。除了生長(zhǎng)因子外，另一組涉及神經(jīng)前體細(xì)胞行為調(diào)節(jié)的彌散分子是形態(tài)發(fā)生素和刺猬蛋白（Shh）。Shh信號(hào)傳導(dǎo)通過其受體patched1（PTC1）介導(dǎo)（Dessaud等人，2007），其在不存在Shh時(shí)，持續(xù)YZSmo。在與Shh結(jié)合后，PTC1解除其對(duì)Smo的YZ，從而激活下游信號(hào)通路，導(dǎo)致出現(xiàn)轉(zhuǎn)錄激活因子Gli1-3和Gli阻遏物的調(diào)節(jié)。Gli2和3都在小鼠的VZ中強(qiáng)烈表達(dá)，而Shh和Gli1弱表達(dá)（Dahmane等，2001;Hui等，1994）。Shh參與整個(gè)發(fā)育神經(jīng)系統(tǒng)的腹側(cè)分型（Bertrand和Dahmane，2006;Campbell，2003），以及調(diào)節(jié)祖細(xì)胞增殖，因?yàn)镾hh缺陷小鼠的特征是腦尺寸減小和獨(dú)眼畸形（cyclopia）（Chiang等，1996;Muenke和Cohen，2000）?；趯?duì)Gli2缺陷的小鼠的觀察，這種表型可能是由于VZ和SVZ中的細(xì)胞異常增殖（Palma和RuiziAltaba，2004）。已知在CNS發(fā)育過程中重要的第二種形態(tài)發(fā)生素是視黃酸（RA）。它是由視黃醛脫氫酶（RALDH1-3）在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的彌散分子。RA通過CRABP1-2被留在細(xì)胞質(zhì)中，并且在結(jié)合RA受體（RAR1-3）和視黃酸X受體（RXR1-3;Maden，2002）之后在核中起作用。RA在非常早期的神經(jīng)元微環(huán)境中是重要的，其參與前后軸的調(diào)節(jié)（Maden，2002）。在后期階段，RA信號(hào)對(duì)于脊髓的背腹分型（Pierani等人，1999）和后腦分型是重要的（Marshall等人，1992）。Z近的研究表明，RA在腹側(cè)前腦中存在較高的水平（Takahashi和Liu，2006），調(diào)節(jié)皮層和紋狀體之間的中間區(qū)域的分化。Z后，Wnt信號(hào)通路也被證明可以調(diào)節(jié)發(fā)育中大腦的細(xì)胞行為。在小鼠胚胎的VZ區(qū)域高水平表達(dá)Wnt受體Frizzled5,8,9和分泌型frizzled蛋白1（Kim等人，2001;VanRaay等，2001），而功能研究已經(jīng)揭示W(wǎng)nt信號(hào)在背部前腦分化中的關(guān)鍵作用（Gunhaga等，2003;Hirabayashi等，2004;Machon等，2007）以及對(duì)VZ中NSC/前體細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)。當(dāng)β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)增強(qiáng)時(shí)，在VZ中觀察到退出細(xì)胞周期的細(xì)胞數(shù)量減少和腦區(qū)擴(kuò)大（Chenn和Walsh，2002）。此外，皮質(zhì)祖細(xì)胞中β-連環(huán)蛋白的缺失導(dǎo)致增殖更弱和遷移缺陷（Backman等人，2005;Machon等，2003），并且靶向YZβ-連環(huán)蛋白導(dǎo)致VZ細(xì)胞過早地離開細(xì)胞周期，并分化成神經(jīng)元（Woodheadetal，2006）。Z近的一篇文章表明，β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)是維持VZ前體細(xì)胞群體所必需的。當(dāng)VZ前體細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橹虚g祖細(xì)胞（SVZ）時(shí)，β-連環(huán)蛋白信號(hào)下調(diào)；持續(xù)的β-連環(huán)蛋白活性導(dǎo)致VZ祖細(xì)胞庫(kù)擴(kuò)增，并YZ中間祖細(xì)胞的產(chǎn)生（Wrobel等，2007）。1.2.3.細(xì)胞之間的相互作用VZ和SVZ均以高密度的細(xì)胞體和軸突為特征，因此細(xì)胞與細(xì)胞的相互作用可能是調(diào)節(jié)祖細(xì)胞行為的另一途徑。已報(bào)道在VZ中存在EphrinsB1和A5以及EphA4和A7受體的表達(dá)（Depaepeetal。，2005;Greferath等，2002;Mackarehtschian等，1999;Stuckmann等，2001）。特別地，EphrinB1被認(rèn)為能促進(jìn)細(xì)胞遷移出VZ，因?yàn)樗谋磉_(dá)形成一個(gè)頂端到基底的濃度梯度（Stuckmann等，2001）。EphrinA5/EphA7可以通過促進(jìn)NSC/前體細(xì)胞的凋亡來控制VZ祖細(xì)胞池的大?。―epaepeetal。，2005）。Notch途徑也已知在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮關(guān)鍵作用，如一系列小鼠突變研究所證明的（Hitoshietal，2002;YoonandGaiano，2005）。已有研究顯示Notch-1（Gaiano等，2000），Notch-3（Dang等，2006）和Delta-1（Beckers等人，2000）。在小鼠VZ區(qū)表達(dá)（Kostyszyn等，2004），人類VZ區(qū)存在Notch-1和Delta-1的強(qiáng)表達(dá)和Notch-3的弱表達(dá)。此外，腦室內(nèi)注射Notch配體能增加新產(chǎn)生的前體細(xì)胞的數(shù)量（Androutsellis-Theotokis等，2006）。Notch信號(hào)在細(xì)胞命運(yùn)決定中也起關(guān)鍵作用，因?yàn)镹otch-1或Notch-3的激活導(dǎo)致RG細(xì)胞數(shù)量增加（Dangetal，2006;Gaianoetal，2000）。與這些數(shù)據(jù)相一致，已報(bào)道在delta-like-1缺陷小鼠中VZ區(qū)的面積減少和分化過早（Yun等，2002）。Z后，Z近的一項(xiàng)研究表明，對(duì)于Notch的反應(yīng)（通過CBF-1），VZ/SVZ區(qū)的的干/前體細(xì)胞和NSC（而不是中間祖細(xì)胞）（Mizutani等，2007）之間是不同的。VZ中細(xì)胞與細(xì)胞相互作用的另一種形式可能是由鈣粘蛋白依賴性粘附連接（AJs）介導(dǎo)的，但鈣粘蛋白信號(hào)傳導(dǎo)在SVZ中的證據(jù)很少（Lathiaetal。，2007b）。與室區(qū)相鄰的細(xì)胞層的特征是存在強(qiáng)的鈣粘蛋白表達(dá)（Aaku-Saraste等，1996），并且近來的工作已經(jīng)提出NSC/前體細(xì)胞后代的行為依賴于AJ（Kosodo等，2004）。幾乎沒有功能學(xué)上的證據(jù)直接將鈣粘蛋白信號(hào)與小鼠和雞的NSC/前體細(xì)胞行為相關(guān)聯(lián)，因?yàn)楦蓴_鈣粘蛋白信號(hào)會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)管的廣泛破壞（Kadowaki等，2007;Radice等，1997）。然而，有實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明N-鈣粘蛋白的YZ導(dǎo)致神經(jīng)干/前體細(xì)胞的過度增殖（Leleetal，2002;Noles和Chenn，2007）?？p隙連接是另外一種細(xì)胞間的通訊系統(tǒng)，這在調(diào)節(jié)干/前體細(xì)胞行為中可能是重要的。連接蛋白（Cx）26和43在VZ（Bittman和LoTurco，1999）中表達(dá)，Cx43與bFGF在體外維持干細(xì)胞/前體細(xì)胞處于未分化狀態(tài)的能力有關(guān)（Cheng等，2004）。有趣的是，即使在bFGF的存在下，Cx43的YZ也導(dǎo)致過早分化和細(xì)胞死亡（Cheng等，2004）。間隙連接也涉及前體細(xì)胞遷移，因?yàn)槿狈x43的小鼠由于不能遷移到皮質(zhì)板中而在中間區(qū)域中表現(xiàn)出前體細(xì)胞的累積（Fushiki等，2003）。Z近的一項(xiàng)后續(xù)研究進(jìn)一步詮釋了這種影響，顯示Cx26和43在遷移的前體細(xì)胞對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)纖維的粘附維持方面發(fā)揮作用（Elias等，2007）。1.2.4細(xì)胞和ECM的相互作用ECM是VZ/SVZ微環(huán)境的另一個(gè)組成部分，可能對(duì)NSC/前體細(xì)胞行為的調(diào)節(jié)至關(guān)重要。神經(jīng)前體細(xì)胞的胞體和短的突起位于沒有傳統(tǒng)基底膜的區(qū)域，但仍然富含基質(zhì)分子，如各種層粘連蛋白（Campos等人，2004;Hunter等人，1992;Lathia等等，2007a）、層粘連蛋白受體β1整合素（Campos等人，2004;Graus-Porta等人，2001;Hall等人，2006;Nagato等人，2005），糖蛋白肌腱蛋白-C（Garcion等，2004）和硫酸軟骨素蛋白聚糖（CSPGs;vonHolst等，2006）。此外，VZ的許多雙極（神經(jīng)上皮或徑向膠質(zhì)細(xì)胞）細(xì)胞延伸了與基底軸突，使得能與軟膜區(qū)富含ECM的基底膜接觸?；纵S突微環(huán)境中的改變?cè)谌祟惻c遷移缺陷引起的皮層畸形相關(guān)（Bonneau等人，2002;Toda等人，1994;Yoshida等人，2001）。小腦ECM組分缺失的小鼠，如層粘連蛋白γ1，整合素α6或β1（α6β1異源二聚體是CNS中的主要層粘連蛋白受體），以及reelin，共有幾個(gè)常見的缺陷，如皮層邊緣區(qū)異位生長(zhǎng)和徑向回縮（Beggs等人，2003;Georges-Labouesse等人，1998;Hartmann等，1998;Niewmierzycka等，2005），但對(duì)祖細(xì)胞增殖或細(xì)胞命運(yùn)決定沒有任何干擾（Haubstetal，2006）。使用神經(jīng)球試驗(yàn)的功能研究雖然調(diào)查了β1整合素在NSC/前體細(xì)胞中的作用，但無法揭示NSC中正常細(xì)胞與細(xì)胞，細(xì)胞與ECM的相互作用，并沒有提供β1整合素在這些細(xì)胞中的角色。使用抗體阻斷β1整合素導(dǎo)致NSC維持受損（Campos等人，2004），但是隨后從缺乏β1整合素的細(xì)胞生長(zhǎng)出來的神經(jīng)球?qū)嶒?yàn)沒有顯示類似的缺陷（Leone等，2005）。在相似的體外測(cè)定中，使用軟骨素酶ABC對(duì)硫酸軟骨素蛋白聚糖進(jìn)行降解，導(dǎo)致增殖和神經(jīng)元分化收到干擾，揭示了這些ECM分子在調(diào)節(jié)NSC/前體細(xì)胞行為中的作用（Sirko等，2007）1.2.5血管和腦脊液VZ/SVZ微環(huán)境受到腦脊液和CNS發(fā)育早期階段形成的血管的影響。小鼠血管形成早于E9（Herken等，1989;Vasudevan等，2008），證據(jù)表明，神經(jīng)發(fā)生和血管生成由常見信號(hào)調(diào)節(jié)，包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF），Notch和Shh（Carmeliet，2003）。體外研究顯示，E10神經(jīng)干/前體細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)導(dǎo)致更大克隆的形成和更少的神經(jīng)元產(chǎn)生，這源于對(duì)稱的增殖分裂（Shenetal。，2004），但相關(guān)的影響因素仍然未知。CSF在發(fā)育階段的成分和作用仍然缺乏研究。在Z近的一項(xiàng)研究中，CSF在雞胚體內(nèi)的流動(dòng)被擾動(dòng)，導(dǎo)致異常的皮質(zhì)發(fā)育（Mashayekhi和Salehi，2006），而其他實(shí)驗(yàn)工作表明CSF來源的因子可以調(diào)節(jié)體外的神經(jīng)干/前體細(xì)胞行為（Gatoetal，2005;Miyan等，2006）。Z近的研究工作也顯示，分裂的神經(jīng)干細(xì)胞，脫落出富含prominin-1的囊泡到腦脊液中，盡管其作用仍有待確定，但這些可能提供額外的線索（Marzesco等，2005）。[詳細(xì)]

  2018-11-28 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 聚乙二醇－聚乙烯亞胺介導(dǎo)小干擾RNA體外轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的

  聚乙二醇－聚乙烯亞胺介導(dǎo)小干擾RNA體外轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的[詳細(xì)]

  2024-09-29 06:21

  實(shí)驗(yàn)操作

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠成纖維細(xì)胞

  NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]（小鼠成纖維細(xì)胞）1.OriginandGeneralCharacteristicsCellNameNCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL]OrganismmusmusculusAge100daysTissuesubcutaneousconnectivetissue;areolarandadiposeMorphologyfibroblastGrowthPropertiesadherentDescriptionsThiscelllinehasbeentestedandfoundnegativeforectromeliavirus(mousepox).BiosafetyLevel12.CultureConditionsandHand領(lǐng)CompleteGrowthMediumMEM(150410)+10%FBS(164210500)+1%-P/S(180120)Removeanddiscardculturemedium.BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.Add1.0to2.0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin3Subculturingto5minutes).Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37°Ctofacilitatedispersal.Add4.0to6.0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.SubcultivationRatio1:3-1:5MediumRenewal2to3timesperweekCryopreservationFreezemedium:50%basalmedium+40%FBS+10%DMSOStoragetemperature:liquidnitrogenvaporphaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%Temperature:37℃3.SpecialFeaturesoftheCellLineTumorigenicYes,inimmunosuppressedmice.EffectsYes,inimmunosuppressedmice.ReceptorExpressionAntigenExpressionGeneExpressionApplicationsToxicitytesting;Transfectionhost收到常溫細(xì)胞后如何處理？（細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照郵件附件）首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠試劑盒

  小鼠試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 01:24

  專利

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠說明書小鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）說明書

  96T6ng/L-200ng/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）水平。用純化的小鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF），再與HRP標(biāo)記的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子（SCF）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（400ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。200ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測(cè)樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠麥角蛋白IgA,小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒說明書

  小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒組成：130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（80ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒標(biāo)本要求：1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。更多資料請(qǐng)下載文件[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞

  小鼠卵巢顆粒細(xì)胞[詳細(xì)]

  2015-09-21 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒

  小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠Slit2 ELISA試劑盒

  小鼠Slit2 ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-08 00:00

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠c-jun ELISA試劑盒

  小鼠c-jun ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-08 00:00

  安裝說明

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠c-fos ELISA試劑盒

  小鼠c-fos ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-08 00:00

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠c-fos ELISA試劑盒

  小鼠c-fos ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-11-15 00:00

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠籠產(chǎn)品樣冊(cè)

  小鼠籠產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]

  2016-10-19 17:18

  專利

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠Slit2 檢測(cè)試劑盒

  小鼠Slit2 檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-07-28 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠γ干擾素（IFN-γ）說明書

  小鼠γ干擾素（IFN-γ）說明書[詳細(xì)]

  2015-05-18 00:00

  報(bào)價(jià)單

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書

  小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書[詳細(xì)]

  2015-04-14 00:00

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  •