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小鼠endostatin基因的克隆與C6鼠腦膠質(zhì)瘤的ZL
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本文由 上海楚柏實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司 整理匯編
2009-06-16 00:00 227閱讀次數(shù)
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小鼠endostatin基因的克隆與C6鼠腦膠質(zhì)瘤的ZL
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小鼠endostatin基因的克隆與C6鼠腦膠質(zhì)瘤的ZL
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2018-09-13 10:00
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nm23基因與肺癌轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展
- nm23基因與肺癌轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展[詳細(xì)]
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2013-08-29 00:00
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bEnd.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
- 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞T25瓶細(xì)胞處理方法收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系我們。并進(jìn)行以下操作:1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。2.肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(40×,100×,200×各一張)。3.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫1-2小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。4.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。5.若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。6.若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳到10cm培養(yǎng)皿培養(yǎng)。7.傳代時(shí),T25瓶里保留部分細(xì)胞,同步培養(yǎng),直到能確保10cm培養(yǎng)皿中的細(xì)胞狀態(tài)良好[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠血管內(nèi)皮抑素(Endostatin)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 小鼠血管內(nèi)皮抑素(Endostatin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠Endostatin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Endostatin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠Endostatin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,Endostatin濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Endostatin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、唾液等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成8000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入8000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Endostatin含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Endostatin檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠Endostatin。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
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2024-05-30 09:33
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2024-05-30 09:33
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2024-05-30 09:33
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2024-05-30 09:33
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2024-09-29 14:41
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小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C6(ABCC6)ELISA試劑盒
- 小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C6(ABCC6)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2016-08-18 00:00
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