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• 上海易利為您提供植物蔗糖合成酶（SS）說明書

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書（德國IBL：RE54021）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達到Z高。褪黑激素特有的波動變化可以反映出一些關于時間變化的信息，如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會受到神經(jīng)系統(tǒng)的調節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調節(jié)的。據(jù)報道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關性。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標記的抗原競爭性結合包被板上有限的抗體結合位點。生物素抗原結合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標準品數(shù)據(jù)做一條標準曲線，將未知樣品的酶活性與標準曲線進行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時,試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用4次。5、樣品的采集與儲存血清，血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇斣趯嶒為_始前離心以除去所有的顆粒性物質。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性24小時3個月1年6、試劑盒成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克?。?。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標準品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請見試劑瓶標簽或QC質控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請見試劑瓶標簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋中，內(nèi)含對硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱，即用，C18RP，1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠（編號：KEME761）3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：50;500ul2）試管（12×75mm）3）軌道振蕩器（400-600rpm）4）旋渦混合器5）帶儲器的8道移液器6）洗滌瓶，自動或半自動洗板機7）離心機（冷凍離心機更適宜）：200-500×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker或Waters）。8）甲醇（HPLC級）9）蒸發(fā)離心機10）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長600-650nm）11）蒸餾水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進行。下列所述體積為檢測32人份時所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1：102-8℃4周標準品和質控品2.0ml雙蒸水靜置15min，混合時避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時避免氣泡臨時配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%（v/v）如果溶液的需要量比較大,應該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標準品的高，必須將樣品在提取步驟前用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。8.3樣品、標準品和質控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進行提取，提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞，提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標準品和質控品都必須提取，提取必須提前進行。干燥的提取物（甲醇蒸發(fā)后）可在2-8℃或-20℃下儲存24個小時。用甲醇洗提后，提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復使用4次。如果是重復使用，在再次從A.1開始（柱的調制）。A、標準版本：離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇（未稀釋的），200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4為了避免柱子變干，請立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應的標記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。6向提取柱中加入0.5ml標準品、質控品和樣品，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇（蒸餾水稀釋），500g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇，200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出，避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘，并立即檢測樣品。B、選擇性版本：用多頭抽真空裝置代替離心機提取步驟仍然按照A1-5進行，柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機或氮氣蒸發(fā)干燥溶劑。9、實驗步驟1將提取好的標準品、質控品和樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板，輕輕震板，2-8℃下溫育14-20小時。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育120min。8大約在溫育結束10分鐘前準備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器，請用8道移液器加底物液和終止液，加底物液和終止液的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。12室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、結果計算在半對數(shù)坐標紙上或自動計算的方法，以標準品的OD值（Y軸，線性）對其濃度（X軸，對數(shù)）做一條標準曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程可以得到更好的標準曲線。在推算標準曲線時，應當充分利用好每一個標準品數(shù)值（明顯逸出的數(shù)值應當被忽略，再使用更加合理的數(shù)值代替它）。樣品的濃度可以從標準曲線上直接讀取。從坐標紙上讀取結果時應當把起始的稀釋倍數(shù)考慮進去。將稀釋了的樣品結果乘以稀釋因子即可得到其相應的結果。樣品中抗體濃度高于Z高標準品的樣品，應當按實驗前準備說明所述的方法進行稀釋，并重新檢測。轉換系數(shù)：褪黑激素（pg/ml）×4.30=pmol/l典型標準曲線（例子：不能用來定量）標準品褪黑激素（pg/ml）平均OD值OD/ODmax（%）A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實驗結果不能當作確定ZL結果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。對明顯健康的一組人群進行研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化，褪黑激素白天的水平很低，而晚上的水平則很高，而且個體之間的差異也很大。此外，褪黑激素的水平也與年齡有關系，其Z高濃度是在嬰兒（3歲）樣品中發(fā)現(xiàn)的。對6個明顯健康獻血者的褪黑激素生理周期進行研究。褪黑激素大概在白天下午四點Zdi，其平均值是4.6pg/ml；早晨4點達到**，平均值為77.5pg/ml。健康個體之間的褪黑激素Z高值差異很大，建議每個實驗室都確定自己實驗室的正常值范圍。本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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  2024-09-28 07:04

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸鹽ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE54031）1、應用范圍此試劑盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸鹽（又叫6-羥基褪黑激素硫酸鹽和6-硫酸褪黑激素）的體外定量檢測。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達到**。褪黑激素特有的波動變化可以反映出一些關于時間變化的信息，如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會受到神經(jīng)系統(tǒng)的調節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調節(jié)的。據(jù)報道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關性。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標抗原競爭性結合到包被在微孔中的抗體結合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結果可以從標準曲線上直接獲取。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲存尿液實驗必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液，將它加入到含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計算結果，請確定尿液的總體積。實驗開始前請先將樣品離心。儲存2-8℃2-8℃避免太陽直射，避免反復凍融穩(wěn)定性4天15年6、試劑盒成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克?。?。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸鹽抗血清，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，40倍濃縮，內(nèi)含過氧酶標記的褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G標準品A-G，0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用，內(nèi)含褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2質控品1+2，即用，內(nèi)含0.02%的；硫柳汞。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×60mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，紅色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液，31倍濃縮，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×27mlTMB緩沖液TMB底物緩沖液，儲存時避免太陽直射，即用，內(nèi)含H2O2、檸檬酸鹽緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲器的8道移液器7）洗滌瓶，自動或半自動洗板機8）酶標儀（參考波長：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml洗滌液300ml雙蒸水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周50ul酶聯(lián)物2ml檢測緩沖液1:41臨時配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物緩沖液1：31臨時配置,只能使用一次18-25℃10min8.2標準品、質控品和病人尿液樣品的稀釋1將標準品、質控品和病人尿液樣品分別10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃試管中，避免太陽直射。2在每一試管中加入500ul檢測緩沖液，旋渦混合。褪黑激素硫酸鹽濃度高于Z高標準品濃度的樣品必須用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。9、實驗步驟1將已稀釋好的標準品、質控品和病人樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素硫酸鹽抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育2小時。5在溫育快要結束的10分鐘前，請將TMB底物液準備好。6移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。7如果可以的話，請用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB終止液，輕請振板以混合溶液。11加終止液后60min內(nèi)在450nm處讀取OD值。10、期望值實驗結果不能當作確定ZL結果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下為明顯正常人群褪黑激素硫酸鹽的正常值：年齡數(shù)目褪黑激素硫酸鹽24小時尿液（ug）夜間尿液（ug/h）平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5＞1615.87.5-32.71.00.3-2.3建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

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• 雞褪黑激素 （MT）酶聯(lián)免疫分析

  www.biokanu.com雞褪黑激素(MT)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定雞血清，組織及相關液體樣本中褪黑激素(MT)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞褪黑激素(MT)水平。用純化的雞褪黑激素(MT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入褪黑激素(MT)，再與HRP標記的褪黑激素(MT)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的褪黑激素(MT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中雞褪黑激素(MT)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為36ng/L，24ng/L，12ng/L，6ng/L，3ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和15%檢測范圍：1ng/L-40ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-22 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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