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BT產品應用(6)使用QPix400系統(tǒng)通過熒光篩選細菌克隆
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本文由 美谷分子儀器(上海)有限公司 整理匯編
2021-02-03 11:28 471閱讀次數
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通過熒光報告基因篩選含有目的基因的細菌轉化子比傳統(tǒng)的方法更加方便GX。在研究蛋白折疊或分泌、酶的進化或者蛋白定位的時候,通過熒光成像和篩選可以定量單個克隆的獨特信息。此外,這也是一個直接篩選突變或者識別報告基因的方法。
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BT產品應用(6)使用QPix400系統(tǒng)通過熒光篩選細菌克隆
- 通過熒光報告基因篩選含有目的基因的細菌轉化子比傳統(tǒng)的方法更加方便GX。在研究蛋白折疊或分泌、酶的進化或者蛋白定位的時候,通過熒光成像和篩選可以定量單個克隆的獨特信息。此外,這也是一個直接篩選突變或者識別報告基因的方法。
[詳細]
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2021-02-03 11:28
應用文章
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BT產品應用(22)使用QPix400系統(tǒng)自動篩選顏色克?。喝缂t白克隆篩選
- 通過顏色來篩選重組細菌是一個簡單且GX的方法。比如常用的藍白克隆篩選,通過B-半乳糖苷酶和X-gal之間的反應,通過顏色的變化區(qū)分克隆是否成功插入外源基因。我們QPix400系統(tǒng)通過使用QPix顏色克隆篩選軟件模塊和紅色QPix顏色濾光片成功實現(xiàn)自動化的藍白克隆篩選,大大增加實驗室重組克隆的篩選效率。通過功能擴展,現(xiàn)在QPix400系統(tǒng)通過QPix顏色克隆篩選軟件模塊和新的藍色QPix濾光片(Figure1)可以實現(xiàn)紅白克隆的篩選??梢詰糜诤Y選天然紅色的微生物克隆如酒紅色酵母以及和X-gal反應變成紅色的克隆。本文描述了如何使用QPix400系統(tǒng)進行紅白克隆的篩選。[詳細]
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2024-09-11 17:48
應用文章
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BT產品應用(17)使用QPix400系統(tǒng)自動篩選顏色克隆:如藍白克隆篩選
- 在分子克隆過程中,篩選含有插入基因片段的重組質粒轉化子是一項必不可少的工作。一種稱為“藍白斑篩選”的顏色報告基因可以根據克隆顏色快速區(qū)分出重組和非重組的克隆。盡管藍白篩選提供了一個直觀的辨別重組克隆的方法,但是,在克隆挑取過程中,過多的人工操作過程存在主觀、速度慢、易出錯等問題。
Molecular Devices QPix400系列微生物克隆篩選系統(tǒng)提供了一個自動化的解決方案,尤其針對藍白克隆篩選,通過白光成像提供了準確GX的克隆轉化檢測方法。這個解決方案整合了QPix Software2.0藍白篩選模塊、QPix顏色濾片以及可調平板適配器。[詳細]
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2021-02-18 17:12
應用文章
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BT產品應用(28)遠程控制的QPix克隆篩選系統(tǒng)
- 我們常說生物學實驗的設計和實施有時更像是藝術而不是科學。這主要是指手工操作導致的實驗誤差,而且這些手工操作導致的小偏差很難在發(fā)表的實驗方法中得到體現(xiàn)。在這個案例分析中,我們的自動化解決方案(Advanced Engineering WorkflowSolutions,AWES)團隊與客戶(公司X)緊密合作,通過提供全面的應用程序編程接口(API)控制QPix微生物克隆篩選系統(tǒng)的軟件,從而減少生物學實驗中的“藝術性”。[詳細]
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2024-09-12 18:32
應用文章
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BT產品應用(14)QPix400 微生物篩選系統(tǒng)-更多功能,更多微生物
- 無論你是從事發(fā)現(xiàn)新一代抗生素,或者挑選克隆測序,還是把微藻轉化為生物燃料工廠的研究,為了發(fā)現(xiàn)的克隆,你可能需要反復地篩選成千甚至上百萬個克隆。 而且除了篩選,還需要克隆涂布和克隆復制。[詳細]
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2021-02-18 17:03
應用文章
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BT產品應用(21)使用QPix400系統(tǒng)快速將樣品復制到瓊脂平板
- 使用QPix400系統(tǒng)可以進行常規(guī)的液體樣品相同微孔板之間的文庫復制(比如從96復制到96孔板,從384復制到384孔板)。但是,將文庫樣品從瓊脂平板到瓊脂平板進行固體到固體的復制方式也是一個很有用的工具,比如可以進行基因抗性的篩選,或者進行酵母雙雜交篩選。本文描述了如何在QPix400系統(tǒng)上面進行文庫復制操作(Figure 1),比如將樣品從液體復制到固體,從固體復制到固體。[詳細]
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2024-09-12 18:32
應用文章
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BT產品應用(8)通過篩選YJ圈發(fā)現(xiàn)新型抗生素
- 為了滿足針對耐藥性微生物ZL不斷增長的需求,開發(fā)出了基于競爭的自適應進化篩選方法。這種方法存在的一個難題就是如何從一個多樣性的微生物克隆庫中找到高價值的菌株,篩選到適合下游藥物開發(fā),能夠產生新型抗生素的候選菌株。[詳細]
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2021-02-18 16:56
應用文章
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BT產品應用(23)QPix 400系統(tǒng)開拓多色熒光篩選功能
- 細菌篩選常見于分子克隆構建重組細菌的實驗中。它也被用于檢測特定蛋白質的表達和活性。QPix 400系列微生物克隆篩選系統(tǒng)可檢測一系列熒光波長,從而在細菌實驗中開拓了多色熒光篩選功能。[詳細]
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2024-09-12 18:32
應用文章
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BT產品應用(36)快速篩選高表達細胞膜蛋白的哺乳動物細胞克隆
- ClonePix 2 技術使細胞在半固體培養(yǎng)基中生長形成懸浮的細胞克隆,然后利用熒光檢測和標志物對這些克隆成像。此篇應用文章將介紹該技術的一個新應用,即基于細胞表面蛋白表達量的細胞克隆篩選。[詳細]
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2024-10-09 10:19
應用文章
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BT產品應用(12)雜交瘤細胞篩選技術
- 1986 年,美國 FDA 批準了DY個單克隆抗體藥物上市,距今已快 30 年。目前,全世界共有超過 40 個ZL用抗體藥物被批準上市,每年實現(xiàn)超過 600 億美元的銷售額。在國際及國內形成了抗體藥物開發(fā)熱潮。巨大的市場前景和現(xiàn)存的技術問題及壁壘并存的現(xiàn)實不可避免地引發(fā)抗體藥物新一輪技術革命。而其結果又將毫無疑問地改變抗體藥物的市場格局。
但是,抗體不管是作為檢測試劑,還是作為具有巨大市場前景的ZL藥物。首先,我們都需要通過篩選找到單克隆抗體。傳統(tǒng)的單克隆抗體制備方法主要是雜交瘤技術。這是目前比較成熟,技術難度比較低,大多數實驗室仍然在使用的方法。
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2021-02-18 17:01
應用文章
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BT產品應用(25)高效篩選優(yōu)質細胞系
- 在過去的十年里,采用哺乳動物細胞生產單克隆抗體和重組蛋白促進了生物ZL蛋白的繁榮。從1986年DY個重組蛋白藥物獲批到2011年,總共有96個重組蛋白藥物獲批上市1, 3。市場從2014年到2019的增長率預計為12.5%,到2019年預計達到39.6億美元2。推動這一發(fā)展的關鍵因素包括:日益增長的單抗藥物需求、新穎細胞系技術的出現(xiàn)以及疫苗產量的提升2。隨著競爭加劇,對降低細胞系開發(fā)成本以及縮短上市時間的需求變得愈發(fā)緊迫。本文概述了細胞系開發(fā)的流程,并介紹了高通量篩選方法用于更快、更方便地開發(fā)高產細胞系。[詳細]
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2024-10-09 10:15
應用文章
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BT產品應用(11)單克隆抗體雜交瘤細胞篩選技術
- 1986年,美國FDA批準了DY個單克隆抗體藥物上市,距今已快30年。目前,全世界共有超過40個ZL用抗體藥物被批準上市,每年實現(xiàn)超過600億美元的銷售額。在國際及國內形成了抗體藥物開發(fā)熱潮。巨大的市場前景和現(xiàn)存的技術問題及壁壘并存的現(xiàn)實不可避免地引發(fā)抗體藥物新一輪技術革命。而其結果又將毫無疑問地改變抗體藥物的市場格局。
但是,抗體不管是作為檢測試劑,還是作為具有巨大市場前景的ZL藥物。首先,我們都需要通過篩選找到單克隆抗體。傳統(tǒng)的單克隆抗體制備方法主要是雜交瘤技術。這是目前比較成熟,技術難度比較低,大多數實驗室仍然在使用的方法。
在單克隆抗體制備過程中,有兩次篩選過程,DY次是使用選擇性培養(yǎng)基選出雜交瘤細胞;第二次就是進一步選出能產生我們需要的抗原特異性抗體的雜交瘤細胞。[詳細]
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2021-02-18 16:59
應用文章
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BT產品應用(34)自定義涂布模式提升QPix 460微生物克隆篩選系統(tǒng)在樣品處理上的靈活性
- QTray 瓊脂板用于大規(guī)模的培養(yǎng)和篩選微生物克隆。通過加入 48 格的分隔器,多種微生物樣品可以在同一塊 QTray 上單獨培養(yǎng) ??梢岳?QPix 460 系統(tǒng)輕松涂布分格的 QTray 板。不過同樣可以在不分格的QTray 板上培養(yǎng)不同的微生物樣品,當然這需要克服交叉污染的隱患。在這個應用文章中,我們將闡述 QPix 460 系統(tǒng)如何通過自定義涂布模式用于涂布不分格的 QTray 板,從而降低樣品間交叉污染的可能性。[詳細]
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2024-09-11 17:47
應用文章
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BT產品應用(38)CloneSelect單細胞分離系統(tǒng)與傳統(tǒng)單細胞克隆方法的比較研究
- 有限稀釋是一個普遍接受的建立單克隆性的方法,它基于統(tǒng)計概率因此只有很少一部分( 10-30% )的微孔能被接種單個細胞。[詳細]
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2021-02-19 12:01
應用文章
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BT產品應用(18)雜交瘤高通量篩選解決方案——讓抗體藥物篩選贏在起點
- 眾所周知,單克隆抗體在科研、疾病診斷以及ZL等方面具有非常重要的作用。單克隆抗體藥物具有靶向性明確、低毒性和不良反應少等優(yōu)點,在腫瘤的生物ZL及靶向ZL中發(fā)揮重要作用。目前,抗體藥物市場前景廣闊,已成為制藥行業(yè)中發(fā)展Z快、活力和技術含量ZG的領域。為了獲得具有特異性的抗體,首先需要篩選能夠表達分泌特異性抗體的雜交瘤細胞系。實驗室常規(guī)的方法就是通過小鼠脾細胞和瘤細胞的融合,獲得雜交瘤細胞。通過在培養(yǎng)基里加入篩選壓力,只有脾細胞和瘤細胞成功融合的雜交瘤能夠存活。篩選雜交瘤的主要挑戰(zhàn)在于如何快速、GX地從成千上萬的雜交瘤細胞里面找到生長良好、能夠分泌特異性抗體的克隆,并且盡可能確保為單克隆。[詳細]
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2024-10-09 10:19
應用文章
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BT產品應用(9)QPix400系列微生物特異性專業(yè)挑針及識別軟件
- 自動化克隆篩選解決方案的價值遠不止于E.coli方面的研究。Molecular Devices公司的QPix400系列自動化微生物克隆篩選系統(tǒng)就是為了滿足跨學科多領域多類型微生物方面的研究而設計的。強大而通用的克隆識別算法聯(lián)合專用的挑針使這個系統(tǒng)適用于挑取、涂布以及復制細菌、真菌、藻類、噬菌體和酵母等多種微生物。[詳細]
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2024-09-12 18:32
應用文章
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BT產品應用(19)使用CloneSelect Imager系統(tǒng)客觀定量細胞遷移試驗
- 細胞遷移在腫瘤形成、免疫作用以及傷口愈合等過程中發(fā)揮重要作用。
不正常的細胞遷移是心血管、癌癥等疾病的一個重要特征。CloneSelect Imager系統(tǒng)可以在體外定量客觀檢測ZL藥物的效果、細胞培養(yǎng)基對細胞遷移的影響以及研究細胞和細胞之間的相互作用。系統(tǒng)配備的遷移軟件模塊可以基于細胞識別客觀檢測細胞遷移的速率。[詳細]
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2021-02-18 17:16
應用文章
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BT產品應用(2)單克隆抗體藥物
- BT產品應用(2)單克隆抗體藥物[詳細]
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2021-02-03 11:23
應用文章
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BT產品應用(7)使用暗礁珊瑚熒光蛋白ZsGreen作為可溶性報告基因建立定向突變篩選平臺
- 在開發(fā)新型ZL性藥物的過程中,結構和功能的研究通常需要大量的可溶性蛋白。某些難溶蛋白質在宿主內表達后,通常發(fā)生聚集或者錯誤折疊形成包涵體沉淀出來,發(fā)生沉淀的蛋白一般都沒有活性,需要耗費大量的時間優(yōu)化表達和折疊的條件?,F(xiàn)在已有許多技術用于改善蛋白的表達可溶性,比如:篩選合適的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、誘導劑濃度以及宿主菌種類等;也可以在變性條件下純化包涵體獲得重組蛋白,然后重新折疊復性獲得活性蛋白。除此之外,使用蛋白工程技術設計合適的蛋白結構,也可以改善蛋白的表達和可溶性水平。所有這些方法都需要花費大量時間進行優(yōu)化。
[詳細]
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2021-02-05 13:59
應用文章
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BT產品應用(15)使用CloneSelect Imager系統(tǒng)檢測細胞密度和細胞生長曲線
- 隨著大量的細胞系作為表達模型廣泛應用于蛋白體外表達,對細胞的生長增值狀態(tài)進行定量檢測變的越來越重要。細胞的增值效率即可用于顯示某個化合物對于細胞生長的YZ或促進效果,也可以用于反應一株細胞系的生長特性。本文ZD描述了CloneSelect Imager系統(tǒng)如何使用簡單直觀、客觀、非侵入性方法代替?zhèn)鹘y(tǒng)主觀、費時的顯微鏡觀察,在不同時間點快速準確檢測細胞密度。[詳細]
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2021-02-18 17:05
應用文章
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