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基因多態(tài)性的檢測(cè)方法
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本文由 上海士鋒生物科技有限公司 整理匯編
2024-10-03 06:21 212閱讀次數(shù)
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基因多態(tài)性的檢測(cè)方法
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基因多態(tài)性的檢測(cè)方法
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2018-09-27 10:00
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2012-06-29 00:00
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2008-01-08 00:00
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2018-09-07 15:33
期刊論文
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人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)檢測(cè)試劑盒
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2015-03-10 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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48T人再生基因蛋白IVELISA 檢測(cè)試劑盒試劑的準(zhǔn)備
- 人再生基因蛋白IVELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長因子試劑盒,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對(duì)試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。試驗(yàn)原理: REG-4試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知REG-4濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將REG-4和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中REG-4的濃度呈比例關(guān)系?! “踩员苊庵苯咏佑|終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人再生基因蛋白IVELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人再生基因蛋白IVELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人再生基因蛋白IVELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的REG-4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的REG-4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlMLCK(myosinlightchainkinase)肌球蛋白輕鏈激酶抗體0.2mlMIF(MacrophageMigrationInhibitoryFactor)巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子抗體0.1mlMIF(MacrophageMigrationInhibitoryFactor)巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子抗體0.2mlMIP-1α(macrophageinflammatoryprotein1α)巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體0.1mlMIP-1α(macrophageinflammatoryprotein1α)巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體0.2mlMouseIgA抗小鼠IgA抗體0.2mlα-MSH/POMC(alpha-melanocytestimulatinghormone)α黑素細(xì)胞刺激素/阿黑皮素原抗體0.2mlMIP-1β(macrophageinflammatoryprotein1β)巨噬細(xì)胞炎癥因子1β抗體0.1mlMIP-1β(macrophageinflammatoryprotein1β)巨噬細(xì)胞炎癥因子1β抗體0.2mlMIP2(myocardialischemicpreconditioningupregulatedprotein2)巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗體0.1mlMIP2(myocardialischemicpreconditioningupregulatedprotein2)巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗體0.2mlMIP4/CCL18(Macrophageinflammatoryprotein4)巨噬細(xì)胞炎癥蛋白18抗體0.2mlMITF(MicrophthalmiaassociatedTranscriptionFactor)小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體0.2mlMMP-1(matrixmetalloproteinases-1)基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體0.1mlMMP-1(matrixmetalloproteinases-1)基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體0.2mlChickenIgM/APC熒光素APC標(biāo)記雞IgM0.1mldogIgG/APC熒光素APC標(biāo)記狗IgG0.1ml若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請(qǐng)來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機(jī):18939846276,13482524164[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
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IL-2和IFN-γ基因?qū)BV基因疫苗免疫協(xié)同效果的影響
- IL-2和IFN-γ基因?qū)BV基因疫苗免疫協(xié)同效果的影響[詳細(xì)]
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豚鼠降鈣素基因肽酶聯(lián)免疫分析試劑盒試驗(yàn)方法
- 檢測(cè)范圍:96T1.5ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定豚鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)水平。用純化的豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP),再與HRP標(biāo)記的降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液22.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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非小細(xì)胞肺癌患者ALK基因融合的數(shù)字PCR檢測(cè)
- 間 變 性 淋 巴 瘤 激 酶(anaplastic lymphomakinase,ALK)基因融合通常為ALK基因的3'端(一般保留了完整的酪氨酸激酶編碼區(qū)域)和其它基因的5'端發(fā)生融合。目前,NSCLC中ALK融合伴侶基因除了Z常見的EML4基因外,還發(fā)現(xiàn)了KIF5B、TFG、KLC1等(Figure 1)。ALK融合在我國NSCLC中的發(fā)生率約 5.6%,其中腺癌的發(fā)生率為6.6%~9.6%。[詳細(xì)]
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2019-12-20 17:01
實(shí)驗(yàn)操作
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美國3130基因分析儀
- 美國3130基因分析儀[詳細(xì)]
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2015-11-11 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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美國3130基因分析儀
- 美國3130基因分析儀[詳細(xì)]
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2015-11-11 00:00
課件
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高通量基因研磨儀-Zxin
- 高通量基因研磨儀-Zxin[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:48
實(shí)驗(yàn)操作
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睪丸凋亡基因抗體
- 睪丸凋亡基因抗體[詳細(xì)]
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2024-09-20 02:09
實(shí)驗(yàn)操作
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自然:如何消除基因數(shù)據(jù)的不一致
- 自然:如何消除基因數(shù)據(jù)的不一致[詳細(xì)]
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2013-05-18 00:00
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