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2014-08-21 00:00 356閱讀次數(shù)

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• 人和肽素(copeptin)ELISA kit說明書

  人和肽素(copeptin)ELISA kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  標準

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• 人和肽素(copeptin)ELISA kit文獻

  人和肽素(copeptin)ELISA kit文獻[詳細]

  2014-08-21 00:00

  操作手冊

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• 人和肽素（copeptin）ELISA試劑盒使用說明書

  本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人和肽素(copeptin)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人和肽素(copeptin)水平。用純化的人和肽素(copeptin)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入和肽素(copeptin)，再與HRP標記的羊抗人抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的和肽素(copeptin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人和肽素(copeptin)含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：9pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍濃縮洗滌液20ml×1瓶30ml×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為6pmol/L，4pmol/L，2pmol/L，1pmol/L，0.5pmol/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：0.2pmol/L-8pmol/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 大鼠Copeptin（Copeptin）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網址：http://www.westang.com大鼠Copeptin（Copeptin）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Copeptin單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的Copeptin與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠Copeptin，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，Copeptin濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Copeptin濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：80ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入4ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Copeptin含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Copeptin檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的大鼠Copeptin。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 人Copeptin（Copeptin）ELISA試劑盒說明書

  人Copeptin（Copeptin）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Copeptin單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的Copeptin與單抗結合，加入生物素化的抗人Copeptin，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，Copeptin濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Copeptin濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿至少作1：2稀釋（取100ul，加標本稀釋液100ul,稀釋2倍）。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Copeptin含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Copeptin檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人Copeptin。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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• 人降脂素ELISA Kit說明書

  人降脂素ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-22 00:00

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• 人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit說明書

  人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-22 00:00

  其它

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• 人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit說明書

  人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit說明書[詳細]

  2024-09-10 23:06

  操作手冊

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• 人肌抑素(MSTN)ELISA Kit說明書

  人肌抑素(MSTN)ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  期刊論文

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• 人胰高血糖素樣肽（GLP-1）ELISA試劑盒說明書

  用途：人GLP-1ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的GLP-1。本試劑盒可以檢測天然和重組的GLP-1。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。ELISA試劑盒試驗原理：人GLP-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知GLP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將GLP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中GLP-1的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：240pmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗GLP-1抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（60ml）1瓶（30ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒有實驗室可完全保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據(jù)當?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。2．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。3．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。4．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。ELISA試劑盒操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：240pmol/L（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。120pmol/L（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液60pmol/L（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液30pmol/L（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液15pmol/L（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液7.5pmol/L（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pmol/L（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（20×）的稀釋：蒸餾水20倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pmol/L）A240240樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B120120樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C6060樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D3030樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E1515樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F7.57.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品結果分析以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的GLP-1標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的GLP-1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。ELISA試劑盒試劑盒性能1．靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2．特異性：不與人其它細胞因子反應。3．重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• 人皮質抑素/皮質醇穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA kit說明書

  人皮質抑素/皮質醇穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  選購指南

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• 人黑色素ELISA Kit說明書

  人黑色素ELISA Kit說明書[詳細]

  2014-08-21 00:00

  安裝說明

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• Kainos FGF-23 ELISA Kit說明書

  KainosLaboratories是日本的生物公司，其生產的FGF-23ELISAKit和ADAMTS13-cleaved廣泛應用于各大醫(yī)藥企業(yè)，上海起發(fā)實驗試劑有限公司正式為您帶來KainosLaboratories高品質的產品，歡迎來電查詢http://www.kainos.co.jpKainosLaboratories代理KainosLaboratoriesZG代理，KainosLaboratories上海代理，KainosLaboratories總代，KainosLaboratories北京代理ThiskitcapturesADAMTS13-cleavedproductsusingasandwichmethodwiththeanti-GSTmousemonoclonalantibodyandtheperoxidase-conjugatedmousemonoclonalanti-N10antibody.First,theanti-GSTmousemonoclonalantibodyimmobilizedontothemicroplatereactswiththeVWF73substrate（GST-VWF73-His）.Thesampleisthenappliedtothemicroplate,onwhichADAMTS13cleavestheVWF73substrate.Byapplyingthemousemonoclonalanti-N10antibodyconjugatedwithhorseradishperoxidase（HRPconjugatedantibody）,thecleavageproductissandwichedbetweenthetwoantibodies.BecausetheamountofthecleavageproductsdependsontheADAMTS13activity,theamountoftheenzyme-labeledantibodiesthatbindtothecleavageproductsalsoreflectthelevelofADAMTS13activity.Therefore,theplasmaADAMTS13activitycanbedeterminedbycolorimetricallymeasuringtheamountofdetachedoxidized（colored）TMBZusingureahydrogenperoxide（H2O2）and3,3’,5,5’-Tetramethyl-benzidine（TMBZ）asthesubstrates.上海起發(fā)實驗試劑有限公司實驗試劑一站式采購服務商1：強大的進口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。2：產品種類齊全，經營超過700多個品牌，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。3：提供加急服務，貨品一般1-2周到貨。4：富有競爭力的價格優(yōu)勢，絕大部分價格有優(yōu)勢。5：多年積累良好的信譽，大部分客戶提供貨到付款服務?？蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等知名藥企。6：我們還是Santa,AdvancedBiotechnologiesInc,AthensResearch&Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FDNeurotechnologies,Inc.FormuMaxScientific,Inc,Genebridege,GlycotopeBiotechnologyGmbH;iduron,InnovativeResearchofAmerica,Ludger,neuroprobe,omicronbio,Polysciences,prospecbi,QA-BIO,quickzyme,RESEARCHDIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLinkBioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。7：我們還是invitrogen,qiagen,Tempshield,Inc.am,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批發(fā)，歡迎合作。[詳細]

  2018-09-29 10:02

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• Protein A ELISA Kit 9333-1說明書

  P/N9333-1RepligenA蛋白ELISA試劑盒ProteinAELISAKitP/N9333-1上海起發(fā)實驗試劑有限公司ProteinAELISAKitP/N9333-1專業(yè)代理，具體產品信息歡迎電詢：4006551678。ProteinAELISAKitHighlightsAlargepercentageoftheworld'scommercialsupplyofantibodyreliesonaRepligenmanufacturedproteinAligandforpurificationandRepligen’sELISAkitforproductrelease.2kitsforthemostaccuratedetectionandquantitationofleachedproteinARecombinantProteinAKitMabSelectSuReKitSuperiorinterandintrakitconsistencyforunparalleledreproducibilityPolyclonalchickencaptureantibodyforgreaterProteinAspecificityBiotinylatedrabbitanti-ProteinAdetectionantibodyforgreatersensitivityMatchedstandardsforthegreatestquantitationaccuracyThreesampleprepprotocolsforsuperiormethodoptimization上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]

  2018-09-29 10:02

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• 組胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59221）1、應用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測。深化此實驗可用于細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明組胺（β-咪唑乙胺）是人體中Z重要的介質，它主要存在于過敏反應的起始階段（速發(fā)型過敏）。組胺是由組胺酸經脫氨基作用產生的。組胺幾乎存在于機體的所有組織中，主要儲存于柱狀細胞和嗜堿性粒細胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無活性的復合體性存在，只有當需要的時候才會釋放。像其它的介質一樣，組胺不僅能調節(jié)過敏反應的各種臨床癥狀，也可以調節(jié)終止過敏反應的一系列效應。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測組胺的方法有：定量檢測各種速發(fā)型過敏反應中嗜堿性白細胞釋放組胺的量，也可以檢測過敏藥物ZL后各種體液（血漿，尿液，細胞培養(yǎng)上清）中組胺的量。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標抗原競爭性結合到包被在微孔中的抗體結合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結果可以從標準曲線上直接獲取。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時，試劑在有效期內穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲存血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇斣趯嶒為_始前離心以除去所有的顆粒性物質。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性5小時3個月2年尿液實驗必須使用自然產生的尿液，也可使用24小時內產生的尿液。收集病人24小時內產生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計算結果，請確定尿液的總體積。實驗開始前請先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽直射，避免反復凍融。儲存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時3天6個月細胞培養(yǎng)上清使用細胞培養(yǎng)上清作樣品，一般沒特殊注意事項細胞培養(yǎng)基內的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測必須用肝素化全血，具體信息請見相應的說明書（RE95000）6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍色，即用，內含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，200倍濃縮，內含辣根過氧酶標記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標準品A-G，凍干，用于血漿樣品的定標。內含：組胺、人血漿。具體濃度請見試劑瓶標簽或質控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質控1+2，凍干，內含：組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細胞培養(yǎng)標準品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和細胞培養(yǎng)樣品的定標。內含：組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質控1+2，即用，內含：組胺、人尿液（酸化的）。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×2.25mlACYLREAG?；噭?，即用，內含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，5倍濃縮，內含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液，紫色，即用，內含：Tris緩沖液、苯酚（pH＜7.5時顏色會發(fā)生改變＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，內含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;20;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲器的8道移液器7）洗滌瓶，自動或半自動洗板機8）酶標儀（參考波長：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進行檢測，下述體積為檢測32人份時所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性20ml檢測緩沖液100ml蒸餾水1：52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標準品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月血漿質控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月10ul（*）酶聯(lián)物2ml檢測緩沖液1:200臨時配置,只能使用一次18-25℃30分鐘（*）在稀釋前,確保塞子內無殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標準品的樣品,應當在酰化前用相應的稀釋液稀釋,尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液（Cat.no.KEHP711）,試劑盒內未提供。8.3樣品的?；迷嚬軠蕚錁悠纷⒁獠荒苎獫{標準曲線確定酰化尿液或細胞培養(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標準曲線確定?；獫{樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標準品、血漿質控品和病人樣品分別100ul加入到相應的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入20ul酰化試劑，加入?；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。8.3.2尿液，細胞培養(yǎng)上清1將U/C標準品、尿液質控品和病人尿液或細胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液，旋渦混合。如果指示劑變成無色，說明溶液的pH值很低，樣品中含有很多酸性物質。在這種情況下，再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?；噭?，加入?；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。注意：酰化處理好的樣品可在2-8℃下存放一晚，-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實驗步驟1將?；幚磉^的標準品、質控品和病人樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時。5移去粘性金屬板，棄取孔內反應物，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細胞培養(yǎng)上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內450nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、期望值實驗結果不能當作任何ZL結果的**原因，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：血漿尿液24小時尿液自然產生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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• 腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59251）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統(tǒng)和大腦產生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經細胞瘤和神經節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結構相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育，此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質控品1+2即用,內含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內含：兒茶酚-氧位-甲基轉移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內含：抗腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標準品、已稀釋好的質控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內的殘余液體加入到提取板的相應微孔內，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清（綠色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結果不能當作判斷任何ZL結果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜20＜110＜125＜0.68本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59261）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統(tǒng)和大腦產生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經細胞瘤和神經節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結構相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育，此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?×6×2.5mlCALA-F標準品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質控品1+2即用,含:[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內含：兒茶酚-氧位-甲基轉移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內含：抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質控品的提?。ㄌ崛“?，手動操作版）1）將標準品、已稀釋好的質控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭⒓椿旌暇鶆?。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內的殘余液體加入到提取板的相應微孔內，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清（藍色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結果不能當作判斷任何ZL結果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜90＜535＜600＜3.55本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

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• 多巴胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59161）1、應用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測，可手動操作，也可自動操作。進一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明兒茶酚氨類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統(tǒng)和大腦產生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚氨激素及其代謝產物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經細胞瘤和神經節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，所以用戶可使用各種各樣的動物材料進行實驗。如果用此試劑盒測大鼠、小鼠或其它動物，則兒茶酚氨的化學結構與動物的相同。3、實驗原理此固相酶聯(lián)免疫吸附實驗利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時間之內，加入的溶液抗在體可直接與抗原分子上的一個表位結合。樣品中的抗原與酶標二抗（可與抗原分子上的不同表位結合）在包被孔中溫育。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接用標準曲線確定。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒所提供的試劑足夠做96孔單孔檢測或48孔雙份檢測。注意此包被板也可用于檢測腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺。數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,內含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質控品1+2即用,含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。2×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內含：兒茶酚-氧位-甲基轉移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫羅蘭色，即用，內含：抗多巴胺抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。4×13mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內含：0.1M的HCl，指示劑。2×3mlACYLREAG?；噭┘从茫瑑群憾谆柞０?，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，內含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器9）樣品稀釋用試管。8、手動操作8.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標準品無需稀釋。8.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.3樣品、標準品和質控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標準品、已稀釋好的質控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液225ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h9、實驗步驟（手動操作）9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質控品的酶化注意如果使用自動置換型移液器，請將取樣吸頭內的殘余液體加回到提取板相應的微孔內。將提取板置于一斜坡位置比較適當?？蒲杏媒M織勻漿和細胞培養(yǎng)上清可按如下建議處理：細胞培養(yǎng)上清必須根據(jù)其培養(yǎng)基及其相應濃度進行處理：根據(jù)尿液樣品的操作說明（至少提取20ul上清液），未稀釋樣品的靈敏度大概為1.0ng/ml。如果基質內添加了血清（FCS），血漿（至少提取500ul上清）操作的靈敏度可以是5pg/ml。無高氯酸的組織勻漿可用做勻漿樣品，具體信息請咨詢IBL漢堡公司。9.3檢測尿液和血漿中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2在尿液樣品、標準品和質控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標準品、質控品和尿液樣品分別10μL加入到相應的微孔中。將100ul提取好的血漿樣品加入到相應的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育120min5移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育60min8移去粘性金屬板，棄取孔內反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）10、自動操作步驟10.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標準品無需稀釋。10.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前10.3樣品、標準品和質控品的提取（提取板）1）將標準品、已稀釋好的質控品、已稀釋好的尿液樣品各30μL和750μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入750μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入450μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。10.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液450ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶聯(lián)物15ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h11、實驗步驟（自動操作）11.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。11.2實驗步驟在使用自動方法做實驗時，我們建議按1：10的比例預先稀釋提取好的標準品、質控品和尿液樣品（如果是手動操作則用Release緩沖液進行稀釋）。如果稀釋了，第二個步驟可簡化為：將已提取好的血漿樣品、已提取好的標準品（按1：10的比例預先稀釋）、質控品和尿液樣品各100μL加入到微孔中。在進行預稀釋時，應當考慮到自動操作的死容積。1）在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2）在尿液樣品、標準品和質控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標準品、質控品和尿液樣品分別10μL加入到相應的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min5）棄取孔內反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。6）每孔加入100μL酶聯(lián)物7）蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min8）棄取孔內反應液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。9）加底物液和終止液時，其時間間隔應相同10）每孔加入200μL底物液11）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動操作時的溫度超過25℃時，則應相應的將溫育時間縮短至30min。12）每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。13）加終止液后60min之內405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）12、期望值實驗結果不能當作判斷任何ZL結果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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  2024-09-29 09:16

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  人胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GLP-1單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的GLP-1與單抗結合，加入生物素化的抗人GLP-1，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，GLP-1濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中GLP-1濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：50ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液至少作1：20稀釋（取10ul，加標本稀釋液190ul,稀釋20倍）。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成100ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入100ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GLP-1含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的GLP-1檢測濃度小于0.1ng/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人GLP-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于10.2％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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