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猴黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
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本文由 上海瓦蘭生物科技有限公司 整理匯編
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猴黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定猴血清,血漿及相關液體樣本中黃體生成素(LH)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴黃體生成素(LH)水平。用純化的猴黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入黃體生成素(LH),再與HRP標記的黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴黃體生成素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍:80ng/L-2300ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月www.biokanu.com
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猴黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- 猴黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定猴血清,血漿及相關液體樣本中黃體生成素(LH)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴黃體生成素(LH)水平。用純化的猴黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入黃體生成素(LH),再與HRP標記的黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴黃體生成素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍:80ng/L-2300ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月www.biokanu.com[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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猴促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 使用目的:本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關液體樣本中促黃體生成素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴促黃體生成素(LH)水平。用純化的猴促黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH),再與HRP標記的促黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴促黃體生成素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(6400ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。3200ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液1600ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液800ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液400ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液200ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人黃體生成素(LH)ELISA kit說明書
- 人黃體生成素(LH)ELISA kit說明書[詳細]
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2014-08-21 00:00
標準
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豬黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒
- 豬黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒[詳細]
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2015-09-18 00:00
實驗操作
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大鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中促黃體生成素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠促黃體生成素(LH)水平。用純化的大鼠促黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH),再與HRP標記的促黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠促黃體生成素(LH)濃度。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人黃體生成素(LH)ELISA kit質控報告
- 人黃體生成素(LH)ELISA kit質控報告[詳細]
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2014-08-21 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠促黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒
- 大鼠促黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒[詳細]
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2016-03-18 00:00
實驗操作
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小鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。ELISA試劑盒檢測范圍:96T70pg/ml-2400pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中黃體生成素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠黃體生成素(LH)水平。用純化的小鼠黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入黃體生成素(LH),再與HRP標記的黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠黃體生成素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(4800pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELISA試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2400pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液1200pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液600pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液300pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液150pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠黃體生成素(LH)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T70pg/ml-2400pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中黃體生成素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠黃體生成素(LH)水平。用純化的小鼠黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入黃體生成素(LH),再與HRP標記的黃體生成素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃體生成素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠黃體生成素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(4800pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠促黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒說明書
- 大鼠促黃體生成素(LH)ELISA檢測試劑盒說明書[詳細]
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2016-03-03 00:00
實驗操作
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鴨促黃體生成素(LH)elisa試劑盒使用說明書
- 鴨促黃體生成素(LH)elisa試劑盒使用說明書[詳細]
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2024-09-28 01:21
課件
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猴子促黃體生成激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- www.biokanu.com猴子促黃體生成激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定猴子血清,血漿及相關液體樣本中促黃體生成激素(LH)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴子促黃體生成激素(LH)水平。用純化的猴子促黃體生成激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成激素(LH),再與HRP標記的促黃體生成激素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成激素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴子促黃體生成激素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:3600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為2400ng/L,1600ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L)。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:100ng/L-3000ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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激素六項之黃體生成素(LH)ELISA試劑盒使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4黃體生成素(LH)ELISA試劑盒(德國DRG:EIA-1289)1、應用范圍DRG公司的LH酶聯(lián)免疫吸附試劑盒可用于血清中黃體生成素(LH)的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。2、前言說明在受到下丘腦釋放的黃體生成素釋放激素(LH-RH或者Gn-RH)的影響下,男性和女性的垂體前葉都可以產(chǎn)生LH(黃體生成素)。在男性中,LH也叫做促間質細胞激素(ICSH),它是一種分子量大約為30000道爾頓的糖蛋白。它是由兩條不同的氨基酸鏈通過非共價鍵結合形成的復合物,一條α鏈,一條β鏈。α鏈與在人促甲狀腺激素(TSH)、卵泡刺激素(FSH)和人絨毛膜促性腺激素中找到的α鏈糖蛋白類似。這些激素的不同主要是由于他們β鏈的氨基酸組成不同所造成的,這也使它們產(chǎn)生了不同的免疫學功能。男性中LH的分泌是間歇性的,它的基本功能是刺激間質細胞(萊迪希細胞)分泌睪酮。婦女體內LH濃度的變化會受到正常月經(jīng)復雜排卵循環(huán)的影響,這也依賴于沿性腺-下丘腦-垂體軸的一系列激素活動。排卵前孕酮和雌二醇水平的降低啟動了每一個月經(jīng)周期。隨著激素水平的降低,下丘腦就增加促性腺激素釋放激素(GnRF)的分泌,它可依次刺激垂體增加FSH的生產(chǎn)和分泌。增加的FSH水平在卵泡階段可刺激一些卵泡的成熟,其中的一個卵泡就會成熟為含卵子的卵泡。隨著卵泡的發(fā)育,雌二醇就開始分泌,剛開始時很慢,但經(jīng)過12或13天的正常循環(huán)后它就開始迅速增加。因為垂體的直接刺激和增加的GnRF和FSH水平,雌二醇的就開始迅速增加,隨之LH就開始釋放了。而這些事件正好組成了排卵前期。在LH達到Z高水平后,排卵作用大約會持續(xù)12到18個小時。排卵后就會形成可分泌孕酮和雌激素(這兩種激素是LH的兩個反饋調節(jié)物)的黃體。黃體期迅速的緊隨排卵期而來,黃體期明顯表現(xiàn)為高孕酮水平,雌二醇第二增加,低LH和FSH水平。低LH和FSH水平是沿下丘腦-垂體軸雌二醇和孕酮負反饋反應的結果。受孕后,胚胎的發(fā)育可產(chǎn)生hCG,hCG使得黃體繼續(xù)產(chǎn)生孕酮和雌二醇。如果沒有受孕,黃體就會退化,相應的孕酮和雌二醇水平就會降低,從而導致了月經(jīng)的形成。隨著這些激素低激素水平的形成,下丘腦就又再次開始一月經(jīng)周期患性腺機能退減的病人,其血清LH的濃度會增加。由于卵巢的發(fā)育不成熟、原發(fā)性的卵巢功能衰竭、多囊卵巢疾病或絕經(jīng)等原因,女性體內類固醇激素的分泌會減少,而且在這些情況下,LH的分泌沒有受到調節(jié)。在男性中,但睪丸發(fā)育不正?;虼嬖跓o睪畸形時,也同樣會失去調節(jié)激素。在原發(fā)性睪丸衰竭和克氏綜合征患者中,盡管在雄性激素持續(xù)分泌的情況下LH濃度沒有必要提高,但我們也可發(fā)現(xiàn)其體內存在著高濃度的LH。在腎衰竭、肝硬化、甲狀腺功能亢進和嚴重饑餓的情況下,LH的濃度也可出現(xiàn)提高。垂體前葉激素的分泌不足也可能導致低LH水平。正如人們所預測的,低LH水平可能導致男性和女性不育。雖然LH的低水平在垂體前葉對GnTH刺激反應失效的情況下也會出現(xiàn),但由于下丘腦GnRH分泌的降低,LH的水平就有可能降低。因此低LH水平可表明垂體或下丘腦存在功能障礙,但具體的問題根源必須通過其它實驗確定。在下丘腦、垂體或性腺功能障礙的鑒別診斷中,LH濃度的檢測常與FSH一起進行檢測(以為兩者的功能緊密相連)。此外,激素的水平也可用來確定是否絕經(jīng)、計算排卵時間和監(jiān)測內分泌治LX果。3、實驗原理DRG公司的LH酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗(ELISA)。反應板上的微檢測孔包被有能結合LH分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性LH的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種聯(lián)結有辣根過氧化物酶的抗LH抗血清。孵育后,用洗滌液洗去未結合的酶聯(lián)物。辣根過氧化物酶符合物的總量與樣本中LH的濃度成正相關。加入底物溶液后,顯出的顏色強度與病人樣品中LH的濃度成正比。4、試劑盒組成:1)微量反應板,1塊(96孔),包被了抗LH的單克隆抗體。2)標準系列:6支,凍干,1ml,濃度:0,10,20,40,100,200mIU/ml3)酶聯(lián)物,1支,11ml,辣根過氧酶標記的抗LH抗血清,0.3%的Proclin作為防腐劑。4)底物液,14ml(TMB)5)終止液:1支,0.5MH2SO4,14ml,避免接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。用于樣品稀釋的零標準品應視需要而定。5、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)酶標儀2)極ng確移液器,25;50;100μl.3)蒸餾水4)吸水紙5)計時器6)半對數(shù)紙6、儲存條件未開啟的試劑在28℃下貯存,在有效期內可以保持活性。不要使用過期試劑,酶聯(lián)物、底物溶液、標準品和零標準品必須在28℃下貯存。微孔反應板必須在28℃下貯存。一旦包裝袋被打開,必須將它小心地嚴封起來。如果包被板的包裝被打開,其免疫活性在6周內穩(wěn)定,但前提是必須將它密封在裝有干燥劑的袋子里。7、試劑準備實驗開始前,將所有試劑和所需數(shù)目的板條都平衡至室溫。標準品:在每支凍干粉的標準品中加入1.0ml蒸餾水重新配置標準品。注意:配制好的標準品在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2個月,要想存放更長的時間則應凍存于-20℃的環(huán)境下。8、樣品此實驗將用到血清,請不要使用易溶血、黃疸血和脂血樣品,注意:含疊氮鈉的樣品不可用于此實驗。8.1樣品的采集血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝固,室溫離心分離血清。未完全凝血前請勿離心,接受了抗凝劑ZL的病人可能需要更長的凝血時間。8.2樣品儲存實驗開始前應用蓋子將樣品密封好,2-8℃下可存放48小時。如果將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下則可將其存放更長時間(只可凍融1次)。解凍的樣本在實驗之前必須要上下倒置幾次。8.3樣品的稀釋:在**次實驗中,樣本濃度高于Z高標準品的樣品應當在實驗前用零緩沖液進行稀釋。在計算濃度時,應當把此稀釋因子考慮進去。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零緩沖液(充分混合)。b)按1:100稀釋:10ul稀釋好的a)+90μL的零緩沖液(充分混合)。9、實驗步驟所有的標準品、樣品和質控品都必須做雙份檢測以保證它們的檢測條件都一樣。每次檢測都必須有一條標準曲線。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。2)將標準品、質控和血清樣本分別25μl加入到相應的微孔中,每次都得使用新的取樣吸頭。3)加100μl的抗LH酶聯(lián)物于各孔中。4)混勻10秒,此步驟中完全混勻很重要。5)室溫溫育(22℃)30分鐘。6)棄去孔內的反應液。用蒸餾水洗板5次(每孔400ul),在吸水紙上把板拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確會明顯影響實驗的靈敏度和精密度。7)依原先加樣順序,每孔加100μl底物液。8)室溫(22℃)溫育10分鐘。9)按加底物液順序,每孔加50μl終止液于各孔中。10)加終止液后10分鐘內在450nm波長讀吸光度。10、結果計算1)計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。2)用吸光度值作為縱坐標(y),濃度值作為橫坐標(x),以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值(mIU/ml)進行標繪,作一條標準曲線。3)用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。4)自動計算方法:說明書上的結果是用四參數(shù)計算得到的,其它的歸納方法可能會給出稍微不同的結果。5)樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中LH濃度高于Z高標準品的必須進行進一步的稀釋,任何稀釋了的樣品在計算時都必須將相應的稀釋因子考慮進去。11、正常值強烈建議每個實驗室都確定自己的正常值范圍和不正常值范圍。用DRG公司的LHELISA試劑盒對明顯健康人群進行一研究,得到如下結果:人群LH(mIU/ml)成年女性卵泡和黃體期≤20黃體生成素峰20-200女性絕經(jīng)后20-100男性3-12本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書
- 兔子促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書[詳細]
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2024-09-29 05:14
標準
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大鼠促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:48T1.5ng/L-40ng/L使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中促黃體激素(LH)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠促黃體激素(LH)水平。用純化的大鼠促黃體激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體激素(LH),再與HRP標記的促黃體激素(LH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體激素(LH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠促黃體激素(LH)濃度。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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猴狂犬病毒酶聯(lián)免疫分析 (ELISA)
- www.biokanu.com猴狂犬病毒酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定猴血清,血漿及相關液體樣本中狂犬病毒的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴狂犬病毒水平。用純化的猴狂犬病毒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入狂犬病毒抗體抗原,再與HRP標記的狂犬病毒抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的狂犬病毒呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴狂犬病毒濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:135IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍濃縮洗滌液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90IU/L,60IU/L,30IU/L,15IU/L,7.5IU/L)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:3IU/L-120IU/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠黃體生成素 ELISA kit文獻
- 大鼠黃體生成素 ELISA kit文獻[詳細]
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2011-08-30 00:00
安裝說明
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兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-13 00:00
專利
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小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
實驗操作
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大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-27 23:47
標準
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