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兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
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本文由 整理匯編
2013-12-13 00:00 187閱讀次數(shù)
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兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
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兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
- 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-13 00:00
安裝說(shuō)明
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA
- 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA[詳細(xì)]
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2024-09-28 15:50
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A) elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A) elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:29
應(yīng)用文章
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人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
操作手冊(cè)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 電話(huà):021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液、唾液生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人MMP-2單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的MMP-2與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人MMP-2,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,MMP-2濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中MMP-2濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):200ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、唾液等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清或血漿測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:20稀釋?zhuān)ㄈ?0ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄吖苤形?00ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線(xiàn)圖上查出相應(yīng)MMP-2含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的MMP-2檢測(cè)濃度小于0.15ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人MMP-2。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試[詳細(xì)]
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2013-12-06 00:00
報(bào)價(jià)單
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELIS
- 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELIS[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:35
報(bào)價(jià)單
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倉(cāng)鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELIS
- 倉(cāng)鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELIS[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:03
專(zhuān)利
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit文獻(xiàn)
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit文獻(xiàn)[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:09
選購(gòu)指南
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-14 22:35
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)酶聯(lián)免疫分析
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T20ng/ml-480ng/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)水平。用純化的人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入MMP-2,再與HRP標(biāo)記的MMP-2抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子,兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子ELISA試劑盒,試劑盒
- 兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子,兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子ELISA試劑盒,試劑盒包裝規(guī)格:48人份/96人份我公司產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1、GX、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;5、種屬齊全:人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、猴(Monkey)、兔(Rabbit)、豬(Pig)、馬(Horse)、魚(yú)、雞、鴨、羊等等;6、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等;7、Zda限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi);選擇余地8、進(jìn)口分裝:可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,且還具有優(yōu)廉的價(jià)格,更經(jīng)濟(jì)實(shí)惠;9、原裝進(jìn)口:優(yōu)質(zhì)的質(zhì)量,高的靈敏度、精密度、重現(xiàn)性、特異性,幫您在實(shí)驗(yàn)室更加節(jié)省時(shí)間;全面的技術(shù)服務(wù)10、從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子,兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子ELISA試劑盒,試劑盒的ELISA技術(shù)的-操作要點(diǎn):優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn).本文將敘述板式注意要點(diǎn),要詳細(xì)的使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果.常見(jiàn)elisa試劑盒:傳染病檢測(cè)elisa試劑盒如幽門(mén)螺桿菌,乙腦,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原體,性病,腺病毒,微小病毒B19,天皰瘡,水痘-帶狀皰疹病毒,生殖支原體,傷寒,沙眼,腮腺炎,人型支原體,麻疹,輪狀病毒,流行性出血熱,淋球菌,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團(tuán)菌,結(jié)核,膠原,尖銳濕疣,甲肝,脊髓灰質(zhì)炎,急性炎尿胰蛋白酶,霍亂,呼吸道合胞病毒,肝吸蟲(chóng),副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細(xì)胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族鏈球菌等等兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子,兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子ELISA試劑盒,試劑盒上??婆delisa試劑盒展示:MY1145兔血小板活化因子(rabbitPAF)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1146兔腫瘤壞死因子-a(rabbitTNF-a)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1147兔白介素-6(rabbitIL-6)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1148兔白介素-8(rabbitIL-8)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1149兔轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子-β1(rabbitTGF-b1)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1150兔細(xì)胞間粘附分子-1(rabbitICAM-1)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1151兔血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(rabbitVEGF)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1152兔血管細(xì)胞粘附分子-1(rabbitVCAM-1)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1153兔白介素-10(rabbitIL-10)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1154兔白介素-6(rabbitIL-6)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1155兔白介素-8(rabbitIL-8)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&DMY1156兔白介素-10(rabbitIL-10)ELISA試劑盒ELISA96T原裝進(jìn)口R&D我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶(hù)提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,所有這些都保證了我們向您提供的是Z專(zhuān)業(yè)Zyou質(zhì)的服務(wù)。兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子,兔基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子ELISA試劑盒,試劑盒祥信信息請(qǐng)登錄www.shkxsw.com查詢(xún)![詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit第三方驗(yàn)證報(bào)告
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit第三方驗(yàn)證報(bào)告[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
課件
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基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒
- 主要用途基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑是一種旨在通過(guò)明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,在分離、蛋白復(fù)性、底物水解、染色等一系列步驟下,觀(guān)察并半定量深藍(lán)色背景中的無(wú)色清晰的基質(zhì)金屬蛋白酶條帶,根據(jù)分子量確定特異基質(zhì)金屬蛋白酶及其活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞萃取樣品(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲(chóng)等)、培養(yǎng)上清懸液、血清和關(guān)節(jié)滑液或腦脊液等基質(zhì)金屬蛋白酶-2,9,以及13等活性及其YZ劑的檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,條帶清晰,重復(fù)性好。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱(chēng),因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi):(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱(chēng)明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成,合成的MMPs以無(wú)活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細(xì)胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)。明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析技術(shù)具有簡(jiǎn)便,無(wú)需抗體,同步觀(guān)察多種酶以及活化與否的優(yōu)勢(shì)[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性免疫捕獲定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性免疫捕獲定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)使用MMP-2特異性抗體捕獲樣品中的MMP-2抗原蛋白,識(shí)別并切離人工合成含硫多肽,釋放出巰基,進(jìn)而使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱(chēng),因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi):(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱(chēng)明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成,合成的MMPs以無(wú)活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細(xì)胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)?;|(zhì)金屬蛋白酶-2,又稱(chēng)明膠酶A(gelatinase-A)或IV型膠原酶(typeIVcollagenase),其前體分子量為XX,激活后分子量為XX和XX。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectin)、彈性纖維蛋白(elastin)、層粘連蛋白-5(laminin-5)、前體腫瘤壞死因子-α(pro-TNF-α)和神經(jīng)(蛋白)聚糖(neurocan)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)。基質(zhì)金屬蛋白酶2的活性檢測(cè)通過(guò)使用MMP-2特異性抗體涂板在孔板里的相應(yīng)孔里,然后捕獲樣品中的MMP-2抗原蛋白,在膠原酶潛酶活化劑醋酸氨基苯汞(4-aminophenylmercuricacetate;APMA)的存在下,識(shí)別并切離人工合成含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,釋放出巰基(sulfhydrylgroup),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來(lái)定量測(cè)定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定兔血清,血漿及相關(guān)液體樣本中兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平。用純化的兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9),再與HRP標(biāo)記的MMP-9抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:90μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液20ml×1瓶20ml×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為60μg/L,40μg/L,20μg/L,10μg/L,5μg/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:4μg/L-80μg/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶原位明膠酶譜法熒光染色試劑盒
- 主要用途細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)原位明膠酶譜法(insituzymography)熒光染色試劑是一種旨在通過(guò)異硫氰酸熒光素標(biāo)記的明膠作為底物,針對(duì)未固定處理的細(xì)胞樣品予以染色處理,基質(zhì)金屬蛋白酶切離底物產(chǎn)生高度綠色熒光,來(lái)定位細(xì)胞中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-2和9的分析。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,敏感度高,熒光清晰,重復(fù)性好。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱(chēng),因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi):(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱(chēng)明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成,合成的MMPs以無(wú)活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細(xì)胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)。原位明膠酶譜法熒光染色(in-situfluorescencezymography)技術(shù)在于提高基質(zhì)金屬蛋白酶檢測(cè)的敏感性,使用異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的明膠作為底物,經(jīng)過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶水解后產(chǎn)生熒光多肽,據(jù)此在熒光顯微鏡下檢測(cè)酶的活性和位置。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:55
標(biāo)準(zhǔn)
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