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人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測
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2018-09-19 10:00 410閱讀次數(shù)
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人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測二、注意事項此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體,用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體,用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。8.每孔加終止液50ul,于450nm波長讀O.D.值。人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測四、結(jié)果判斷儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍:0400pg/ml敏感度:1.0pg/mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)1mlRabbitanti-chickenIgM/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgM(10nm/15nm)2mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.1mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.2mlHSP75/TRAP-1(HeatShockProtein75)熱休克蛋白-75抗體0.2mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.1mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.1mlRabbitanti-dogIgG/Gold金標(biāo)記兔抗狗IgG(10nm/15nm)2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.2mlHSP-105(heatsockprotein-105)熱休克蛋白HSP105抗體0.1mlHSP-105(heatsockprotein-105)熱休克蛋白HSP105抗體0.2mlHSPG1/Syndecan-2(heparinsulphateprotoglycans1)多配體蛋白聚糖2/硫酸肝素糖蛋白1抗體0.2mlHtrA2/Omi(HightemperaturerequirementproteinA2)絲氨酸蛋白酶/線粒體絲氨酸蛋白酶抗體0.2mlTRT(Telomerasecatalyticsubunit)端粒酶抗體0.1mlRabbitFITC/Gold金標(biāo)記兔抗熒光素(10nm/15nm)2mlTRT(Telomerasecatalyticsubunit)端粒酶抗體0.2mlHumanserum兔抗人血清抗體0.2mlHydroxyethykstarch/HES130/0.4羥乙基淀粉抗體0.2mlCOX10COX10抗體0.1mlCOX10COX10抗體0.2mlIAA(Indole-3-AceticAcid)吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體0.1mlIAA(Indole-3-AceticAcid)吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體0.2mlAPI5/AAC11(Apoptosisinhibitor5)凋亡YZ因子5抗體0.2mlGoatanti-humanIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗人IgG0.3mlGoatanti-RatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗大鼠IgG0.3mlBSA/RBITC羅丹明標(biāo)記牛血清白蛋白0.3mlIASPP(inhibitorofapoptosisstimulatingproteinofP53,Longtype)腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體0.1mlIASPP(inhibitorofapoptosisstimulatingproteinofP53,Longtype)腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體0.2mlIba-1(Ionizedcalciumbindingadaptormolecule-1)離子鈣接頭蛋白抗體0.2mlICAD/DFF-45β(InhibitorofCaspase-ActivatedDnase)Caspase激活的脫氧核糖核酸酶YZ劑抗體0.2mlIcos/CD278(InducibleT-cellcostimulator)誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體0.2mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.1mlRabbitanti-GoatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記兔抗羊IgG0.3mlRabbitIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)0.3mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.2mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.2mlIFABP(IntestinalFattyacidbindingprotein)小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體0.2mlIFI16/p16(Interferoninducibleprotein16)γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體0.2mlIFITM1(interferoninducedtransmembraneprotein1)干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體0.2mlhumanIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(抗人)0.1mlhumanIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(抗人)0.2mlGoatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同
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人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測
- 人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測二、注意事項此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體,用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體,用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。8.每孔加終止液50ul,于450nm波長讀O.D.值。人白細(xì)胞介素-2ELISA檢測四、結(jié)果判斷儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍:0400pg/ml敏感度:1.0pg/mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)1mlRabbitanti-chickenIgM/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgM(10nm/15nm)2mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.1mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.2mlHSP75/TRAP-1(HeatShockProtein75)熱休克蛋白-75抗體0.2mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.1mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.1mlRabbitanti-dogIgG/Gold金標(biāo)記兔抗狗IgG(10nm/15nm)2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.2mlHSP-105(heatsockprotein-105)熱休克蛋白HSP105抗體0.1mlHSP-105(heatsockprotein-105)熱休克蛋白HSP105抗體0.2mlHSPG1/Syndecan-2(heparinsulphateprotoglycans1)多配體蛋白聚糖2/硫酸肝素糖蛋白1抗體0.2mlHtrA2/Omi(HightemperaturerequirementproteinA2)絲氨酸蛋白酶/線粒體絲氨酸蛋白酶抗體0.2mlTRT(Telomerasecatalyticsubunit)端粒酶抗體0.1mlRabbitFITC/Gold金標(biāo)記兔抗熒光素(10nm/15nm)2mlTRT(Telomerasecatalyticsubunit)端粒酶抗體0.2mlHumanserum兔抗人血清抗體0.2mlHydroxyethykstarch/HES130/0.4羥乙基淀粉抗體0.2mlCOX10COX10抗體0.1mlCOX10COX10抗體0.2mlIAA(Indole-3-AceticAcid)吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體0.1mlIAA(Indole-3-AceticAcid)吲哚-3-乙酸抗體/植物生長素抗體0.2mlAPI5/AAC11(Apoptosisinhibitor5)凋亡YZ因子5抗體0.2mlGoatanti-humanIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗人IgG0.3mlGoatanti-RatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗大鼠IgG0.3mlBSA/RBITC羅丹明標(biāo)記牛血清白蛋白0.3mlIASPP(inhibitorofapoptosisstimulatingproteinofP53,Longtype)腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體0.1mlIASPP(inhibitorofapoptosisstimulatingproteinofP53,Longtype)腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體0.2mlIba-1(Ionizedcalciumbindingadaptormolecule-1)離子鈣接頭蛋白抗體0.2mlICAD/DFF-45β(InhibitorofCaspase-ActivatedDnase)Caspase激活的脫氧核糖核酸酶YZ劑抗體0.2mlIcos/CD278(InducibleT-cellcostimulator)誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體0.2mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.1mlRabbitanti-GoatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記兔抗羊IgG0.3mlRabbitIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)0.3mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.2mlIDE(Insulindegradationenzyme)胰島素降解酶抗體0.2mlIFABP(IntestinalFattyacidbindingprotein)小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體0.2mlIFI16/p16(Interferoninducibleprotein16)γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體0.2mlIFITM1(interferoninducedtransmembraneprotein1)干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體0.2mlhumanIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(抗人)0.1mlhumanIFN-β(Interferonβ)干擾素-β抗體(抗人)0.2mlGoatIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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綿羊白細(xì)胞介素2ELISA試劑盒使用方法
- 操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。1600pg/mL5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液800pg/mL4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/mL3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/mL2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/mL1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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雞白細(xì)胞介素2ELISA試劑盒操作步驟
- 雞白細(xì)胞介素2ELISA試劑盒操作步驟[詳細(xì)]
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2015-05-14 00:00
期刊論文
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IL-2,豬白細(xì)胞介素2ELISA試劑盒價格
- IL-2,豬白細(xì)胞介素2ELISA試劑盒價格l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬白細(xì)胞介素2(IL-2)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被豬白細(xì)胞介素2(IL-2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬白細(xì)胞介素2(IL-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會影響Z后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。標(biāo)本處理1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。2.實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:320、160、80、40、20、0pg/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。注意事項嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結(jié)果計算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:10pg/mL320pg/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0pg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。2.Z終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結(jié)果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標(biāo)準(zhǔn)曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度酶標(biāo)記物或底物失效通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進(jìn)行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復(fù)實驗[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:02
產(chǎn)品樣冊
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現(xiàn)貨人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子-2ELISA 檢測試劑盒
- 人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子-2ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液試驗原理: TIMP-2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知TIMP-2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將TIMP-2和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TIMP-2的濃度呈比例關(guān)系。 自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子-2ELISA檢測試劑盒 樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子-2ELISA檢測試劑盒 局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TIMP-2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TIMP-2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml人基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子-2ELISA檢測試劑盒 DAC1052-1mgRabbitanti-ratIgM兔抗大鼠IgM(親和層析純化)1mgDAC1055-0.1mlRabbitanti-MinkIgG兔抗水貂IgG(親和層析純化)0.1mlDA075-2mgRabbitFITC兔抗熒光素(FITC)2mgDA080-2mgGoatanti-HumanHSA羊抗人白蛋白(HSA)2mgDAH1002-1mgBovineIgM(親和純化)牛IgM1mgDAH1004-10mgChickenIgM(親和純化)雞IgM10mgDAH1008-1mgGoatIgM(親和純化)羊IgM1mgDAH1012-1mgHorseIgM(親和純化)馬IgM1mgDAH1015-1mghumanIgM(免疫親和純化)人IgM1mgDAH1016-10mghumansIgA(親和純化)人分泌型IgA10mg[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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CCR2,人CC趨化因子受體2ELISA檢測試劑盒范圍
- CCR2,人CC趨化因子受體2ELISA檢測試劑盒范圍l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人CC趨化因子受體2(CCR2)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人CC趨化因子受體2(CCR2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人CC趨化因子受體2(CCR2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會影響Z后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。標(biāo)本處理1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。2.實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0ng/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。注意事項嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結(jié)果計算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:0.25ng/mL8ng/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于0.1ng/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。2.Z終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結(jié)果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標(biāo)準(zhǔn)曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度酶標(biāo)記物或底物失效通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進(jìn)行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復(fù)實驗[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人白細(xì)胞介素10(IL-10)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素10(IL-10)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-30 00:00
報價單
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人白細(xì)胞介素8(IL-8)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素8(IL-8)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-30 00:00
期刊論文
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人白細(xì)胞介素6(IL-6)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素6(IL-6)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-30 00:00
應(yīng)用文章
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人白細(xì)胞介素4(IL-4)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素4(IL-4)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-24 00:00
應(yīng)用文章
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人白細(xì)胞介素3(IL-3)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素3(IL-3)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-24 00:00
其它
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人白細(xì)胞介素2(IL-2)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素2(IL-2)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-24 00:00
課件
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人白細(xì)胞介素1β(IL-1β)檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素1β(IL-1β)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-24 00:00
實驗操作
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現(xiàn)貨人白細(xì)胞介素-27ELISA 檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素-27ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:IL-27試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-27濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-27和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-27的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。人白細(xì)胞介素-27ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人白細(xì)胞介素-27ELISA檢測試劑盒局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-27標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-27含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml人白細(xì)胞介素-27ELISA檢測試劑盒DA2769-0.2mlRbms3protein(RNAbindingmotif,singlestrandedinteractingprotein)Rbms3protein抗體0.2mlDA2770-0.2mlResistin抵抗素抗體0.2mlDAF1025-0.3mlRabbitanti-MKIgM/FITC熒光素標(biāo)記兔抗猴IgM0.3mlDAF1026-0.3mlRabbitanti-pigIgG/FITC熒光素標(biāo)記兔抗豬IgG0.3mlDAF1027-0.3mlRabbitanti-PigIgM/FITC熒光素標(biāo)記兔抗豬IgM0.3mlDA2771-0.2mlRELMa(Resistinlikemoleculealpha)抵抗素樣分子α抗體0.2mlDA2772-0.2mlReprimo/Rprm(reprimo,TP53dependentG2arrestmediatorcandidate)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體0.2mlDA2773-0.2mlRGS2((regulatorofG-proteinsigna領(lǐng)2)G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體0.2mlDA2774-0.1mlRhoA(RhoAprotein)RhoA抗體0.1mlDA2774-0.2mlRhoA(RhoAprotein)RhoA抗體0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人白細(xì)胞介素-6(IL-6)酶聯(lián)免疫檢測
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人白細(xì)胞介素-6(IL-6)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒使用說明書使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理,來檢測人白細(xì)胞介素-6(IL-6),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。用途:用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素-6(IL-6)測定。工作原理本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平。向預(yù)先包被了人白細(xì)胞介素-6(IL-6)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入人白細(xì)胞介素-6(IL-6),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IL-6抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺與樣品中人白細(xì)胞介素-6(IL-6)的濃度呈正相關(guān)。試劑盒組成試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品32ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存鏈霉親和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素標(biāo)記的抗IL-6抗體0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的試劑和器材1.37℃恒溫箱。2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。3.精密移液器及一次性吸頭4.蒸餾水,5.一次性試管6.吸水紙注意事項1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差3.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).4.為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。5.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。6.底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中標(biāo)本要求1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。操作程序1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)16ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.根據(jù)代測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加樣:1)空白孔,空白對照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗IL-6抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)代測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗IL-6抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。8.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。操作程序總結(jié):準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,生物素標(biāo)記的二抗和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘內(nèi)讀OD值計算檢測范圍:0.5ng/L→16ng/L。保存:2-8℃。有效期:6個月(2-8℃)。HumanInterleukin-6(IL-6)ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofIL-6concentrationsinHumanserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayHumanIL-6levelinthesample,addHumanIL-6antibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiIL-6-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofIL-6inthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard:32ng/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiIL-6-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution(20ml×20fold)×1bottle(20ml×30fold)×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader(450nm)3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:16ng/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent8ng/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent4ng/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent2ng/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent1ng/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample:1)blankwells:(blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiIL-6-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame);2)Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3)testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiIL-6-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).8.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange0.5ng/L→16ng/LStorageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths.[詳細(xì)]
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2018-09-21 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人白細(xì)胞介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫檢測
- 人白細(xì)胞介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒使用說明書使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理,來檢測人白細(xì)胞介素1(IL-1),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。用途:用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素1(IL-1)的測定。工作原理本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人白細(xì)胞介素1(IL-1)水平。向預(yù)先包被了人白細(xì)胞介素1(IL-1)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入白細(xì)胞介素1(IL-1),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IL-1抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺與樣品中人白細(xì)胞介素1(IL-1)的濃度呈正相關(guān)。試劑盒組成試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:320ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存鏈霉親和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素標(biāo)記的抗IL-1抗體0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的試劑和器材1.37℃恒溫箱。2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。3.精密移液器及一次性吸頭4.蒸餾水,5.一次性試管6.吸水紙注意事項1.從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差3.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).4.為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。5.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。6.底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中標(biāo)本要求1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。操作程序1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)160ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液80ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品120μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.根據(jù)代測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加樣:1)空白孔,空白對照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗IL-1抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)代測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗IL-1抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。8.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。操作程序總結(jié):準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,生物素標(biāo)記的二抗和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘內(nèi)讀OD值計算檢測范圍:5ng/L→160ng/L。規(guī)格:96T/盒保存:2-8℃。有效期:6個月(2-8℃)。[詳細(xì)]
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2018-09-21 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人白細(xì)胞介素-29ELISA
- 人白細(xì)胞介素-29ELISA檢測本試劑盒僅供研究使用標(biāo)本:血清或者血漿二、注意事項1.此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘若24小時內(nèi)進(jìn)行實驗,標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低極ng確度,造成吸光度偏離的假像。加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。人白細(xì)胞介素-29ELISA檢測三、實驗前準(zhǔn)備1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。2.準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)人白細(xì)胞介素-29ELISA檢測四、操作步驟1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代)2、分別標(biāo)記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。6、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。11、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。12、在每個孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測定OD;顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定。16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算樣本含量人白細(xì)胞介素-29ELISA檢測五、結(jié)果判斷 1.儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值; 2、檢測值范圍:0-400pg/ml 3、敏感度:1.0pg/mlTrx(Thioredoxin)硫氧還蛋白抗體0.1mlAvidin/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記親合素0.1mlGoatanti-humanC3/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗人補(bǔ)體C30.1mlGoatanti-humanFibrinogen/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原0.1mlTrx(Thioredoxin)硫氧還蛋白抗體0.2mlTRP1/gp75(tyrosinaserelatedprotein1)酪氨酸酶相關(guān)蛋白1抗體0.2mlTSARG3(Testisandspermatogenesisrelatedgene3)生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體0.2mlTSARG4(Testisandspermatogenesisrelatedgene4)生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體0.2mlTSARG6/DNAJB13(Testisandspermatogenesisrelatedgene6)生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體0.2mlTSARG7/Agpat6/GPAT4(Testisspermatogensisapoptosis-relatedprotein7)精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體0.2mlRabbitanti-mouseIgG兔抗小鼠IgG2mgBovineIgG(親和純化)牛IgG10mgBovineIgG(親和純化)牛IgG50mgCIDEB(celldeathactivatorCIDE-B)CIDEB抗體0.2mlTsg101(Tumorsusceptibilitygene101protein)Tsg101抗體0.2mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體抗體0.1mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體抗體0.2mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(CT)促甲狀腺素受體抗體(C端)0.1mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(CT)促甲狀腺素受體抗體(C端)0.2mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(NT)促甲狀腺素受體抗體(N端)0.1mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(NT)促甲狀腺素受體抗體(N端)0.2mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體抗體0.1mlTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體抗體0.2mlTSLC1(tumorsuppressorinlungcancer-1)肺癌腫瘤阻抑基因1抗體0.2mlTSLP(Thymicstromallymphopoietinisoform1)淋巴細(xì)胞生成素-1抗體0.1mlBovineIgM(親和純化)牛IgM10mgChickenIgG(HPLC純化)雞IgG10mgChickenIgG(HPLC純化)雞IgG50mgChickenIgM(親和純化)雞IgM1mg[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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現(xiàn)貨人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒說明書
- 現(xiàn)貨人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2015-05-12 00:00
課件
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人白細(xì)胞介素4(IL-4) ELISA 檢測試劑盒
- 人白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:IL-4試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-4濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-4和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-4的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗IL-4抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:800pg/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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促銷人白細(xì)胞介素28B酶聯(lián)免疫檢測范圍
- 人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T6ng/L-160ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素28B(IL-28B)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)水平。用純化的人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素28B(IL-28B),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素28B(IL-28B)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素28B(IL-28B)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)濃度。人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒組成30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8條6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶終止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶標(biāo)試劑標(biāo)準(zhǔn)品(320ng/L)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3酶標(biāo)包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說明書11封板膜12密封袋2張1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。160ng/L80ng/L40ng/L20ng/L10ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品4號標(biāo)準(zhǔn)品3號標(biāo)準(zhǔn)品2號標(biāo)準(zhǔn)品1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人白細(xì)胞介素28B(IL-28B)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
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