本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2015-03-18 00:00 180閱讀次數(shù)

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更多資料

• 人熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-03-18 00:00

  實驗操作

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• 人熱休克蛋白90（HSP90）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白90（HSP90）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP90單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的HSP90與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP90，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP90濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中HSP90濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成16000pg/ml的溶液。設標準管8管，每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入16000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標本激活方法1.將450ul標本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標本HSP90的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活）100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HSP90含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP90檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人HSP90。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  其它

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• 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  安裝說明

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• 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-11 00:00

  應用文章

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• 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-10-04 04:51

  專利

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• 兔熱休克蛋白90試劑盒使用說明

  【產(chǎn)品名稱】：兔熱休克蛋白90試劑盒【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)【產(chǎn)品性狀】：96T/48T，盒裝液體【貯藏】：2-8°C【產(chǎn)品有效期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為Zxin批次，可放心購買?！井a(chǎn)品主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。使用目的：本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中熱休克蛋白90(Hsp-90)含量。兔熱休克蛋白90試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔熱休克蛋白90(Hsp-90)水平。用純化的兔熱休克蛋白90(Hsp-90)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入兔熱休克蛋白90(Hsp-90)，再與HRP標記的熱休克蛋白90(Hsp-90)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的熱休克蛋白90(Hsp-90)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔熱休克蛋白90(Hsp-90)濃度。[詳細]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠熱休克蛋白90（HSP-90）檢測試劑盒說明

  小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒說明書該試劑盒以HRP標記的鏈霉親和素復合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎，可用于檢測血液,細胞、組織內(nèi)的特異性CD40抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的CD40一抗與相應靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進口分裝）已稀釋的即用型CD40一抗（2.5ml）試劑D（原裝進口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復：根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫度達到98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復，直接進入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；16.封片：待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒注意事項：1.修復后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復染細胞核，則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。附1：抗原修法常用抗原修復液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復法酶消化修復切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復法微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復法取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。四、隔水式高壓抗原修復法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。[詳細]

  2018-10-09 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  安裝說明

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• 人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  標準

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• 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  操作手冊

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• 人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  期刊論文

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• 人熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-03-18 00:00

  其它

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• 人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-29 03:11

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白72（HSP72）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白72（HSP72）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP72單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的HSP72與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP72，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP72濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中HSP72濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成16000pg/ml的溶液。設標準管8管，每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入16000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標本激活方法1.將450ul標本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標本HSP72的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活）100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HSP72含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP72檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人HSP72。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白70（HSP70）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白70（HSP70）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP70單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的HSP70與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP70，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP70濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中HSP70濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成80ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標本激活方法1.將450ul標本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標本HSP70的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活）100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HSP70含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP70檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人HSP70。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白60（HSP60）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白60（HSP60）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP60單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的HSP60與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP60，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP60濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中HSP60濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成16000pg/ml的溶液。設標準管8管，每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入16000pg/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標本激活方法1.將450ul標本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標本HSP60的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活）100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HSP60含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP60檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人HSP60。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白27（HSP27）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白27（HSP27）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP27單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的HSP27與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP27，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP27濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中HSP27濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：160ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿作1：10稀釋（取20ul，加標本稀釋液180ul,稀釋10倍）。尿液2倍稀釋（取100ul，加標本稀釋液100ul,稀釋2倍）后檢測。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制：使用前加入2ml蒸餾水混勻，配成80ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HSP27含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP27檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人HSP27。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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• 人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒使用說明書

  人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人熱休克蛋白-70（HSP-70）水平。用純化的人熱休克蛋白-70（HSP-70）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入熱休克蛋白-70（HSP-70），再與HRP標記的熱休克蛋白-70（HSP-70）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的熱休克蛋白-70（HSP-70）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人熱休克蛋白-70（HSP-70）濃度。人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（960pg/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液240pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液120pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液60pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液30pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。人熱休克蛋白-70（HSP-70）ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-22 10:00

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• 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  專利

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