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數(shù)字PCR-外泌體相關(guān)腫瘤分子標(biāo)志物篩查
本文由 艾普拜生物科技（蘇州）有限公司 整理匯編
2019-12-28 15:14 879閱讀次數(shù)
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近幾年外泌體研究的熱度以及文章數(shù)量一直居高不下。人體幾乎所有類型的細(xì)胞都能分泌外泌體，它是一種直徑為 30～150 nm 的小囊泡，外泌體廣泛存在并分布于各種體液中，攜帶多種蛋白質(zhì)、RNA成分（編碼RNA、非編碼RNA）和脂類物質(zhì)等。外泌體作為重要的傳遞信號分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，參與免疫應(yīng)答、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲、促血管新生等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。
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數(shù)字PCR-外泌體相關(guān)腫瘤分子標(biāo)志物篩查 近幾年外泌體研究的熱度以及文章數(shù)量一直居高不下。人體幾乎所有類型的細(xì)胞都能分泌外泌體，它是一種直徑為 30～150 nm 的小囊泡，外泌體廣泛存在并分布于各種體液中，攜帶多種蛋白質(zhì)、RNA成分（編碼RNA、非編碼RNA）和脂類物質(zhì)等。外泌體作為重要的傳遞信號分子，形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，參與免疫應(yīng)答、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲、促血管新生等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。[詳細(xì)]
2019-12-28 15:14
實(shí)驗(yàn)操作
外泌體分離 外泌體是細(xì)胞釋放的微小囊泡，因?yàn)楹猩锓肿尤绲鞍踪|(zhì)和DNA、RNA序列，所以能夠影響周圍細(xì)胞的功能，在細(xì)胞間通訊和疾病機(jī)制中扮演關(guān)鍵角色。 透過了解外泌體分離的方法，我們能夠研究細(xì)胞間訊息傳遞的機(jī)制[詳細(xì)]
2025-05-31 17:43
實(shí)驗(yàn)操作
Eppendorf 外泌體超速離心手冊 外泌體的分離方法有多種，包括超速離心法、過濾法、免疫磁珠法、凝膠過濾法、層析法等。但統(tǒng)計(jì)表明，超速離心法仍是最受歡迎的分離方法之一。
[詳細(xì)]
2024-09-11 18:51
產(chǎn)品樣冊
Eppendorf 外泌體超速離心機(jī) 超速離心法分離外泌體，外泌體離心純化流程，
使用超速離心機(jī)分離外泌體主要有三種方法：差速離心法、墊液差速離心法和等密度梯度離心法。
[詳細(xì)]
2025-08-07 14:19
產(chǎn)品樣冊
外泌體Zxin研究進(jìn)展—成像流式的新發(fā)現(xiàn) 外泌體Zxin研究進(jìn)展—成像流式的新發(fā)現(xiàn)[詳細(xì)]
2016-07-04 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
數(shù)字PCR-專業(yè)守護(hù)食品安全 食品安全日益成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問題, 受到社會(huì)及國家的高度重視。食源性疾病、食品原料造假、轉(zhuǎn)基因食品等逐漸呈現(xiàn)出普遍增長的趨勢。
食源性疾病是指通過攝食而進(jìn)入人體的有毒有害物質(zhì)等致病因子所造成的疾病。比如常見的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲病等。食源性疾患的發(fā)病率居各類疾病總發(fā)病率的前列，是當(dāng)前世界上Z突出的衛(wèi)生問題。能夠從源頭進(jìn)行預(yù)防以及控制是解決這一問題的重中之重。食品原料造假也是危害國人健康的一大殺手，一些造假原料可能包含致癌物或者其他的有害物質(zhì)。
[詳細(xì)]
2024-09-13 20:46
應(yīng)用文章
采用TSKgel G6000PWXL凝膠色譜柱GX分離檢測牛奶外泌體 采用TSKgel G6000PWXL凝膠色譜柱GX分離檢測牛奶外泌體[詳細(xì)]
2024-09-28 00:12
應(yīng)用文章
腫瘤標(biāo)志物(CA724)檢測試劑盒 腫瘤標(biāo)志物(CA724)檢測試劑盒[詳細(xì)]
2015-06-11 00:00
應(yīng)用文章
SPECTROSCOUT – 環(huán)境篩查 SPECTROSCOUT – 環(huán)境篩查[詳細(xì)]
2025-08-26 16:30
產(chǎn)品樣冊
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-06 00:00
應(yīng)用文章
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-05 00:00
報(bào)價(jià)單
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)檢測試劑盒 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)檢測試劑盒[詳細(xì)]
2015-03-10 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒 小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-16 04:28
安裝說明
Eppendorf 應(yīng)用文獻(xiàn)_超離純化人源脂肪干細(xì)胞外泌體 細(xì)胞會(huì)在細(xì)胞外環(huán)境中釋放不同類型的膜源性囊泡。這些膜源性囊泡被稱為胞外囊泡（EV），包括外泌體和微泡體。外泌體是相對較小的胞外囊泡（30-150nm），可在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移核酸、蛋白質(zhì)、酶和脂質(zhì)等生物大分子，是細(xì)胞間通訊的重要模式。此外，它們可以用作各種疾病的生物標(biāo)志物，也可以作為下一代治療劑的天然藥物遞送載體系統(tǒng)。
在本文中，我們描述了一種通過結(jié)合高速和超速離心機(jī)從脂肪源性干細(xì)胞中快速、簡單地分離外泌體的方法。細(xì)胞在BioBLU? 0.3c 一次性生物反應(yīng)罐中培養(yǎng)，并由 DASbox?迷你生物反應(yīng)器系統(tǒng)控制。DASbox 迷你生物反應(yīng)器系統(tǒng)可以培養(yǎng)大量干細(xì)胞，從而獲得高產(chǎn)量的外泌體。隨后，我們使用 CR22N 離心機(jī)對條件培養(yǎng)基進(jìn)行了清除。這是一臺高速離心機(jī)，RCF 高達(dá) 32,300 x g。在本文，我們使用了可同時(shí)容納 10 x 50 mL 和 10 x 15 mL 錐底管的 R15A 固定角轉(zhuǎn)。為了進(jìn)一步濃縮外泌體，我們使用了Z大 RCF 為803,000 x g 的 CP100NX 超速離心機(jī)以及能夠容納6 x 40 mL 離心管的 P32ST 水平轉(zhuǎn)子。此外，相比于不使用蔗糖[詳細(xì)]
2023-09-15 15:06
應(yīng)用文章
間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體：神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)的納米級“細(xì)胞信使” 埃澤思生物（ Applied Cell）總部位于上海，專注于細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域上游產(chǎn)品的研發(fā)與生產(chǎn)，公司產(chǎn)品在細(xì)胞與基因治療、細(xì)胞樣本存儲，藥物發(fā)現(xiàn)，科學(xué)研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。[詳細(xì)]
2025-03-18 14:14
選購指南
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)酶聯(lián)免疫分析試劑盒[詳細(xì)]
2016-01-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
使用OptiPrep密度梯度離心液和CP100NX超離獲得高純外泌體-SP-57-CN 外泌體實(shí)驗(yàn)指南[詳細(xì)]
2024-09-15 03:21
應(yīng)用文章
地毯排放物篩查解決方案 地毯排放物篩查解決方案[詳細(xì)]
2024-09-28 01:18
應(yīng)用文章
人Human腫瘤標(biāo)志物（CA242）ELISA 檢測試劑盒 人（Human）腫瘤標(biāo)志物（CA242）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：CA242試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知CA242濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將CA242和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CA242的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：240IU/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗CA242抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人（Human）腫瘤標(biāo)志物（CA242）ELISA檢測試劑盒操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：240IU/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。120IU/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60IU/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30IU/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15IU/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5IU/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0IU/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。人（Human）腫瘤標(biāo)志物（CA242）ELISA檢測試劑盒操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（IU/ml）A240240樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B120120樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C6060樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D3030樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E1515樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F7.57.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的CA242標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的CA242含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-240IU/ml4、敏感度：0.1IU/ml[詳細(xì)]
2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
CA724,BIM大鼠腫瘤標(biāo)志物ELISA試劑盒說明書 CA724,BIM大鼠腫瘤標(biāo)志物ELISA試劑盒說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠腫瘤標(biāo)志物（CA724）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠腫瘤標(biāo)志物（CA724）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠腫瘤標(biāo)志物（CA724）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。標(biāo)本處理1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過長可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個(gè)1個(gè)無備注：1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：16、8、4、2、1、0U/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍：0.5U/mL16U/mL。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于0.1U/mL。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。[詳細(xì)]
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