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  大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒檢測原理：本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGF-β2）單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGF-β2）濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計算樣本中大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGF-β2）含量。大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒操作步驟：1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對照孔不加。7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。9、顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL，再加入顯色劑B液50μL，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s），37℃避光顯色15min。10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。12、計算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒注意事項：1、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為5-160pg/mL，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果（5-160pg/mL范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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  2013-12-11 00:00

  選購指南

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• 人轉(zhuǎn)化生長因子-2（TGF-2）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人轉(zhuǎn)化生長因子-b2（TGF-b2）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人TGF-b2單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的TGF-b2與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人TGF-b2，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，TGF-b2濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TGF-b2濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：2ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標(biāo)本激活方法1.將410ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加50ul血清或血漿或上清標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)10。（注意：不同的標(biāo)本TGF-β2的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品（已激活）100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)TGF-b2含量，再乘上稀釋倍數(shù)10即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的TGF-b2檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人TGF-b2。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.8％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 牛轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒檢測說明

  牛轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒檢測說明[詳細(xì)]

  2015-07-07 00:00

  安裝說明

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• 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒

  大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2016-08-03 00:00

  實驗操作

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• 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒

  小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:05

  應(yīng)用文章

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• 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書 樣本：血清、血漿、組織勻漿等液體樣本 標(biāo)記物：血清、血漿、組織勻漿等 適應(yīng)物種：詳見說明書 應(yīng)用：可用于科研實驗,不用于臨床治療 檢測方法：一步法、夾心法、酶聯(lián)免疫吸附法等 儲存條件：2-8℃（頻繁使用時），-20℃（長時間不用時）。 有效期：6個月(4℃)；12個月（-20℃）。 檢測方法：酶聯(lián)免疫[詳細(xì)]

  2024-03-11 14:58

  應(yīng)用文章

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• 人轉(zhuǎn)化生長因子elisa試劑盒注意事項

  注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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