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OPG/RANK/RANKL途徑障礙和全身炎癥反應(yīng)在慢性阻塞性肺病
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本文由 上海高創(chuàng)化學(xué)科技有限公司 整理匯編
2024-09-30 11:21 263閱讀次數(shù)
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OPG/RANK/RANKL途徑障礙和全身炎癥反應(yīng)在慢性阻塞性肺病
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OPG/RANK/RANKL途徑障礙和全身炎癥反應(yīng)在慢性阻塞性肺病
- OPG/RANK/RANKL途徑障礙和全身炎癥反應(yīng)在慢性阻塞性肺病[詳細]
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2024-09-30 11:21
操作手冊
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血清白介素-8檢測在慢性阻塞性肺疾病中的臨床意義
- 血清白介素-8檢測在慢性阻塞性肺疾病中的臨床意義[詳細]
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2012-02-08 00:00
選購指南
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牛肺?。‥CP)說明書定性
- www.biokanu.com牛肺?。‥CP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于檢測牛血清,血漿中肺病(ECP)水平。實驗原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中牛肺?。‥CP)。用純化的牛肺?。‥CP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中肺?。‥CP)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的肺?。‥CP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛肺?。‥CP)的存在與否。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存陰性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。結(jié)果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為肺?。‥CP)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為肺病(ECP)陽性注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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熔點儀簡單障礙與維修
- 熔點儀簡單障礙與維修[詳細]
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2014-07-08 00:00
應(yīng)用文章
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禽流感的傳播途徑和流行方式
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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實驗動物給YF法和途徑
- 實驗動物給YF法和途徑[詳細]
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2024-10-03 06:21
專利
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大鼠巨噬細胞炎癥試劑盒
- 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)含量。實驗原理大鼠巨噬細胞炎癥試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)水平。用純化的大鼠巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2),再與HRP標記的巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP-2)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(800pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。400pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液200pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液100pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液50pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液25pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算大鼠巨噬細胞炎癥試劑盒以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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異氟烷為何普遍用于動物全身麻醉?
- 異氟烷是美國小動物臨床中應(yīng)用Z廣泛的吸入麻醉藥。它是恩氟烷(臨床中已經(jīng)停止使用)的同分異構(gòu)體,是一種鹵代醚,不易燃。使用異氟烷,配備精確的、標有刻度的特定揮發(fā)罐。本期我們將對比異氟烷麻醉方式與其他注射麻醉方式在部分場景的應(yīng)用,進一步了解異氟烷在實驗應(yīng)用中的優(yōu)勢體現(xiàn)。[詳細]
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2024-09-15 03:21
應(yīng)用文章
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化肥質(zhì)量提高的途徑
- 化肥質(zhì)量提高的途徑[詳細]
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2014-11-14 00:00
報價單
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磷脂酰肌醇代謝途徑系列產(chǎn)品
- 磷脂酰肌醇代謝途徑系列產(chǎn)品[詳細]
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2010-05-06 00:00
報價單
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化肥質(zhì)量提高途徑探析
- 化肥質(zhì)量提高途徑探析[詳細]
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2024-09-24 17:47
安裝說明
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氫氣對慢性腎臟的研究
- 氫氣對慢性腎臟的研究氫氣對腎臟急性損傷具有保護作用,Z近來自上海中山醫(yī)院腎臟內(nèi)科的研究表明,氫水不僅對急性腎臟損傷有作用,也能有效預(yù)防急性腎臟損傷演變成慢性腎臟損傷。該研究論文發(fā)表在Front.Pharmacol.。慢性腎臟損傷Z終有很大比例會變成腎臟衰竭,就是尿毒癥。雖然血液和腹透析ZL能持尿毒癥患者生命,腎臟移植也成為常規(guī)ZL手段,但越來越多的尿毒癥患者不僅嚴重影響個人和家庭生活質(zhì)量,也對社會帶來巨大的經(jīng)濟負擔(dān)。如何避免慢性腎臟損傷的發(fā)生是有效減少尿毒癥的策略,但是如何避免糖尿病和急性腎臟損傷演變成慢性腎臟損傷并沒有理想的工具,也成為腎臟病領(lǐng)域的非常重要課題。急性腎損傷有非常高死亡率,在ICU的死亡率就高達50%。急性腎損傷幸存患者也有非常容易發(fā)展成為慢性腎損傷,臨床康復(fù)患者10年內(nèi)也有50%發(fā)展成為慢性腎損傷。但是從急性腎損傷發(fā)展成慢性腎損傷的過程非常復(fù)雜,至今仍然不十分清楚。這也導(dǎo)致臨床上缺乏針對性有效預(yù)防手段。氫氣是宇宙中含量Z多的氣體分子,作為一種非極性氣體分子,氫氣能非??焖僭诩毎麅?nèi)外擴散,這非常有利于氫氣在組織細胞內(nèi)快速發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)氫氣對大腦、肝臟、心臟和小腸缺血再灌注損傷都具有ZL作用。研究發(fā)現(xiàn),氫氣對急性腎損傷也具有保護作用,氫水對急性腎缺血再灌注損傷和化療藥物導(dǎo)致的腎臟毒性損傷都有非常好的預(yù)防作用。長期飲用氫水能有效避免腎臟移植導(dǎo)致的慢性腎臟損傷。氫氣ZL疾病的作用基礎(chǔ)是具有選擇性抗氧化和KY癥作用,而炎癥和氧化是許多疾病發(fā)生過程中的共同基礎(chǔ),也使得氫氣成為眾多急性和慢性疾病的有效ZL工具。氫氣也能影響細胞內(nèi)氧化還原反應(yīng)和自由基相關(guān)細胞信號系統(tǒng)。Klotho是一種抗衰老蛋白,也是一型跨膜蛋白,在大腦和腎臟組織內(nèi)大量表達。Z近研究發(fā)現(xiàn)多種慢性腎臟疾病動物疾病模型中Klotho在腎臟內(nèi)表達都受到顯著YZ,該基因表達缺乏動物容易發(fā)展成為腎臟纖維化、血管鈣化、心肌增厚和繼發(fā)性甲狀旁腺亢進。Klotho細胞外段能分離分泌到血液中,作用于多種器官發(fā)揮激素樣效應(yīng)。Klotho參與細胞保護、抗細胞凋亡、抗纖維化和抗衰老等作用。自噬是細胞防御系統(tǒng)的重要途徑,自噬具有抗衰老作用,在缺血或化療藥物誘導(dǎo)腎臟損傷時,腎臟組織細胞也存在自噬的現(xiàn)象。Klotho和自噬存在一定相關(guān)性,但并不了解其內(nèi)在關(guān)系。Zxin這一研究的目的是探索氫氣生理鹽水對預(yù)防急性腎臟缺血演變成腎臟纖維化的作用,并從Klotho和自噬等角度分析這種效應(yīng)的細胞和分子基礎(chǔ)。選自《氫思語》上海么能富氫水機[詳細]
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2018-08-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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反玉米素
- 反玉米素[詳細]
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2014-09-30 00:00
安裝說明
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數(shù)顯推拉力計應(yīng)在什么樣的環(huán)境下使用?
- 數(shù)顯推拉力計是一種用來測試推力和拉力的力學(xué)測量儀器,它被廣泛的應(yīng)用于高低壓電器、電子、五金制鎖、汽車配件、制筆、輕工、建筑、漁具、紡織、化工、機械、IT等行業(yè)和科研機構(gòu)作拉壓負荷、插拔力測試、破壞性試驗等,數(shù)顯推拉力計的規(guī)格有很多,1、2、3噸數(shù)顯推拉力計、10噸數(shù)顯推拉力計以及更大計量的數(shù)顯推拉力計都是有的,各個系列的產(chǎn)品的也都是不一樣的。數(shù)顯推拉力計應(yīng)該在以下幾種情況下進行試驗。具體分為以下八點:1.應(yīng)在10℃35℃的室溫下工作。2.工作環(huán)境應(yīng)干燥,清潔、無振動。3.數(shù)顯推拉力計的上承壓座和支桿的編號應(yīng)與彈性體相同。4.數(shù)顯推拉力計的安裝要保證其對稱軸線和加載儀器、設(shè)備軸線相重合。5.百分表(指示器)號應(yīng)與《檢定證書》標識的一致。6.加、卸載荷(力)應(yīng)緩慢、均勻、平穩(wěn)。7.測量前應(yīng)進行不少于三次Zda試驗力的預(yù)加載荷試驗,并在“置零讀數(shù)時用帶”橡皮鉛筆的橡皮部分輕敲百分表表面的中部(如輕敲前后示值不變,則可不敲),直至卸載后百表指零不發(fā)生變動為止。8.帶有螺紋式下承壓座的數(shù)顯推拉力計,使用時勿必將其擰至底部,拆卸時可用木錘敲擊底部即可擰下。為了人們可以買到:放心、安全、質(zhì)量、品牌的高值產(chǎn)品,從此上海亞野誕生了,上海亞野集優(yōu)點與一身,并且價格比普通產(chǎn)品還有低5:4的價格,做到真正的實惠,實用,耐用,經(jīng)典的代表。沒有蕞好,只有更好永無止境(亞野)質(zhì)量的追求。[詳細]
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2018-11-24 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠骨保護素(OPG)說明書
- www.biokanu.com大鼠骨保護素(OPG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中骨保護素(OPG)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠骨保護素(OPG)水平。用純化的大鼠骨保護素(OPG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入骨保護素(OPG),再與HRP標記的骨保護素(OPG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨保護素(OPG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠骨保護素(OPG)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:1800ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:30ng/L-1500ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
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2016-09-21 00:00
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- Acrylonitrile(AN)iswidelyusedinthemanufacturingoffibers,plasticsandpharmaceuticals.FreeradicalmediatedlipidperoxidationisimplicatedinthetoxicityofAN.Thepresentstudywasdesignedtoexaminetheabilityofcurcumin,anaturalpolyphenoliccompound,toattenuateacuteAN-inducedlipidperoxidationinthebrainandliverofrats.MaleSpragueDawleyratswereorallyadministeredcurcuminatdosesof0(oliveoilcontrol),50or100mg/kgbodyweightdailyfor7consecutivedays.Twohoursafterthelastdoseofcurcumin,ratsreceivedanintraperitonealinjectionof50mgAN/kgbodyweight.AcuteexposuretoANsignificantlyincreasedthegenerationoflipidperoxidationproducts,reflectedbyhighlevelsofmalondialdehyde(MDA)bothinthebrainandliver.Theseincreaseswereaccompaniedbyasignificantdecreaseinreducedglutathione(GSH)contentandasignificantreductionincatalase(CAT)activityinthesametissues.Noconsistentchangesinsuperoxidedismutase(SOD)activitywereobservedbetweenthecontrolandAN-treatmentgroupsinbothtissues.PretreatmentwithcurcuminreversedtheAN-inducedeffects,reducingthelevelsofMDAandenhancingCATactivityandincreasingreducedGSHcontentbothinthebrainandliver.Furthermore,curcumineffectivelypreventedAN-induceddecreaseincytochromecoxidaseactivityinbothliverandbrain.TheseresultsestablishthatcurcuminpretreatmenthasabeneficialroleinmitigatingAN-inducedoxidativestressbothinthebrainsandliversofexposedratsandtheseeffectsaremediatedindependentlyofcytochromeP4502E1inhibition.Accordingly,curcumin首ldbeconsideredasapotentialsafeandeffectiveapproachinattenuatingtheadverseeffectsproducedbyAN-relatedtoxicants.佰易聚生物商城提供優(yōu)質(zhì)的分子生物學(xué)試劑和試劑盒、美國聯(lián)合碳化和美國光譜醫(yī)學(xué)透析袋、培養(yǎng)基和培養(yǎng)耗材、細胞因子和細胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等,大量現(xiàn)貨火爆促銷中,歡迎登錄www.ebioeasy.com或者撥打021-61805605,61805606,61805610洽談選購![詳細]
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2018-09-02 10:00
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