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L-蘋果酸[AF]檢測試劑盒 使用說明
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本文由 上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司 整理匯編
2018-09-30 10:00 198閱讀次數(shù)
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中文:L-蘋果酸[AF]檢測試劑盒英文:L-MalicAcidAssayKit(AnalyserFormat)貨號:K-LMALAF規(guī)格:245.5mLofpreparedreagent(e.g.1116assaysof0.22mL)價(jià)格:2864元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”
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L-蘋果酸[AF]檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-蘋果酸[AF]檢測試劑盒英文:L-MalicAcidAssayKit(AnalyserFormat)貨號:K-LMALAF規(guī)格:245.5mLofpreparedreagent(e.g.1116assaysof0.22mL)價(jià)格:2864元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-蘋果酸[MegaQuant法]檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-蘋果酸[MegaQuant法]檢測試劑盒英文:L-MalicAcidAssayKit(MegaQuantFormat)貨號:K-LMALMQ規(guī)格:60assaysperkit價(jià)格:2608元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-蘋果酸檢測試劑盒(液體即用型) 使用說明
- 中文:L-蘋果酸檢測試劑盒(液體即用型)英文:L-MalicAcidAssayKit(LiquidReadyReagents)貨號:K-LMALQR規(guī)格:1100assays(microplate)/1100(auto-analyser)價(jià)格:2400元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-蘋果酸脫氫酶[大腸桿菌] 使用說明
- 活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:L-蘋果酸脫氫酶[大腸桿菌]英文:L-Malatedehydrogenase(E.coli)貨號:E-LMDHEC規(guī)格:50,000Units價(jià)格:2048元類別:碳水化合物活性酶簡介:碳水化合物活性酶,活躍在復(fù)雜的碳水化合物和糖復(fù)合物,酶的活性::GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-蘋果酸試劑盒說明書
- 訂貨號:10139068035產(chǎn)品名稱:L-蘋果酸(L-MalicAcid)產(chǎn)品英文名稱:L-MalicAcid包裝:Ca.30tests產(chǎn)品介紹:請下載產(chǎn)品說明:L-MalicAcid(用于檢測食品中的L-蘋果酸)[詳細(xì)]
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2018-09-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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D-蘋果酸檢測試劑盒 使用說明
- 中文:D-蘋果酸檢測試劑盒英文:D-MalicAcidAssayKit貨號:K-DMAL規(guī)格:100assays(manual)/1000assays(microplate)/1100assays(auto-analyser)價(jià)格:2992元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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乙酸GK檢測試劑盒[AF法] 使用說明
- 活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:乙酸GK檢測試劑盒[AF法]英文:AceticAcidGKAssayKit(AnalyserFormat)貨號:K-ACETGK規(guī)格:110mLofpreparedreagent(e.g.500assaysof0.22mL)價(jià)格:2304元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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乙酸檢測試劑盒[AF法] 使用說明
- 活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:乙酸檢測試劑盒[AF法]英文:AceticAcidAssayKit(ACSAnalyserFormat)貨號:K-ACETAF規(guī)格:141.6mLofpreparedreagent(e.g.456assaysof0.31mL)價(jià)格:2336元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-乳酸檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-乳酸檢測試劑盒英文:L-LacticAcid(L-Lactate)AssayKit貨號:K-LATE規(guī)格:50assays(manual)/500assays(microplate)/450assays(auto-analyser)價(jià)格:1728元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒
- L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1ng/L-40ng/L使用目的:本試劑盒用于測定煙草懸浮細(xì)胞內(nèi)樣本中L-蘋果酸(L-MA)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中L-蘋果酸(L-MA)水平。用純化的L-蘋果酸(L-MA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入L-蘋果酸(L-MA),再與HRP標(biāo)記的L-蘋果酸(L-MA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中L-蘋果酸(L-MA)濃度。L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)試劑盒說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒檢測范圍:96T3ng/L-80ng/L植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中L-蘋果酸(L-MA)含量。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)水平。用純化的植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入L-蘋果酸(L-MA),再與HRP標(biāo)記的L-蘋果酸(L-MA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物L(fēng)-蘋果酸(L-MA)濃度。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。植物L(fēng)-蘋果酸試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
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木聚糖酶檢測底物片劑 AF 使用說明
- 中文:木聚糖酶檢測底物片劑AF英文:XylazymeAFTablets貨號:T-XAF-1000T規(guī)格:1,000Tablets價(jià)格:10224元類別:酶底物檢測片簡介:酶檢測底物片劑說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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D/L-乳酸檢測試劑盒 使用說明
- 中文:D/L-乳酸檢測試劑盒英文:D-/L-LacticAcid(D-/L-Lactate)(Rapid)AssayKit貨號:K-DLATE規(guī)格:100assays(50ofeach)perkit價(jià)格:4448元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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L-谷氨酸/氨檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-天門冬素[天冬酰胺酸]/L-谷氨酸/氨檢測試劑盒英文:L-Asparagine/L-Glutamine/AmmoniaAssayKit(Rapid)貨號:K-ASNAM規(guī)格:100assays(50ofeach)perkit價(jià)格:2944元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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L-鼠李糖檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-鼠李糖檢測試劑盒英文:L-RhamnoseAssayKit貨號:K-RHAMNOSE規(guī)格:50/100assays(manual)/550assays(microplate)/550assays(auto-analyser)價(jià)格:2480元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-谷氨酸/氨檢測試劑盒[快速] 使用說明
- 中文:L-谷氨酸/氨檢測試劑盒[快速]英文:L-Glutamine/AmmoniaAssayKit(Rapid)貨號:K-GLNAM規(guī)格:100assays(50ofeach)perkit價(jià)格:2768元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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L-巖藻糖檢測試劑盒 使用說明
- 中文:L-巖藻糖檢測試劑盒英文:L-FucoseAssayKit貨號:K-FUCOSE規(guī)格:100assays(manual)/1000assays(microplate)/1020assays(auto-analyser)價(jià)格:2640元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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維生素C[L-抗壞血酸]檢測試劑盒 使用說明
- 活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:維生素C[L-抗壞血酸]檢測試劑盒英文:AscorbicAcidAssayKit(L-Ascorbate)貨號:K-ASCO規(guī)格:40assays(manual)/400assays(microplate)/400assays(auto-analyser)價(jià)格:1904元類別:檢測分析試劑盒簡介:Megazyme檢測試劑盒,適用范圍廣的行業(yè),包括食品,飼料,發(fā)酵,釀造,葡萄酒和乳制品,果汁飲料。說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- L-蘋果酸(L-MA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-09-14 01:01
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纖維素內(nèi)切酶檢測底物片劑 AF 使用說明
- 中文:纖維素內(nèi)切酶檢測底物片劑AF英文:CellazymeAFTablets貨號:T-CAF-1000T規(guī)格:1,000Tablets價(jià)格:8896元類別:酶底物檢測片簡介:酶檢測底物片劑說明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
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