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• 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

  豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-12 00:00

  課件

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• 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa試劑盒使用說明書

  豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2024-10-08 05:30

  期刊論文

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• 人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

  人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  操作手冊

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• 纖蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）酶聯(lián)免疫分析Elisa試劑盒

  人纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)水平。用純化的人纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)，再與HRP標(biāo)記的纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：27μg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為18μg/ml，12μg/ml，6μg/ml，3μg/ml，1.5μg/ml）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:30

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

  大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:42

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

  豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 04:29

  操作手冊

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• 人纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FDP)檢測試劑盒

  人纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FDP)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-06 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

  小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  期刊論文

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• 大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

  大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:34

  產(chǎn)品樣冊

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• 兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

  兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 04:17

  課件

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• 人纖維蛋白原降解產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒的說明書

  人纖維蛋白原降解產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒的說明書[詳細(xì)]

  2015-08-27 00:00

  安裝說明

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• 豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

  豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-12 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 鯉魚卵黃蛋白原ELISA檢測試劑盒

  鯉魚卵黃蛋白原ELISA檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-10-05 20:57

  應(yīng)用文章

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• 氣質(zhì)聯(lián)用儀測定六氟化硫降解產(chǎn)物

  氣質(zhì)聯(lián)用儀測定六氟化硫降解產(chǎn)物[詳細(xì)]

  2024-09-27 23:54

  課件

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒

  豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-05-27 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗豬VEGF單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的VEGF與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗豬VEGF，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，VEGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中VEGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)VEGF含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的VEGF檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的豬VEGF。不與豬其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒

  豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:26

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 魚卵黃蛋白原（VTG）ELISA試劑盒說明書

  FishVTGELISAKitForthequantitativeinvitrodeterminationofFishVitellogeninconcentrationsinbodyfluid-celiacfluid-tissuehomogenates-otherbiologicalfluidsFORLABORATORYRESEARCHUSEONLY.NOTFORUSEINDIAGNOSTICPROCEDURES.Thispackageinsertmustbereadinitsentiretybeforeusingthisproduct.ELISAENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYINTENDEDUSEANDTESTPRINCIPLEThisVTGELISAkitisintendedLaboratoryforResearchuseonlyandisnotforuseindiagnosticortherapeuticprocedures.TheStopSolutionchangesthecolorfrombluetoyellowandtheintensityofthecolorismeasuredat450nmusingaspectrophotometer.InordertomeasuretheconcentrationofVTGinthesample,thisVTGELISAKitincludesasetofcalibrationstandards.ThecalibrationstandardsareassayedatthesametimeasthesamplesandallowtheoperatortoproduceastandardcurveofOpticalDensityversusVTGconcentration.TheconcentrationofVTGinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.SAMPLECOLLECTIONANDSTORAGESSerum-Useaserumseparatortubeandallowsamplestoclotfortwohoursatroomtemperatureorovernightat4℃beforecentrifugationfor20minutesatapproximately1000×g.Assayfreshlypreparedserumimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Plasma-CollectplasmausingEDTAorheparinasananticoagulant.Centrifugesamplesfor15minutesat1000×gat2-8℃within30minutesofcollection.Removeplasmaandassayimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Tissuehomogenates-Forgeneralinformation,hemolysisbloodmayaffecttheresult,soyou首ldrinsethetissueswithice-coldPBS(0.01M,pH=7.4)toremoveexcessbloodthoroughly.Tissuepieces首ldbeweighedandthenmincedtosmallpieceswhichwillbehomogenizedinPBS(thevolumedependsontheweightofthetissue.9mLPBSwouldbeappropriateto1gramtissuepieces.SomeproteaseinhibitorisrecommendedtoaddintothePBS.)withaglasshomogenizeronice.Tofurtherbreakthecells,youcansonicatethesuspensionwithanultrasoniccelldisrupterorsubjectittofreeze-thawcycles.Thehomogenatesarethencentrifugatedfor5minutesat5000×gtogetthesupernate.Cellculturesupernatesandotherbiologicalfluids-Centrifugesamplesfor20minutesat1000×g.Removeparticulatesandassayimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Note:Thesamples首lebecentrifugateddequatelyandnohemolysisorgranulewasallowed.MATERIALSREQUIREDBUTNOTSUPPLIED1.37℃incubator2.Standardmicroplatereadercapableofmeasuringabsorbanceat450nm3.Precisionpipettes,disposablepipettetipsandAbsorbentpaper4.DistilledordeionizedwaterREAGENTSPROVIDEDAllreagentsprovidedarestoredat2-8°C.Refertotheexpirationdateonthelabel.Name96determinations48determinationsMICROTITERPLATE8*12strips8*6stripsSTANDARD（6vial）0.3ml/vial0.3ml/vialSAMPLEDILUENT6.0ml3.0mlENZYMECONJUGATE10.0ml5.0mlWASHSOLUTION25ml15mlSUBSTRATEA6.0ml3.0mlSUBSTRATEB6.0ml3.0mlSTOPSOLUTION6.0ml3.0mlClosureplatemembrane22Usermanual11Sealedbags11Note:1.Standardconcentrationwasfollowedby:480,240,120,60,30,15ng/mL.2.Ifsamplesgeneratevalueshigherthanthehigheststandard,pleasedilutethesampleswithSampleDiluentandrepeattheassay.PRECAUTIONSDonotsubstitutereagentsfromonekitlottoanother.Standard,conjugateandmicrotiterplatesarematchedforoptimalperformance.Useonlythereagentssuppliedbymanufacturer.Allowkitreagentsandmaterialstoreachroomtemperature(20-25°C)beforeuse.Donotusewaterbathstothawsamplesorreagents.Donotusekitcomponentsbeyondtheirexpirationdate.Useonlydeionizedordistilledwatertodilutereagents.Donotremovemicrotiterplatefromthestoragebaguntilneeded.Unusedstrips首ldbestoredat2-8°Cintheirpouchwiththedesiccantprovided.Usefreshdisposablepipettetipsforeachtransfertoavoidcontamination.Donotmixacidandsodiumhypochloritesolutions.Serumandplasma首ldbehandledaspotentiallyhazardousandcapableoftransmittingdisease.Disposableglovesmustbewornduringtheassayprocedure,sincenoknowntestmethodcanoffercompleteassurancethatproductsderivedfromRatbloodwillnottransmitinfectiousagents.Therefore,allbloodderivatives首ldbeconsideredpotentiallyinfectiousandgoodlaboratorypractices首ldbefollowed.Allsamples首ldbedisposedofinamannerthatwillinactivateviruses.LiquidWaste:Addsodiumhypochloritetoafinalconcentrationof1.0%.Thewaste首ldbeallowedtostandforaminimumof30minutestoinactivatethevirusesbeforedisposal.SubstrateSolutioniseasilycontaminated.Ifbluishpriortouse,donotuse.SubstrateBcontain20%acetone,keepthisreagentawayfromsourcesofheatorflame.Removeallkitreagentsfromrefrigeratorandallowthemtoreachroomtemperature(20-25°C).REAGENTPREPARATIONANDSTORAGEWashSolution(1X)-Dilute1volumeofWashsolution(20X)with19volumesofdeionizedordistilledwater.WashSolutionisstablefor1monthat2-8°C.ASSAYPROCEDURE1.Prepareallreagentsbeforestartingassayprocedure.ItisrecommendedthatallStandardsandSamplesbeaddedinduplicatetotheMicrotiterplate.2.Add50μlofStandardorSampletotheappropriatewells.Blankwelldoesn’taddanyting.3.Add100μlofEnzymeconjugatetostandardwellsandsamplewellsexcepttheblankwell,coverwithanadhesivestripandincubatefor60minutesat37°C.4.WashtheMicrotiterPlate4times.ManualWashing-Removeincubationmixturebyaspiratingcontentsoftheplateintoasinkorproperwastecontainer.Usingasquirtbottle,filleachwellcompletelywithWashSolution(1X),thenaspiratecontentsoftheplateintoasinkorproperwastecontainer.Repeatthisprocedureforatotaloffourtimes.Afterfinalwash,invertplate,andblotdrybyhittingplateontoabsorbentpaperorpapertowelsuntilnomoistureappears.Note:Holdthesidesoftheplateframefirmlywhenwashingtheplatetoassurethatallstripsremainsecurelyinframe.AutomatedWashing-Aspirateallwells,thenwashplatesfourtimesusingWashBuffer(1X).Alwaysadjustyourwashertoaspirateasmuchliquidaspossibleandsetfillvolumeat350μL/well/wash.Afterfinalwash,invertplate,andblotdrybyhittingplateontoabsorbentpaperorpapertowelsuntilnomoistureappears.5.AddSubstrateA50μlandSubstrateB50μltoeachwell.Gentlymixandincubatefor15minutesat37°C.Protectfromlight.6.Add50μlStopSolutiontoeachwell.Thecolorinthewells首ldchangefrombluetoyellow.Ifthecolorinthewellsisgreenorthecolorchangedoesnotappearuniform,gentlytaptheplatetoensurethoroughmixing.7.ReadtheOpticalDensity(O.D.)at450nmusingamicrotiterplatereaderwithin15minutes.CALCULATIONOFRESULTSThisstandardcurveisusedtodeterminetheamountinanunknownsample.ThestandardcurveisgeneratedbyplottingtheaverageO.D.(450nm)obtainedforeachofthesixstandardconcentrationsonthevertical(X)axisversusthecorrespondingconcentrationonthehorizontal(Y)axis.First,calculatethemeanO.D.valueforeachstandardandsample.AllO.D.Valuesaresubtractedbythemeanvalueofthebalnkwellbeforeresultinterpretation.Constructthestandardcurveusinggraphpaperorstatisticalsoftware.Todeterminetheamountineachsample,firstlocatetheO.D.valueontheY-axisandextendahorizontallinetothestandardcurve.Atthepointofintersection,drawaverticallinetotheX-axisandreadthecorrespondingconcentration.Anyvariationinoperator,pipettingandwashingtechnique,incubationtimeortemperature,andkitagecancausevariationinresult.Eachuser首ldobtaintheirownstandardcurve.Intra-assayCV(%)islessthan10%andInter-assayCV(%)islessthan15%.Assayrange:15ng/mL480ng/mL.7.Sensitivity:TheminimumdetectabledoseofFishVTGistypicallylessthan1.0ng/mL.8.Cross-reactivity:ThisassayrecognizesrecombinantandnaturalFishVTG.Nosignificantcross-reactivityorinterferencewasobserved.9.Storage:2-8℃(Usefrequently);sixmonths(-20℃)。10.StandardcurveFORRESEARCHUSEONLY;NOTFORTHERAPEUTICORDIAGNOSTICAPPLICATIONS!PLEASEREADTHROUGHENTIREPROCEDUREBEFOREBEGINNING!魚卵黃蛋白原（VTG）試劑盒（ELISA）使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測體液、腔液、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中魚卵黃蛋白原（VTG）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被魚卵黃蛋白原（VTG）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚卵黃蛋白原（VTG）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會影響Z后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個(gè)1個(gè)無備注：1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：480、240、120、60、30、15ng/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能檢測范圍：15ng/mL480ng/mL。靈敏度：Zdi檢測濃度小于1.0ng/mL。特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。[詳細(xì)]

  2018-12-11 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（sVCAM-1）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（sVCAM-1）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗豬sVCAM-1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的sVCAM-1與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗豬sVCAM-1，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，sVCAM-1濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中sVCAM-1濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清測定前用標(biāo)本稀釋液至少作1：20稀釋（取10ul，加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sVCAM-1含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的sVCAM-1檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的豬sVCAM-1。不與豬其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）ELISA試劑盒說明書

  豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用檢測范圍：20ng/L-800ng/L使用目的：本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)水平。用純化的豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)，再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。800ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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