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RP-HPLC-MS 方法分析幾種蛋白的 胰蛋白酶酶解多肽產物的條件優(yōu)化
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本文由 賽默飛色譜與質譜中國 整理匯編
2024-09-28 21:04 766閱讀次數(shù)
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RP-HPLC-MS 方法分析幾種蛋白的 胰蛋白酶酶解多肽產物的條件優(yōu)化
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RP-HPLC-MS 方法分析幾種蛋白的 胰蛋白酶酶解多肽產物的條件優(yōu)化
- RP-HPLC-MS 方法分析幾種蛋白的 胰蛋白酶酶解多肽產物的條件優(yōu)化[詳細]
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2024-09-28 21:04
應用文章
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基于深度酶解花生蛋白制備增咸酶解液的工藝優(yōu)化-日本INSENT電子舌
- 摘要:目的 基于深度酶解花生蛋白制備增咸酶解液,并探究其最佳制備工藝。方法 采用復合酶分步酶解法制備花生蛋白增咸酶解液,以單因素實驗和響應面法確定最佳酶解條件,并通過對酶解產物的相對分子量分布、氨基酸含量、游離氨基酸含量和電子舌結果進行分析,解析酶解產物的增咸特性。結果 花生蛋白增咸酶解液的最佳工藝參數(shù)為:花生蛋白混合料液(料液比1:10, g:mL), 95°C下熱處理20 min,調節(jié)pH 6.5,木瓜蛋白酶加酶量:3020 U/g底物, 55°C酶解2.8 h,風味蛋白酶加酶量:610 U/g底物, 55°C繼續(xù)酶解3.8 h。在此條件下花生蛋白水解度高達16.65%。經感官評價和電子舌分析結果表明:當0.5%(m/m)的花生蛋白酶解物加入到0.5%(m/m) NaCl溶液時,咸味增強率可達76.21%。結論 經深度酶解作用后,酶解產物分子量均在3000 Da以下,同時鮮味氨基酸占比較高,賦予酶解產物增咸的呈味特性,此研究為花生蛋白在減鹽食品的應用提供了理論依據(jù)。
關鍵詞:減鹽;花生蛋白;深度酶解;工藝優(yōu)化;電子舌;[詳細]
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2024-09-27 07:30
期刊論文
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ICP-OES分析條件的優(yōu)化
- ICP-OES分析條件的優(yōu)化[詳細]
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2012-05-24 00:00
操作手冊
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GFC方法分析蛋白和多肽
- GFC方法分析蛋白和多肽[詳細]
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2024-09-29 07:56
安裝說明
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速溶龍眼粉酶解提取物的噴霧干燥工藝優(yōu)化
- 龍眼富含有多種生物活性物質等可溶性固形物的特點,采用有效的提取分離和干燥技術是制備龍眼粉的關鍵。酶法提取植物活性物質,具有提取速度快、條件溫和和效率環(huán)保等優(yōu)點。噴霧干燥可快速蒸發(fā)暴露在高溫環(huán)境中的小霧滴水分,由于其良好的質量控制和連續(xù)化生產等特性,被廣泛用來生產粉狀產品。
[詳細]
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2022-05-18 10:26
其它
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白貝肉酶解工藝的優(yōu)化及其產物呈味特性研究---日本INSENT電子舌
- 摘要:通過酶解法利用白貝制備酶解產物,并對其進行滋味評價,為白貝調味品的開發(fā)奠定了前期基礎。以水解度為指標,篩選蛋白酶后,應用響應面優(yōu)化得到Z佳酶解工藝,制備白貝酶解產物,測定其游離氨基酸、核苷酸、有機酸和有機堿含量,并通過滋味活性值評價這些呈味物質對提取物滋味的貢獻。采用復合蛋白酶進行工藝優(yōu)化,Z佳酶解工藝為加酶量4 586 U/g、料液比1∶4.4、酶解溫度58℃、酶解5 h,此條件下水解度達42.46%。所制備的酶解液中鮮味和甜味氨基酸含量占游離氨基酸總量的44.70%,鮮味核苷酸GMP和IMP的含量分別為24.21 mg/100 g和66.39 mg/100 g,有機酸琥珀酸含量為360.33 mg/100 g,有機堿甜菜堿含量為394.00 mg/100 g。電子舌分析表明,酶解產物中鮮味、甜味、苦味特征明顯。白貝酶解產物中滋味成分豐富,鮮味含量較高,可用于調味品的開發(fā)。
關鍵詞:白貝;酶解;響應面優(yōu)化;呈味特性;[詳細]
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2023-12-11 12:23
期刊論文
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蛋白,酶,多肽等的超細微粒制備
- 蛋白,酶,多肽等的超細微粒制備[詳細]
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2024-09-29 03:28
期刊論文
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雞骨素及其酶解液的美拉德反應產物揮發(fā)性風味成分比較分析
- 摘要:利用固相微萃取/氣相色譜-質譜(SPME/GC-MS)聯(lián)用與電子鼻(E-Nose)嗅探技術對雞骨素美拉德反應產物(MRPs1)及雞骨素酶解液美拉德反應產物(MRPs2)中的揮發(fā)性風味成分進行比較分析[詳細]
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2018-08-16 10:00
產品樣冊
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魚骨泥酶解工藝優(yōu)化及酶解液呈味特性研究---德國AIRSENSE電子鼻
- 摘要:以鱈魚骨制備的超微細魚骨泥為對象,研究魚骨泥酶解的Z佳工藝條件,以水解度為指標,在單因素的基礎上,利用響應面優(yōu)化酶解工藝,并根據(jù)電子鼻、電子舌、氣相離子遷移色譜(GC-IMS)、游離氨基酸檢測結果,分析酶解對魚骨泥呈味特性的影響。結果表明,魚骨泥Z佳酶解工藝為:選用風味蛋白酶,酶解時間5 h,加酶量1.0%,料液比1:1,在此條件下水解度可達43.8%。電子鼻分析結果顯示,酶解液中芳香物質增多,烷烴、氨類等具有不良風味的化合物含量降低;電子舌分析結果顯示,酶解液酸味提升,苦味減少,整體呈味特性良好、滋味豐富。魚骨泥和酶解液中共檢測出29種風味物質,其中魚骨泥中主要揮發(fā)性風味物質是醛類和酮類,酶解液中主要呈味物質是酮類和酯類,揮發(fā)性風味物質的種類及含量差異顯著。酶解增加了呈味氨基酸的含量,賦予了酶解液良好的風味。 關鍵詞:魚骨泥;酶解;風味;呈味化合物;[詳細]
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2022-08-22 11:05
期刊論文
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應用原子吸收光譜分析技術之分析條件的優(yōu)化
- 應用原子吸收光譜分析技術之分析條件的優(yōu)化[詳細]
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2008-04-12 00:00
標準
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填料吸收塔實驗操作條件的優(yōu)化
- 填料吸收塔實驗操作條件的優(yōu)化[詳細]
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2016-03-16 00:00
期刊論文
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電子鼻初始pH值對雞骨素酶解液Maillard反應產物的影響
- 摘要:以雞骨素酶解液為原料,研究了不同初始pH值條件下,添加木糖、半胱氨酸及硫胺素制備的Maillard反應產物(MRPs,maillardreactionproducts)在熱反應過程中的特性變化。研究表明,pH值差異引起各體系氨基酸和總糖初始含量及變化趨勢差異,pH值5、7和9體系反應終點多肽含量分別為100.11、100.01、104.55mgmL-1;與其它2個體系相比,pH值9體系分子量為2.3、1.39kDa的峰消失,出現(xiàn)峰面積較大的2.95kDa峰和較小的1.04kDa峰,褐變程度為pH值7體系的1.7倍;隨著pH值升高,不同體系的MRPs風味主成分存在一定差異,pH值7體系的有機硫化物電子鼻響應值約為其它兩個體系的1.6倍,pH值9體系的氮氧化物響應值Zda。不同初始pH值影響添加物的含量及狀態(tài),導致各體系Maillard反應歷程不同,引起MRPs化學組分的差異。本研究為雞骨素酶解液MRPs風味及功能組分生成機制的研究及雞骨高值化衍生產品的開發(fā)提供一定理論參考。[詳細]
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2018-08-16 10:00
產品樣冊
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植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)試劑盒分析
- 植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)試劑盒分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:0.8U/L-20U/L使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關樣本中苯丙氨酸解氨酶(PAL)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)水平。用純化的植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入苯丙氨酸解氨酶(PAL),再與HRP標記的植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的苯丙氨酸解氨酶(PAL)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(40IU/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)試劑盒分析操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20U/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液10U/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液5U/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5U/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1.25U/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)試劑盒分析一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-04 10:00
產品樣冊
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低嘌呤高酶活納豆芽孢桿菌液態(tài)發(fā)酵條件的優(yōu)化
- 低嘌呤高酶活納豆芽孢桿菌液態(tài)發(fā)酵條件的優(yōu)化[詳細]
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2015-05-11 00:00
專利
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丹參醇提取工藝的優(yōu)化條件
- 丹參醇提取工藝的優(yōu)化條件[詳細]
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2009-01-05 00:00
其它
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毛細管柱操縱中三大條件的優(yōu)化
- 毛細管柱操縱中三大條件的優(yōu)化[詳細]
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2015-02-05 00:00
安裝說明
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微膠囊技術的幾種方法
- 噴霧干燥方法制備微膠囊的原理是將微細芯材穩(wěn)定的乳化分散于包囊材料的溶液中形成乳化分散液,然后通過霧化裝置將此乳化分散液在干燥的熱氣流中霧化成微細液滴,溶解壁材的溶劑受熱迅速蒸發(fā),從而使包埋在微細化芯材周圍的壁材形成一種具有篩分作用的網狀膜結構,分子較大的芯材被保留在形成的囊膜內,而壁材中的水或其他溶劑等小分子物質因熱蒸發(fā)而透過網孔順利移出,使膜進一步干燥固化,得到干燥的粉狀微膠囊。[詳細]
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2020-04-20 10:42
其它
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微膠囊技術的幾種方法
- 噴霧干燥方法制備微膠囊的原理是將微細芯材穩(wěn)定的乳化分散于包囊材料的溶液中形成乳化分散液,然后通過霧化裝置將此乳化分散液在干燥的熱氣流中霧化成微細液滴,溶解壁材的溶劑受熱迅速蒸發(fā),[詳細]
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2021-09-23 14:46
其它
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植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫分析
- 植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫分析使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關樣本中苯丙氨酸解氨酶(PAL)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)水平。用純化的植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入苯丙氨酸解氨酶(PAL),再與HRP標記的植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的苯丙氨酸解氨酶(PAL)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)濃度。植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫分析標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫分析操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。[詳細]
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2018-09-19 10:00
產品樣冊
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酶解小麥面筋蛋白_卡拉膠復合物凝膠特性研究
- 酶解小麥面筋蛋白_卡拉膠復合物凝膠特性研究[詳細]
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2024-09-28 22:00
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