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Optimization of LC-MS peptide mapping
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Optimization of LC-MS peptide mapping
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Optimization of LC-MS peptide mapping Optimization of LC-MS peptide mapping[詳細]
2005-08-25 00:00
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2015-10-15 00:00
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大豆多肽（peptide）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 大豆多肽（peptide）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T2ng/L-90ng/L使用目的：本試劑盒用于測定發(fā)酵豆粕樣本中大豆多肽（peptide）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大豆多肽（peptide）水平。用純化的大豆多肽（peptide）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入大豆多肽（peptide），再與HRP標記的大豆多肽（peptide）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大豆多肽（peptide）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大豆多肽（peptide）濃度。大豆多肽（peptide）酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。大豆多肽（peptide）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。大豆多肽（peptide）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
半乳糖凝集素9蛋白galectin 9 peptide說明書 DESCRIPTIONSourceE.coliderivedAla2Thr323Accession#BAA31542NterminalSequenceAnalysisAla2Structure/FormMonomerPredictedMolecularMass35.8kDaSPECIFICATIONSSDSPAGE34kDa,reducingconditionsActivityMeasuredbyitsabilitytoinduceapoptosisofJurkathumanacuteTcellleukemiacells.Lu,L.H.etal.（2007）J.Biochem.141:157.Theforthiseffectistypically15ug/mL.Measuredbyitsabilitytoagglutinatehumanredbloodcells.Hadari,Y.R.etal.（2000）J.CellSci.113:2385.Theforthiseffectistypically2.5-12.5μg/mL.EndotoxinLevel<1.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.Purity>95%,bySDSPAGEunderreducingconditionsandvisualizedbysilverstain.FormulationLyophilizedfroma0.2μmfilteredsolutioninMOPS,NaCl,EDTA,DTTandTrehalose.SeeCertificateofAnalysisfordetails.PREPARATIONANDSTORAGEReconstitutionReconstituteat100μg/mLinwater.ShippingTheproductisshippedatambienttemperature.Uponreceipt,storeitimmediatelyatthetemperaturerecommendedbelow.Stability&StorageUseamanualdefrostfreezerandavoidrepeatedfreezethawcycles.l12monthsfromdateofreceipt,20to70°Cassupplied.l1month,2to8°Cundersterileconditionsafterreconstitution.l3months,20to70°Cundersterileconditionsafterreconstitution.BACKGROUNDGalectinscompriseafamilyofmultifunctionalcarbohydratebindingproteinswithspecificityforN-acetyllactosaminecontainingglycoproteins.Atleast14mammalianGalectinssharestructuralsimilaritiesintheircarbohydraterecognitiondomains（CRD）,formingthreegroups:prototype（oneCRD）,tandemrepeat（twoCRDs）,andchimeric（oneCRD,uniqueN-terminus）（1,2）.FulllengthGalectin9isawidelyexpressed39kDatandemrepeatGalectinthatcontainstwoCRDsconnectedbyalinkerregion（3）.Progressivedeletionwithinthelinkerregiongeneratesa36kDaisoform,alsoknownasEcalectinorUAT,aswellasa35kDaisoform（4）.ThisrecombinantproteincorrespondstotheEcalectinisoformofhumanGalectin9andshares70%and73%aasequenceidentitywiththecorrespondingregionsofmouseandratGalectin9,respectively.Galectin9exhibitsawiderangeofactivities.Allthreeisoformsfunctionaseosinophilchemoattractants（5,6）.Thisactivityisdestroyedbythrombinmediatedcleavagewithinthelinkerregionofthelongisoform,althoughtheEcalectinisoformisresistanttothrombin（7）.Galectin9bindstocarbohydratemoietiesofIgE,therebypreventingimmunecomplexformation,mastcelldegranulation,andasthmaticandcutaneousanaphylaxisreactions（8）.Independentofitslectinproperties,Galectin9inducesthematurationofdendriticcellswhichpromoteTh1polarization（9）.Galectin9inducescellularapoptosisinpartbydirectbindingtoTIM3（10,11）.ItsinteractionwithTIM3inhibitsTh1cellandCD8+cytotoxicTcellresponsesandalsopromotesregulatoryTcelldifferentiationandactivity（11,12）.Galectin9suppressestumorcellmetastasisbyinterferingwiththeassociationsbetweenhyaluronicacidandCD44andbetweenVCAM1andIntegrinα4β1（13）.TheEcalectinisoform（UATuratetransporter）canalsobeexpressedasanintegralmembraneproteinandmediatethecellulareffluxofurate（14）.References:1.Yang,RY.etal.（2008）ExpertRev.Mol.Med.10:e17.2.Elola,M.T.etal.（2007）Cell.Mol.LifeSci.64:1679.3.Tureci,O.etal.（1997）J.Biol.Chem.272:6416.4.Chabot,S.etal.（2002）Glycobiology12:111.5.Matsumoto,R.etal.（2002）J.Immunol.168:1961.6.Sato,M.etal.（2002）Glycobiology12:191.7.Nishi,N.etal.（2006）Glycobiology16:15C.8.Niki,T.etal.（2009）J.Biol.Chem.284:32344.9.Dai,S.Y.etal.（2005）J.Immunol.175:2974.10.Seki,M.etal.（2007）ArthritisRheum.56:3968.11.Zhu,C.etal.（2005）Nat.Immunol.6:1245.12.Sehrawat,S.etal.（2010）PloSPathogens6:e1000882.13.Nobumoto,A.etal.（2008）Glycobiology18:735.14.LealPinto,E.etal.（2002）Am.J.Physiol.RenalPhysiol.283:F150.[詳細]
2018-10-01 10:01
產(chǎn)品樣冊
Nanoscale chemical mapping of Li-ion battery cathode material by FIB-SEM and TOF-SIMS Nanoscale mapping is achieved by multi-modal correlative microscopy combining focused ion beam and scanning electron microscopy (FIB-SEM) with Time-of-Flight Secondary Ion Mass Spectrometry (TOF-SIMS).Mapping Li, Mn and Co nanoscale distributions reveals the micro-structural consequences of the electrochemical reaction, and allows identifying Li “trapping” sites within the structure
[詳細]
2021-05-21 13:38
期刊論文
Formulation Optimization for the Nanoparticles-in-Microsphere Hybrid Oral Delivery Systems Using Fac FormulationOptimizationfortheNanoparticles-in-MicrosphereHybridOralDeliverySystemsUsingFactorialDesign[詳細]
2018-08-31 10:11
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