本文由 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 整理匯編

2018-09-29 10:02 4584閱讀次數(shù)

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• PicoPLEX WGA Kit說(shuō)明書

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• PicoPLEX DNA-seq Kit說(shuō)明書

  rubicongenomics,rubicongenomics代理，rubicongenomics上海代理，rubicongenomics北京代理，rubicongenomicsZG代理，rubicongenomics**代理，rubicongenomics總代理上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司rubicongenomics專業(yè)代理，具體產(chǎn)品信息歡迎電詢：4006551678rubicongenomics是一家私人控股公司，總部位于美國(guó)密歇根。rubicongenomics核心競(jìng)爭(zhēng)力產(chǎn)品包括酶，核酸化學(xué)，樣品的加工和制造。rubicongenomics致力于創(chuàng)新，知識(shí)產(chǎn)權(quán)的發(fā)展，和持續(xù)的產(chǎn)品開發(fā)。PicoPLEXDNA-seqKit單細(xì)胞DNA文庫(kù)制備技術(shù)，適用于Illumina所有NGS測(cè)序平臺(tái)PicoPLEX，是被IVF臨床科學(xué)家用于產(chǎn)前遺傳篩查、診斷檢測(cè)染色體異常與拷貝數(shù)變異的技術(shù)，現(xiàn)在可以在您的Illumina的NGS平臺(tái)上使用！PicoPLEXDNA-seq簡(jiǎn)化DNA文庫(kù)制備流程；整個(gè)過程是在一根管或孔內(nèi)完成─減少錯(cuò)誤和污染，加快反應(yīng)過程，降低成本。PicoPLEXDNA-seq試劑盒（48反應(yīng)）包括從48個(gè)單細(xì)胞或DNA（6pg到60pg）制備NGS的文庫(kù)所需要的所有材料，包括雙條碼。條形碼寡核苷酸儲(chǔ)存在一個(gè)一次性使用的微孔板中被提供。減少歧義─可高度重復(fù)性地檢測(cè)基因組拷貝數(shù)變異（CNV）和非整倍性簡(jiǎn)化工作流程─從一個(gè)單細(xì)胞到制備DNA測(cè)序文庫(kù)僅需要三個(gè)步驟降低成本─單一試劑盒包含制備一個(gè)測(cè)序文庫(kù)所需要的所有材料減少污染和錯(cuò)誤─在一個(gè)單一的管或孔中完成文庫(kù)制備所有流程，不需要轉(zhuǎn)移DNA樣品減少反應(yīng)時(shí)間─制備IlluminaNGS文庫(kù)不到3個(gè)小時(shí)『值得注意的是，使用PICOPLEXDNA-SEQ對(duì)胚胎細(xì)胞建庫(kù)，測(cè)序結(jié)果清楚地顯示2個(gè)小的非平衡片段，這個(gè)與使用高精度的FISH分析孕婦血液樣品的結(jié)果一致。該血液樣品一開始使用其它技術(shù)分析結(jié)果為正常。這是從胚胎測(cè)序的結(jié)果揭示隱匿易位但被芯片遺漏的一個(gè)顯著的例子?！簧虾Ｆ鸢l(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機(jī)：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號(hào)1102室[詳細(xì)]

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• 麥胚凝集素（WGA）酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說(shuō)明書

  麥胚凝集素(WGA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T1.2μg/L-45μg/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中麥胚凝集素(WGA)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中麥胚凝集素(WGA)水平。用純化的麥胚凝集素(WGA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入麥胚凝集素(WGA)，再與HRP標(biāo)記的麥胚凝集素(WGA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的麥胚凝集素(WGA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中麥胚凝集素(WGA)濃度。[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:01

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• ThruPLEX-FD Prep Kit說(shuō)明書

  rubicongenomics,rubicongenomics代理，rubicongenomics上海代理，rubicongenomics北京代理，rubicongenomicsZG代理，rubicongenomics**代理，rubicongenomics總代理上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司rubicongenomics專業(yè)代理，具體產(chǎn)品信息歡迎電詢：4006551678rubicongenomics是一家私人控股公司，總部位于美國(guó)密歇根。rubicongenomics核心競(jìng)爭(zhēng)力產(chǎn)品包括酶，核酸化學(xué)，樣品的加工和制造。rubicongenomics致力于創(chuàng)新，知識(shí)產(chǎn)權(quán)的發(fā)展，和持續(xù)的產(chǎn)品開發(fā)。ThruPLEX-FDPrepKit單管測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)，適用于各種IlluminaNGS平臺(tái)擁有ZL的ThruPLEX-FDPrepKit技術(shù)突破傳統(tǒng)的文庫(kù)制備方法，使得Illumina的下一代測(cè)序方法自DNA或cDNA序列片段化后的流程得以簡(jiǎn)化。整個(gè)反應(yīng)過程在一個(gè)管中完成，反應(yīng)時(shí)間少于3小時(shí)。效率，靈敏度和反應(yīng)率都大大提高。無(wú)論何種NGS應(yīng)用，包括DNA測(cè)序，RNA測(cè)序和ChIP-seq，ThruPLEX-FDPrepKit都能提供一致且可靠的結(jié)果。*受US7803550和EP1924704ZL保護(hù)整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程在一個(gè)管子中完成所有的3個(gè)步驟，不需要轉(zhuǎn)移到別的管子，也無(wú)需清洗步驟所需起始DNA樣本量非常低，GX的化學(xué)反應(yīng)確保DNA成功連接所需樣本量范圍廣，根據(jù)不同的應(yīng)用，低至10pg或高達(dá)100ng的DNA或cDNA的片段都可以高質(zhì)量的結(jié)果，專有的化學(xué)反應(yīng)可以降低引物二聚體形成的概率，并且產(chǎn)生很低的背景噪音上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機(jī)：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號(hào)1102室[詳細(xì)]

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• 人黑色素ELISA Kit說(shuō)明書

  人黑色素ELISA Kit說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2014-08-21 00:00

  安裝說(shuō)明

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• 人前纖維蛋白1ELISA Kit說(shuō)明書

  人前纖維蛋白1ELISA Kit說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2014-08-05 00:00

  其它

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• Kainos FGF-23 ELISA Kit說(shuō)明書

  KainosLaboratories是日本的生物公司，其生產(chǎn)的FGF-23ELISAKit和ADAMTS13-cleaved廣泛應(yīng)用于各大醫(yī)藥企業(yè)，上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司正式為您帶來(lái)KainosLaboratories高品質(zhì)的產(chǎn)品，歡迎來(lái)電查詢http://www.kainos.co.jpKainosLaboratories代理KainosLaboratoriesZG代理，KainosLaboratories上海代理，KainosLaboratories總代，KainosLaboratories北京代理ThiskitcapturesADAMTS13-cleavedproductsusingasandwichmethodwiththeanti-GSTmousemonoclonalantibodyandtheperoxidase-conjugatedmousemonoclonalanti-N10antibody.First,theanti-GSTmousemonoclonalantibodyimmobilizedontothemicroplatereactswiththeVWF73substrate（GST-VWF73-His）.Thesampleisthenappliedtothemicroplate,onwhichADAMTS13cleavestheVWF73substrate.Byapplyingthemousemonoclonalanti-N10antibodyconjugatedwithhorseradishperoxidase（HRPconjugatedantibody）,thecleavageproductissandwichedbetweenthetwoantibodies.BecausetheamountofthecleavageproductsdependsontheADAMTS13activity,theamountoftheenzyme-labeledantibodiesthatbindtothecleavageproductsalsoreflectthelevelofADAMTS13activity.Therefore,theplasmaADAMTS13activitycanbedeterminedbycolorimetricallymeasuringtheamountofdetachedoxidized（colored）TMBZusingureahydrogenperoxide（H2O2）and3,3’,5,5’-Tetramethyl-benzidine（TMBZ）asthesubstrates.上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營(yíng)超過700多個(gè)品牌，基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。4：富有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格優(yōu)勢(shì)，絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì)。5：多年積累良好的信譽(yù)，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)?？蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國(guó)藥、fisher等知名藥企。6：我們還是Santa,AdvancedBiotechnologiesInc,AthensResearch&Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FDNeurotechnologies,Inc.FormuMaxScientific,Inc,Genebridege,GlycotopeBiotechnologyGmbH;iduron,InnovativeResearchofAmerica,Ludger,neuroprobe,omicronbio,Polysciences,prospecbi,QA-BIO,quickzyme,RESEARCHDIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLinkBioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國(guó)外公司授權(quán)代理。7：我們還是invitrogen,qiagen,Tempshield,Inc.am,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批發(fā)，歡迎合作。[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:02

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• Protein A ELISA Kit 9333-1說(shuō)明書

  P/N9333-1RepligenA蛋白ELISA試劑盒ProteinAELISAKitP/N9333-1上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司ProteinAELISAKitP/N9333-1專業(yè)代理，具體產(chǎn)品信息歡迎電詢：4006551678。ProteinAELISAKitHighlightsAlargepercentageoftheworld'scommercialsupplyofantibodyreliesonaRepligenmanufacturedproteinAligandforpurificationandRepligen’sELISAkitforproductrelease.2kitsforthemostaccuratedetectionandquantitationofleachedproteinARecombinantProteinAKitMabSelectSuReKitSuperiorinterandintrakitconsistencyforunparalleledreproducibilityPolyclonalchickencaptureantibodyforgreaterProteinAspecificityBiotinylatedrabbitanti-ProteinAdetectionantibodyforgreatersensitivityMatchedstandardsforthegreatestquantitationaccuracyThreesampleprepprotocolsforsuperiormethodoptimization上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機(jī)：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號(hào)1102室[詳細(xì)]

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• 組胺ELISA Kit使用說(shuō)明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說(shuō)明書（德國(guó)IBL：RE59221）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測(cè)。深化此實(shí)驗(yàn)可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說(shuō)明組胺（β-咪唑乙胺）是人體中Z重要的介質(zhì)，它主要存在于過敏反應(yīng)的起始階段（速發(fā)型過敏）。組胺是由組胺酸經(jīng)脫氨基作用產(chǎn)生的。組胺幾乎存在于機(jī)體的所有組織中，主要儲(chǔ)存于柱狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無(wú)活性的復(fù)合體性存在，只有當(dāng)需要的時(shí)候才會(huì)釋放。像其它的介質(zhì)一樣，組胺不僅能調(diào)節(jié)過敏反應(yīng)的各種臨床癥狀，也可以調(diào)節(jié)終止過敏反應(yīng)的一系列效應(yīng)。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來(lái)完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測(cè)組胺的方法有：定量檢測(cè)各種速發(fā)型過敏反應(yīng)中嗜堿性白細(xì)胞釋放組胺的量，也可以檢測(cè)過敏藥物ZL后各種體液（血漿，尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清）中組胺的量。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存，避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí)，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品，血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性5小時(shí)3個(gè)月2年尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果，請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時(shí)3天6個(gè)月細(xì)胞培養(yǎng)上清使用細(xì)胞培養(yǎng)上清作樣品，一般沒特殊注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測(cè)必須用肝素化全血，具體信息請(qǐng)見相應(yīng)的說(shuō)明書（RE95000）6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍(lán)色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，200倍濃縮，內(nèi)含辣根過氧酶標(biāo)記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標(biāo)準(zhǔn)品A-G，凍干，用于血漿樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺、人血漿。具體濃度請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質(zhì)控1+2，凍干，內(nèi)含：組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質(zhì)控1+2，即用，內(nèi)含：組胺、人尿液（酸化的）。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.25mlACYLREAG酰化試劑，即用，內(nèi)含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，5倍濃縮，內(nèi)含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含：Tris緩沖液、苯酚（pH＜7.5時(shí)顏色會(huì)發(fā)生改變＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;20;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲(chǔ)器的8道移液器7）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8）酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說(shuō)明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進(jìn)行檢測(cè)，下述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性20ml檢測(cè)緩沖液100ml蒸餾水1：52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標(biāo)準(zhǔn)品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無(wú)泡沫-20℃1個(gè)月血漿質(zhì)控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無(wú)泡沫-20℃1個(gè)月10ul（*）酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:200臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30分鐘（*）在稀釋前,確保塞子內(nèi)無(wú)殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)在酰化前用相應(yīng)的稀釋液稀釋,尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液（Cat.no.KEHP711）,試劑盒內(nèi)未提供。8.3樣品的?；迷嚬軠?zhǔn)備樣品注意不能血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線確定?；蛞夯蚣?xì)胞培養(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標(biāo)準(zhǔn)曲線確定?；獫{樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標(biāo)準(zhǔn)品、血漿質(zhì)控品和病人樣品分別100ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入20ul?；噭尤膈；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。8.3.2尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清1將U/C標(biāo)準(zhǔn)品、尿液質(zhì)控品和病人尿液或細(xì)胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液，旋渦混合。如果指示劑變成無(wú)色，說(shuō)明溶液的pH值很低，樣品中含有很多酸性物質(zhì)。在這種情況下，再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?；噭?，加入酰化試劑后立即旋渦混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。注意：?；幚砗玫臉悠房稍?-8℃下存放一晚，-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將酰化處理過的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時(shí)。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)物，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時(shí)，每孔的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細(xì)胞培養(yǎng)上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內(nèi)450nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：600-650nm）10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：血漿尿液24小時(shí)尿液自然產(chǎn)生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 腎上腺素ELISA Kit使用說(shuō)明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說(shuō)明書（德國(guó)IBL：RE59251）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測(cè)。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，用戶可使用各種動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG酰化試劑即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前說(shuō)明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提取（提取板）1）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無(wú)需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無(wú)需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實(shí)驗(yàn)步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測(cè)腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測(cè)腎上腺素。如果使用自動(dòng)置換型衣液器加樣，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測(cè)用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實(shí)驗(yàn)開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測(cè)孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時(shí)配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清（綠色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實(shí)驗(yàn)步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜20＜110＜125＜0.68本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說(shuō)明書（德國(guó)IBL：RE59261）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測(cè)。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，用戶可使用各種動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前說(shuō)明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹謩?dòng)操作版）1）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無(wú)需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無(wú)需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實(shí)驗(yàn)步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測(cè)腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測(cè)腎上腺素。如果使用自動(dòng)置換型衣液器加樣，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測(cè)用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實(shí)驗(yàn)開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測(cè)孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時(shí)配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清（藍(lán)色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實(shí)驗(yàn)步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜90＜535＜600＜3.55本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 多巴胺ELISA Kit使用說(shuō)明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用說(shuō)明書（德國(guó)IBL：RE59161）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測(cè)，可手動(dòng)操作，也可自動(dòng)操作。進(jìn)一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說(shuō)明兒茶酚氨類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚氨激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，所以用戶可使用各種各樣的動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果用此試劑盒測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物，則兒茶酚氨的化學(xué)結(jié)構(gòu)與動(dòng)物的相同。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時(shí)間之內(nèi)，加入的溶液抗在體可直接與抗原分子上的一個(gè)表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗（可與抗原分子上的不同表位結(jié)合）在包被孔中溫育。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意試劑盒所提供的試劑足夠做96孔單孔檢測(cè)或48孔雙份檢測(cè)。注意此包被板也可用于檢測(cè)腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺。數(shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,內(nèi)含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。2×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗多巴胺抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。4×13mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。2×3mlACYLREAG?；噭┘从茫瑑?nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，內(nèi)含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器9）樣品稀釋用試管。8、手動(dòng)操作8.1實(shí)驗(yàn)前說(shuō)明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)需稀釋。8.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無(wú)需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無(wú)需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液225ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃5h9、實(shí)驗(yàn)步驟（手動(dòng)操作）9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶化注意如果使用自動(dòng)置換型移液器，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加回到提取板相應(yīng)的微孔內(nèi)。將提取板置于一斜坡位置比較適當(dāng)?？蒲杏媒M織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清可按如下建議處理：細(xì)胞培養(yǎng)上清必須根據(jù)其培養(yǎng)基及其相應(yīng)濃度進(jìn)行處理：根據(jù)尿液樣品的操作說(shuō)明（至少提取20ul上清液），未稀釋樣品的靈敏度大概為1.0ng/ml。如果基質(zhì)內(nèi)添加了血清（FCS），血漿（至少提取500ul上清）操作的靈敏度可以是5pg/ml。無(wú)高氯酸的組織勻漿可用做勻漿樣品，具體信息請(qǐng)咨詢IBL漢堡公司。9.3檢測(cè)尿液和血漿中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。將100ul提取好的血漿樣品加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育120min5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育60min8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：620-650nm）10、自動(dòng)操作步驟10.1實(shí)驗(yàn)前說(shuō)明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)需稀釋。10.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前10.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各30μL和750μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入750μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭⒓椿旌暇鶆?。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無(wú)需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入450μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無(wú)需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。10.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液450ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶聯(lián)物15ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃5h11、實(shí)驗(yàn)步驟（自動(dòng)操作）11.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。11.2實(shí)驗(yàn)步驟在使用自動(dòng)方法做實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們建議按1：10的比例預(yù)先稀釋提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品（如果是手動(dòng)操作則用Release緩沖液進(jìn)行稀釋）。如果稀釋了，第二個(gè)步驟可簡(jiǎn)化為：將已提取好的血漿樣品、已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品（按1：10的比例預(yù)先稀釋）、質(zhì)控品和尿液樣品各100μL加入到微孔中。在進(jìn)行預(yù)稀釋時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮到自動(dòng)操作的死容積。1）在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2）在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min5）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。6）每孔加入100μL酶聯(lián)物7）蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min8）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。9）加底物液和終止液時(shí)，其時(shí)間間隔應(yīng)相同10）每孔加入200μL底物液11）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動(dòng)操作時(shí)的溫度超過25℃時(shí)，則應(yīng)相應(yīng)的將溫育時(shí)間縮短至30min。12）每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。13）加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：620-650nm）12、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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