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- wyp6203 2016-12-22 00:00:00
- 畢赤酵母誘導(dǎo)后SDS電泳蛋白在沉淀中是為什么 1)你應(yīng)該是沒(méi)有明白什么是包涵體,簡(jiǎn)單的說(shuō)就是翻譯的蛋白沒(méi)有正確折疊而聚集在一起形成的,主要的是疏水作用.實(shí)際上就是很多個(gè)蛋白分子,這些蛋白并不是交聯(lián)在一起的,用高濃度的尿素和鹽酸胍可以使他們變性,解聚. 2)用沉淀跑電泳可以確定目的蛋白是否在包涵體? 包涵體是不溶于水的,比較總蛋白.沉淀,及上清中的誘導(dǎo)帶就可以知道上清中有沒(méi)有你想要的可溶蛋白了 3)電泳檢測(cè)的話,可以用SDS-PAGE檢測(cè),在上樣之前,需要用上樣緩沖液處理樣品,處理后,包涵體也就解聚了,每個(gè)蛋白分子與SDS結(jié)合,形成了可溶物. 4)質(zhì)量大的話怎么可以用電泳來(lái)確定呢? 為什么不可以呢?DNA電泳,蛋白電泳不都可以嗎? 5)電泳的原理就是根據(jù)蛋白質(zhì)量大小來(lái)將不同的蛋白分開(kāi)的呀? 不通種電泳的原理個(gè)不相同.SDS-PAGE可以簡(jiǎn)單的認(rèn)為是根據(jù)蛋白質(zhì)量來(lái)區(qū)分蛋白的. 你想不明白應(yīng)該是不知道什么是包涵體,或者什么是電泳,電泳的原理,你自己還是在網(wǎng)上好好看看這些內(nèi)容,應(yīng)該不難理解. 上樣緩沖液中有巰基乙醇,SDS,樣品還要加熱,破壞了包涵體之間蛋白的相互作用力,Z好還是看看是怎么行成的包涵體吧
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