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VTM病毒保存液能做核酸檢測(cè)嗎?

湖北新德晟材料科技有限公司 2021-08-10 16:24:23 513  瀏覽
  • 我們很多都知道VTM病毒保存液是病毒檢測(cè)中用到的,那么它是用于病毒的核酸檢測(cè)還是用于無(wú)癥狀患者或接種了疫苗的人的抗體檢測(cè)呢,不用VTM能不能進(jìn)行檢測(cè)呢?可能有些人就不太清楚了。

    病毒保存液主要是病毒采樣管中添加的成分,并不是每個(gè)樣品采集處都能進(jìn)行PCR 檢測(cè),因此需要對(duì)采集到的病毒拭子樣品進(jìn)行運(yùn)輸。樣本送到檢測(cè)機(jī)構(gòu)后,通過(guò)PCR擴(kuò)增等方法來(lái)進(jìn)行分析,屬于病毒的核酸檢測(cè)。

    進(jìn)行病毒樣本采集用的采樣管由采樣管、采樣拭子(鼻、咽拭子)以及管內(nèi)添加的病毒保存液組成。而保存液又分為滅活型和非滅活型兩種:

    滅活型保存液:成分有高濃度的裂解鹽,不僅能夠快速的破壞病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜,還能夠變性蛋白質(zhì),使病毒的蛋白質(zhì)變性沉淀,從而讓核酸擺脫蛋白質(zhì)纏繞,釋放出核酸;同時(shí)還含有緩沖液EDTA和Tris與核酸酶抑zhi劑。

    非滅活保存液:成分有Hanks溶液,主要由多種無(wú)機(jī)鹽、緩沖劑、葡萄糖、0.4%酚紅在滅菌條件下制成,與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的pH值、滲透壓及無(wú)菌條件一致,使病毒宿主細(xì)胞體外存活時(shí)間延長(zhǎng);另外還含有蛋白保護(hù)劑保護(hù)病毒穩(wěn)定性,以及緩沖劑與冷凍保護(hù)劑。

    病毒保存液及采樣管的使用:

    采樣前,在標(biāo)簽上注明樣品信息;

    根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,用采樣拭子在相?yīng)的部位采樣;

    具體采樣方法有以下幾種:

    a)鼻腔采集:將拭子頭輕輕插入鼻腔內(nèi)采樣,用另一拭子以同樣方式采集另一鼻腔樣本將拭子頭浸入采樣液中,折斷尾部;

    b)咽部采集:用拭子采集咽喉部樣本,同樣將拭子頭侵入采樣液中,折斷尾部。

     


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VTM病毒保存液能做核酸檢測(cè)嗎?

我們很多都知道VTM病毒保存液是病毒檢測(cè)中用到的,那么它是用于病毒的核酸檢測(cè)還是用于無(wú)癥狀患者或接種了疫苗的人的抗體檢測(cè)呢,不用VTM能不能進(jìn)行檢測(cè)呢?可能有些人就不太清楚了。

病毒保存液主要是病毒采樣管中添加的成分,并不是每個(gè)樣品采集處都能進(jìn)行PCR 檢測(cè),因此需要對(duì)采集到的病毒拭子樣品進(jìn)行運(yùn)輸。樣本送到檢測(cè)機(jī)構(gòu)后,通過(guò)PCR擴(kuò)增等方法來(lái)進(jìn)行分析,屬于病毒的核酸檢測(cè)。

進(jìn)行病毒樣本采集用的采樣管由采樣管、采樣拭子(鼻、咽拭子)以及管內(nèi)添加的病毒保存液組成。而保存液又分為滅活型和非滅活型兩種:

滅活型保存液:成分有高濃度的裂解鹽,不僅能夠快速的破壞病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜,還能夠變性蛋白質(zhì),使病毒的蛋白質(zhì)變性沉淀,從而讓核酸擺脫蛋白質(zhì)纏繞,釋放出核酸;同時(shí)還含有緩沖液EDTA和Tris與核酸酶抑zhi劑。

非滅活保存液:成分有Hanks溶液,主要由多種無(wú)機(jī)鹽、緩沖劑、葡萄糖、0.4%酚紅在滅菌條件下制成,與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的pH值、滲透壓及無(wú)菌條件一致,使病毒宿主細(xì)胞體外存活時(shí)間延長(zhǎng);另外還含有蛋白保護(hù)劑保護(hù)病毒穩(wěn)定性,以及緩沖劑與冷凍保護(hù)劑。

病毒保存液及采樣管的使用:

采樣前,在標(biāo)簽上注明樣品信息;

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,用采樣拭子在相?yīng)的部位采樣;

具體采樣方法有以下幾種:

a)鼻腔采集:將拭子頭輕輕插入鼻腔內(nèi)采樣,用另一拭子以同樣方式采集另一鼻腔樣本將拭子頭浸入采樣液中,折斷尾部;

b)咽部采集:用拭子采集咽喉部樣本,同樣將拭子頭侵入采樣液中,折斷尾部。

 


2021-08-10 16:24:23 513 0
在核酸檢測(cè)中VTM病毒保存液的作用及種類

我們很多都知道VTM病毒保存液是病毒檢測(cè)中用到的,那么它是用于病毒的核酸檢測(cè)還是用于無(wú)癥狀患者或接種了疫苗的人的抗體檢測(cè)呢,不用VTM能不能進(jìn)行檢測(cè)呢?可能有些人就不太清楚了。

病毒保存液主要是病毒采樣管中添加的成分,并不是每個(gè)樣品采集處都能進(jìn)行PCR 檢測(cè),因此需要對(duì)采集到的病毒拭子樣品進(jìn)行運(yùn)輸。樣本送到檢測(cè)機(jī)構(gòu)后,通過(guò)PCR擴(kuò)增等方法來(lái)進(jìn)行分析,屬于病毒的核酸檢測(cè)。

進(jìn)行病毒樣本采集用的采樣管由采樣管、采樣拭子(鼻、咽拭子)以及管內(nèi)添加的病毒保存液組成。而保存液又分為滅活型和非滅活型兩種:

滅活型保存液:成分有高濃度的裂解鹽,不僅能夠快速的破壞病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜,還能夠變性蛋白質(zhì),使病毒的蛋白質(zhì)變性沉淀,從而讓核酸擺脫蛋白質(zhì)纏繞,釋放出核酸;同時(shí)還含有緩沖液EDTA和Tris與核酸酶抑zhi劑。

非滅活保存液:成分有Hanks溶液,主要由多種無(wú)機(jī)鹽、緩沖劑、葡萄糖、0.4%酚紅在滅菌條件下制成,與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的pH值、滲透壓及無(wú)菌條件一致,使病毒宿主細(xì)胞體外存活時(shí)間延長(zhǎng);另外還含有蛋白保護(hù)劑保護(hù)病毒穩(wěn)定性,以及緩沖劑與冷凍保護(hù)劑。

病毒保存液及采樣管的使用:

采樣前,在標(biāo)簽上注明樣品信息;

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?用采樣拭子在相應(yīng)的部位采樣;

具體采樣方法有以下幾種:

a)鼻腔采集:將拭子頭輕輕插入鼻腔內(nèi)采樣,用另一拭子以同樣方式采集另一鼻腔樣本將拭子頭浸入采樣液中,折斷尾部;

b)咽部采集:用拭子采集咽喉部樣本,同樣將拭子頭侵入采樣液中,折斷尾部。


2021-09-08 15:21:48 623 0
病毒滅活樣本保存液在核酸檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)

什么是核酸檢測(cè)?

核酸檢測(cè)是指通過(guò)特殊的技術(shù)手段檢測(cè)臨床樣本中是否存在特定的病原體核酸,從而診斷患者的感染原因。新型肺炎核酸檢測(cè)主要是看它的核酸,通過(guò)實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng),即RT-PCR方法來(lái)檢測(cè)。檢測(cè)的樣本鼻拭子或咽拭子從鼻腔或者口腔用棉簽沾取樣本再出來(lái)做一個(gè)檢測(cè),這是目前簡(jiǎn)單、快捷的一個(gè)方法。

核酸檢測(cè)中病毒滅活樣本保存液的優(yōu)勢(shì)是什么呢?

1.降低RNA降解造成假陰性

核酸樣本保存條件苛刻,RNA極易裂解,4℃僅可存放24h,運(yùn)輸過(guò)程過(guò)長(zhǎng)RNA就會(huì)出現(xiàn)提前被降解的現(xiàn)象,從而導(dǎo)致檢測(cè)假陰性增多。病毒樣本保存液是采樣管內(nèi)一種病毒樣本保護(hù)性運(yùn)輸介質(zhì),防止病毒采樣后不能及時(shí)檢測(cè)在送檢過(guò)程中病毒降解,避免因病毒在檢測(cè)途中提前降解造成假陰性。

2.減小核酸提取過(guò)程的感染

所有人都知道新冠肺炎的傳染性高,檢測(cè)過(guò)程中稍有不慎會(huì)被感染。核酸檢測(cè)需要有專門的儀器和標(biāo)準(zhǔn)的分子檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,需要PCR認(rèn)證人員操作,步驟繁瑣,全程需要5~8個(gè)小時(shí),過(guò)程中感染風(fēng)險(xiǎn)大。

病毒滅活樣本保存液采用裂解鹽可以快速對(duì)呼吸道病原體進(jìn)行滅活、保存,使樣品失去感染性。由于是滅活病毒而不用培養(yǎng)病毒,首先需要的就是對(duì)病毒進(jìn)行裂解失活、破壞其膜蛋白釋放核酸,大大降低了核酸提取過(guò)程中被感染的危險(xiǎn)度。

德晟研發(fā)生產(chǎn)的病毒樣本保存液分為病毒滅活樣本保存液和非滅活型,非滅活型病毒樣本保存液可以完整保護(hù)好病毒的蛋白,可用于細(xì)胞培養(yǎng)。針對(duì)不同的需求所適用的病毒樣本保存液也會(huì)有所不同,有需求的可直接來(lái)電咨詢。


2021-08-18 11:26:24 575 0
病毒保存液快速找到隱藏的新冠病毒

當(dāng)疫情再一次伺機(jī)而動(dòng)時(shí),要想快速的控制病毒的傳播,做核酸檢測(cè)就成了必經(jīng)之路,同時(shí)也備受各界關(guān)注。但影響核酸檢測(cè)結(jié)果的因素是多種多樣的,包括樣本采集部位、采集方式、儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程、核酸提取操作等等。其中,樣本的穩(wěn)定性是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如何能使病毒快速失活,又能保護(hù)病毒核酸不被降解,維持檢測(cè)穩(wěn)定性的病毒樣本保存液就成了重中之重。

第yi步:打破外殼,消滅“戰(zhàn)斗力”

和其他RNA病毒一樣,新冠病毒的結(jié)果簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),是由蛋白質(zhì)外殼包裹著單鏈核酸——RNA構(gòu)成的。我們可以簡(jiǎn)單地將病毒的RNA視為發(fā)號(hào)施令的“大腦”,蛋白質(zhì)則是執(zhí)行命令的“四肢”。新冠病毒感染人體并發(fā)生繁殖活動(dòng),引發(fā)病癥,這個(gè)過(guò)程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白結(jié)構(gòu)完成。

滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)變性劑,能迅速溶解蛋白質(zhì),導(dǎo)致病毒結(jié)構(gòu)破碎。當(dāng)帶有新冠病毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病毒受裂解液作用,蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復(fù)原的。這時(shí)候,病毒就失去了作惡的“爪牙”,不再擁有對(duì)人的感染能力,從而保障了樣本運(yùn)輸、處理過(guò)程中接觸者的安全。

第二步:抑zhi酶活,押送“身份證”

外殼裂解后,新冠病毒的RNA游離在保存液當(dāng)中。作為單鏈大分子,RNA的穩(wěn)定性不像雙鏈的DNA那樣巋然不動(dòng),在自然環(huán)境中隨處存在的RNA酶便是使RNA水解斷裂的罪魁禍?zhǔn)住R虼?,通常認(rèn)為失去外殼保護(hù)的病毒RNA是脆弱、不穩(wěn)定的,需要低溫儲(chǔ)存才能保證它的完整性。

第三步:配合提取,確認(rèn)“真兇”

病毒RNA妥善地儲(chǔ)存在病毒樣本保存液中,在進(jìn)行檢測(cè)前,還需要zui后一個(gè)步驟:將保存液中的RNA捕捉、濃縮,作為zui終樣本加入實(shí)時(shí)熒光PCR體系中,上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。

德晟生產(chǎn)的病毒保存液除了滅活型病毒保存液外,還有非滅活型病毒保存液。它是同時(shí)保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時(shí)也有一定的感染性風(fēng)險(xiǎn)。采樣后長(zhǎng)時(shí)間保存需要保持嚴(yán)格低溫。不管是哪種病毒保存液,我們?cè)谑褂脮r(shí)都需要按照要求嚴(yán)格操作、存放或運(yùn)輸。


2021-08-12 11:13:08 539 0
病毒保存液是抗擊疫情的大功臣

因?yàn)橐咔榉捶磸?fù)復(fù),新冠話題又已經(jīng)成為了我們?nèi)粘5脑掝},所有人都因?yàn)橐咔樽兊镁o張,近段時(shí)間武漢更是實(shí)行全民進(jìn)行核酸檢測(cè)。提到核酸檢測(cè)就要說(shuō)到我們德晟研發(fā)生產(chǎn)的病毒保存液了。我們核酸檢測(cè)可是少不了它,它到底在核酸檢測(cè)中起到什么作用呢?讓我們一起來(lái)了解一下把!

病毒保存液,目前主要分為滅活型和非滅活型兩種。病毒采樣拭子是常用的病毒采樣方法與PCR相結(jié)合可以用于快速病毒性疾病的檢測(cè)。但是,并不是每個(gè)樣品采集處都能進(jìn)行PCR檢測(cè),因此需要對(duì)采集到的病毒拭子樣品進(jìn)行運(yùn)輸于是拭子病毒保存液應(yīng)運(yùn)而生。

對(duì)于不同的檢測(cè)目的,需要使用不同的病毒保存液,目前廣泛使用的這兩種保存液各有特點(diǎn)。為了滿足不同的檢測(cè)要求,以及不同的病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室條件,采樣不同的保存液是很有必要的。

病毒保存液(滅活型)采用裂解鹽可以快速對(duì)呼吸道病原體進(jìn)行滅活、保存,使樣品失去

感染性。已滅活的樣品可配套使用多種病毒DNA/RNA提取試劑盒,M32/M96核酸提取儀酸同時(shí)配合呼吸道病原體PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè),特異性靈敏度均不受影響。

病毒保存液(非滅活)含有Hanks液基礎(chǔ)慶大霉素真菌抗生素BSA(V)冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑及氨基酸等。多種抗生素聯(lián)合,具有抗細(xì)菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,可在病毒的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護(hù)膜,使其不易分解,保證病毒的完整性;Hanks緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境,有助于增加病毒的生存時(shí)間和感染穩(wěn)定性。非滅活的病毒保存液通常用于臨床流感、禽流感(如H7N9)、手足口病、麻疹等病毒標(biāo)本及支原體、脲原體、衣原體等標(biāo)本的采集及運(yùn)送。

德晟科技自疫情復(fù)工以來(lái)一直致力于病毒保存液、卡波姆等產(chǎn)品的研發(fā)生產(chǎn),已取得突破性的勝利,客戶用后的肯定對(duì)我們更是極大的鼓勵(lì)!我們將一直堅(jiān)持不懈的做好我們的產(chǎn)品不為眼前的利益,只為更好的發(fā)展以及客戶的信任。病毒保存液對(duì)疫情的作用可真是功不可沒呢!


2021-08-16 12:02:53 451 0
人巨細(xì)胞病毒核酸檢測(cè)結(jié)果 2.586e 05要緊嗎
 
2018-12-01 15:46:37 292 0
核酸檢測(cè)Vs抗體檢測(cè)的區(qū)別及病-毒保存液的作用

檢測(cè)新冠病-毒一般有兩種方式,核酸檢測(cè)和抗體檢測(cè)。但是我們一般都是說(shuō)做核酸檢測(cè),自然就忽視了抗體檢測(cè)。這是因?yàn)榭贵w檢測(cè)一般用作新冠核酸檢測(cè)陰性疑似病例的補(bǔ)充檢測(cè)指標(biāo)或疑似病例診斷中與核酸檢測(cè)協(xié)同使用,不能作為確診和排除依據(jù),更適合回顧式檢查。那在這兩種新冠檢測(cè)有何區(qū)別?病-毒保存液更適合用于哪種檢測(cè)呢?

病-毒保存液

它是一種用于病-毒樣本檢測(cè)的液體。主要有滅活型和非滅活型兩種。滅活型能迅速滅活病-毒,釋放病-毒核酸,用于快速病-毒核酸檢測(cè);而非滅活型可同時(shí)保護(hù)病-毒RNA和蛋白活性,即可用于病-毒核酸檢測(cè),又可用于抗體檢測(cè)。

核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)區(qū)別:

樣本不同

核酸檢測(cè)需要呼吸道樣本,包括咽部、鼻咽部分泌物、痰液、支氣管、灌洗液、肺組織活檢等,采集過(guò)程十分復(fù)雜。

抗體檢測(cè)是驗(yàn)血檢測(cè),可以通過(guò)末梢采血或者靜脈采血,樣本采集方式更為便捷和安全,而且樣本可以存放72小時(shí)。

檢測(cè)方法不同

核酸檢測(cè)是對(duì)病-毒的直接檢測(cè)。它是以病-毒特有的DNA序列為檢測(cè)靶標(biāo),通過(guò)PCR擴(kuò)增,使我們選擇的這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級(jí)增加,每一個(gè)擴(kuò)增出來(lái)的DNA序列,都可與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào)。擴(kuò)增出來(lái)的靶DNA越多,累積的熒光信號(hào)就越強(qiáng)。而沒有病-毒的樣本中,由于沒有靶DNA擴(kuò)增,因此就檢測(cè)不到熒光信號(hào)增強(qiáng)。 而且該核酸樣本保存條件苛刻,RNA極易裂解,4℃僅可存放24小時(shí)。

抗體檢測(cè)是間接檢測(cè)。它不是針對(duì)病-毒本身,而是人體沾染病-毒后免疫應(yīng)答產(chǎn)生的特異性抗體。人體沾染病-毒后一周左右逐步產(chǎn)生抗體并隨后快速升高,人體內(nèi)一般先產(chǎn)生稱為IgM的抗體,IgM抗體陽(yáng)性表示近期沾染,IgG抗體陽(yáng)性則表示沾染時(shí)間較長(zhǎng)或既往沾染。

檢測(cè)條件不同

核酸檢測(cè)需要有專門的儀器和標(biāo)準(zhǔn)的分子檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,需要PCR認(rèn)證人員操作,步驟繁瑣,全程需要5~8個(gè)小時(shí),過(guò)程中沾染風(fēng)險(xiǎn)大。

抗體檢測(cè)抗體檢測(cè)突破現(xiàn)有核酸檢測(cè)方法對(duì)人員/場(chǎng)所的限制,可以快速、大量檢測(cè),且可以在基層實(shí)驗(yàn)室完成,且沾染風(fēng)險(xiǎn)小。

由此可以看出,不管哪種新冠病-毒的檢測(cè)方式都是有利有弊的。抗體檢測(cè)是對(duì)核酸檢測(cè)“假陰性”的補(bǔ)充,兩者結(jié)合可有效提高新冠診斷效能,對(duì)于疫情防控具有非凡的價(jià)值。


2021-09-18 11:45:53 419 0
Cole-Parmer為新冠病毒核酸檢測(cè)助力

       2019年12月底武漢發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎以來(lái),感染確診病例和疑似病例數(shù)量仍在不斷上升,疑似病例的快速確診迫在眉睫。目前臨床上確診新型冠狀病毒肺炎病例,Z通用的方式仍然是在臨床觀察的基礎(chǔ)上,采集痰液、咽拭子等呼吸道標(biāo)本進(jìn)行病毒核酸基因檢測(cè),并作出病原學(xué)診斷。目前核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性問(wèn)題牽動(dòng)了很多人的心,除去該病毒的一些特有特征外,檢測(cè)過(guò)程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)涉及的科學(xué)儀器和操作步驟都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。

       目前新冠狀病毒核酸檢測(cè)主要通過(guò)PCR檢測(cè)的方法,其對(duì)試驗(yàn)場(chǎng)地、檢驗(yàn)儀器及操作人員的要求都非常高,輕微的污染就可能對(duì)結(jié)果造成偏差。另外,對(duì)檢測(cè)樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴(yán)苛的要求。并且,由于新冠狀病毒的傳染危險(xiǎn)性,防護(hù)準(zhǔn)備和后續(xù)的消毒處理對(duì)整個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商,可以為新冠狀病毒核酸檢測(cè)提供從防護(hù),采樣,樣本保存,檢測(cè),消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信jing準(zhǔn)可靠的儀器設(shè)備及防護(hù)消毒產(chǎn)品一定能為這場(chǎng)戰(zhàn)役中的檢測(cè)工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)!

Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單*手套還有病毒防護(hù)丁 腈系列可選

       以下是新冠病毒核算檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的具體標(biāo)準(zhǔn)介紹,可供各位老師參考,其中涉及的儀器設(shè)備和耗材,疫情期間歡迎在微信平臺(tái)直接聯(lián)系我們,或者直接聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。

新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

diyi步:樣本采集

       通常是在采集地——定點(diǎn)發(fā)熱門診進(jìn)行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其陽(yáng)性率非常高)

       在采集過(guò)程中,Cole-Parmer可為您提供防護(hù)服,護(hù)目鏡,鞋套,以及手套等防護(hù)用品。

第二步、樣本的包裝、保存與運(yùn)輸

       通常采樣管需經(jīng)過(guò)3層包裝,即:自封袋+運(yùn)輸罐+專用運(yùn)輸箱。在2-4℃進(jìn)行保存,(通常保存不能超過(guò)72小時(shí)),再通過(guò)UN2814感染性物質(zhì)專用運(yùn)輸箱,由經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)的專人,全身著防護(hù)用品運(yùn)送轉(zhuǎn)運(yùn)箱。

第三步、樣本的核酸檢測(cè)

  • 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室

  • 實(shí)驗(yàn)條件:二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室(P2負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室)

  • 防護(hù)準(zhǔn)備:檢測(cè)人員需進(jìn)行三級(jí)防護(hù)的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、醫(yī)用N95口罩、一次性防護(hù)服、一次性鞋套、一次性防水靴套、護(hù)目鏡和雙層乳膠手套。如有條件可加穿一次性隔離衣。                       

  • 檢測(cè)步驟:準(zhǔn)備工作,核酸提?。ㄊ謩?dòng)),基因擴(kuò)增與檢測(cè),結(jié)果分析     

1.準(zhǔn)備工作

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級(jí)生物安全柜,水浴或烘箱,移液器

       首先檢查運(yùn)輸罐是否嚴(yán)格密閉,然后取出罐內(nèi)的密封袋進(jìn)行56℃下30分鐘的消毒滅活,滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對(duì)采集的樣品進(jìn)行分裝、混勻。

       整個(gè)過(guò)程應(yīng)在二級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進(jìn)出安全柜內(nèi)的次數(shù)。

2.核酸提?。ㄊ謩?dòng))

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:二級(jí)生物安全柜,移液器,振蕩器,金屬加熱器,微型離心機(jī)

       首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進(jìn)行裂解液的配置。然后,采用化學(xué)試劑法對(duì)核酸樣本進(jìn)行裂解,樣品裂解前需經(jīng)過(guò)充分的振蕩混勻,如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過(guò)多次離心完成裂解產(chǎn)物的過(guò)濾收集。Z后利用離心純化法對(duì)裂解后的核酸進(jìn)行洗滌與回收。

3.基因擴(kuò)增與檢測(cè)

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:生物安全柜,PCR板離心機(jī),實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

       首先,需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的體積量進(jìn)行配置,并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個(gè)PCR反應(yīng)管中,加蓋密閉后進(jìn)行充分的混勻、離心。Z后,將PCR反應(yīng)管置于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中,按照試劑盒說(shuō)明書的要求進(jìn)行擴(kuò)增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測(cè)。

4.結(jié)果分析

       Z后,通過(guò)計(jì)算出的CT值,依據(jù)檢測(cè)試劑盒廠家說(shuō)明書的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定,陽(yáng)性、陰性或者不確定。

第四步、未測(cè)樣品的保存

       如樣本未能及時(shí)檢測(cè),需將樣本于-70℃或以下進(jìn)行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。

第五步、消毒處理

       生物安全柜內(nèi):對(duì)臺(tái)面、儀器、外層手套進(jìn)行消毒,相關(guān)垃圾投入專用YL垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜,時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。

       核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi):對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、地面進(jìn)行消毒,并開啟紫外照射燈進(jìn)行空間消毒,時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。

       實(shí)驗(yàn)人員:按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級(jí)防護(hù)穿戴,并置于專用YL垃圾桶內(nèi)。

       YL垃圾:所有與新型冠狀病毒相關(guān)的YL垃圾需經(jīng)過(guò)濕熱高壓滅菌(121℃,30分鐘)后再作為普通的YL垃圾處理,且垃圾袋上應(yīng)標(biāo)注新型冠狀病毒YL垃圾的相關(guān)信息。


        注意:實(shí)驗(yàn)試劑、設(shè)備等需取得YL器械注冊(cè)證,科學(xué)研究除外。



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Copan病毒采樣、運(yùn)輸和保存病毒的通用運(yùn)輸介質(zhì)

CopanUTM?:用于收集、運(yùn)輸和保存病毒分子診斷測(cè)試的臨床標(biāo)本的通用運(yùn)輸介質(zhì)

 

UTM?是一種FDA批準(zhǔn)的收集和運(yùn)輸系統(tǒng),適用于收集、運(yùn)輸、保存和長(zhǎng)期冷凍保存含有病毒分子診斷檢測(cè)的臨床標(biāo)本,包括COVID-19、衣原體、支原體或脲原體有機(jī)體。

運(yùn)輸介質(zhì)裝在一個(gè)塑料螺旋蓋管中,在室溫或冷藏溫度下可維持生物活力48小時(shí)。


·室溫,可靠

室溫穩(wěn)定的系統(tǒng)保持生物的生存能力長(zhǎng)達(dá)48小時(shí),不需要冷藏前收集

UTM?已經(jīng)過(guò)測(cè)試和驗(yàn)證,完全符合CLSI M40-A2:微生物運(yùn)輸系統(tǒng)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

*獨(dú)特的培養(yǎng)基配方包括抗生素,以制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng),而不影響病毒,衣原體,支原體或脲原體

酚紅pH指示劑提供了在整個(gè)存儲(chǔ)和產(chǎn)品壽命中介質(zhì)完整性的目視測(cè)量

 

方便的系統(tǒng)與多種配置

·可在單個(gè)運(yùn)輸管散裝或作為患者收集包與棉簽配對(duì)。取樣棒軸上的模制斷點(diǎn),安全可靠地將取樣棒斷裂到運(yùn)輸管中

·裙邊,平底管與獨(dú)特的內(nèi)部錐形形狀,使樣品容易離心,并允許管直立在實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)。


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