什么是核酸檢測？

核酸檢測是指通過特殊的技術(shù)手段檢測臨床樣本中是否存在特定的病原體核酸，從而診斷患者的感染原因。新型肺炎核酸檢測主要是看它的核酸，通過實時聚合酶鏈反應(yīng)，即RT-PCR方法來檢測。檢測的樣本鼻拭子或咽拭子從鼻腔或者口腔用棉簽沾取樣本再出來做一個檢測，這是目前簡單、快捷的一個方法。

核酸檢測中病毒滅活樣本保存液的優(yōu)勢是什么呢？

1.降低RNA降解造成假陰性

核酸樣本保存條件苛刻，RNA極易裂解，4℃僅可存放24h，運輸過程過長RNA就會出現(xiàn)提前被降解的現(xiàn)象，從而導(dǎo)致檢測假陰性增多。病毒樣本保存液是采樣管內(nèi)一種病毒樣本保護(hù)性運輸介質(zhì)，防止病毒采樣后不能及時檢測在送檢過程中病毒降解，避免因病毒在檢測途中提前降解造成假陰性。

2.減小核酸提取過程的感染

所有人都知道新冠肺炎的傳染性高，檢測過程中稍有不慎會被感染。核酸檢測需要有專門的儀器和標(biāo)準(zhǔn)的分子檢測實驗室，需要PCR認(rèn)證人員操作，步驟繁瑣，全程需要5~8個小時，過程中感染風(fēng)險大。

病毒滅活樣本保存液采用裂解鹽可以快速對呼吸道病原體進(jìn)行滅活、保存，使樣品失去感染性。由于是滅活病毒而不用培養(yǎng)病毒，首先需要的就是對病毒進(jìn)行裂解失活、破壞其膜蛋白釋放核酸，大大降低了核酸提取過程中被感染的危險度。

德晟研發(fā)生產(chǎn)的病毒樣本保存液分為病毒滅活樣本保存液和非滅活型，非滅活型病毒樣本保存液可以完整保護(hù)好病毒的蛋白，可用于細(xì)胞培養(yǎng)。針對不同的需求所適用的病毒樣本保存液也會有所不同，有需求的可直接來電咨詢。

我們很多都知道VTM病毒保存液是病毒檢測中用到的，那么它是用于病毒的核酸檢測還是用于無癥狀患者或接種了疫苗的人的抗體檢測呢，不用VTM能不能進(jìn)行檢測呢？可能有些人就不太清楚了。

病毒保存液主要是病毒采樣管中添加的成分，并不是每個樣品采集處都能進(jìn)行PCR 檢測，因此需要對采集到的病毒拭子樣品進(jìn)行運輸。樣本送到檢測機構(gòu)后，通過PCR擴(kuò)增等方法來進(jìn)行分析，屬于病毒的核酸檢測。

進(jìn)行病毒樣本采集用的采樣管由采樣管、采樣拭子（鼻、咽拭子）以及管內(nèi)添加的病毒保存液組成。而保存液又分為滅活型和非滅活型兩種：

滅活型保存液：成分有高濃度的裂解鹽，不僅能夠快速的破壞病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜，還能夠變性蛋白質(zhì)，使病毒的蛋白質(zhì)變性沉淀，從而讓核酸擺脫蛋白質(zhì)纏繞，釋放出核酸；同時還含有緩沖液EDTA和Tris與核酸酶抑zhi劑。

非滅活保存液：成分有Hanks溶液，主要由多種無機鹽、緩沖劑、葡萄糖、0.4%酚紅在滅菌條件下制成，與細(xì)胞生長狀態(tài)的pH值、滲透壓及無菌條件一致，使病毒宿主細(xì)胞體外存活時間延長；另外還含有蛋白保護(hù)劑保護(hù)病毒穩(wěn)定性，以及緩沖劑與冷凍保護(hù)劑。

病毒保存液及采樣管的使用：

采樣前,在標(biāo)簽上注明樣品信息；

根據(jù)不同的實驗?zāi)康模貌蓸邮米釉谙鄳?yīng)的部位采樣;

具體采樣方法有以下幾種:

a)鼻腔采集：將拭子頭輕輕插入鼻腔內(nèi)采樣,用另一拭子以同樣方式采集另一鼻腔樣本將拭子頭浸入采樣液中,折斷尾部;

b)咽部采集：用拭子采集咽喉部樣本,同樣將拭子頭侵入采樣液中,折斷尾部。

分析現(xiàn)有轉(zhuǎn)運鼻咽拭子病-毒標(biāo)本的液體培養(yǎng)基可以看出，目前液體培養(yǎng)基主要關(guān)注兩類問題，一方面是液體培養(yǎng)基配方本身的性能問題，需解決非滅活型保存液如何更完整地保存病-毒的原始性狀及活性，滅活型保存液如何滅活病-毒的同時有效保護(hù)核酸不被核酸酶降解，各種保存液如何保證樣本保存液采集標(biāo)本后的存儲條件溫和且保存時間盡量延長等問題；另一方面關(guān)注的問題主要是保存液如何提高產(chǎn)品穩(wěn)定性及滅活型。在這兩方面，德晟公司針對病-毒保存液做出了相應(yīng)的處理。

非滅活型保存液——提高產(chǎn)品穩(wěn)定性

因市面上很多現(xiàn)有的非滅活型樣本保存液成分富含氨基酸、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)容易滋生微生物，且抗生素類物質(zhì)無法耐受高溫、輻照等滅菌方式。為了保持產(chǎn)品的穩(wěn)定性，德晟研發(fā)生產(chǎn)的非滅活病-毒保存液是不含裂解鹽，但是保存的病-毒完整性更好，檢出率更高，除了核酸檢測外還可以用于其他研究。它具有抗細(xì)菌和抗真菌的作用；牛血清白蛋白（BSA）作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，可在病-毒的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護(hù)膜，使其不易分解，保證病-毒的完整性；Hanks緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境，有助于增加病-毒的生存時間和感染穩(wěn)定性。再就是對菌落的控制我們是非常嚴(yán)格的，以免產(chǎn)品出現(xiàn)長菌現(xiàn)象。

滅活型保存液——提高產(chǎn)品滅活性

關(guān)于滅活型樣本保存液的相關(guān)研究表明，常用的病-毒裂解劑 AVL 和 RLT 緩沖液處理后的病-毒仍然存活，這提示我們對滅活型樣本保存液針對特定病-毒的滅活能力應(yīng)當(dāng)進(jìn)行相應(yīng)的臨床評估。還有研究表明，一旦加入乙醇，AVL 就可以完全滅活 EBOV 病-毒，但這與下游自動核酸提取系統(tǒng)不兼容。這提示我們改進(jìn)滅活型樣本保存液的同時還應(yīng)驗證對下游核酸提取及檢測的影響。

德晟和高校專家獨jia研制的滅活型病-毒保存液，含有特殊的蛋白變性劑和核酸穩(wěn)定劑，蛋白變性劑可以迅速破壞病-毒外殼蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)，將病-毒滅活。當(dāng)帶有新冠病-毒的臨床樣本與保存液混合，樣本中的病-毒受裂解液作用，蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞，并且這種破壞是不可復(fù)原的。核酸穩(wěn)定劑可以常溫穩(wěn)定保存病-毒核酸不降解，可以在37℃條件下穩(wěn)定保存7天，非常利于核酸檢測的樣本保存。