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問(wèn)答社區(qū)

基因測(cè)序中出現(xiàn)雙峰的情況有哪些原因

小艾想模擬不過(guò) 2015-02-12 05:40:42 611  瀏覽
  •  

參與評(píng)論

全部評(píng)論(2條)

  • 憶飽商 2015-02-13 00:00:00
    PCR產(chǎn)物會(huì)出現(xiàn)突變,質(zhì)??赡懿皇菃慰寺?

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    評(píng)論

  • *baolai1962 2015-02-15 00:00:00
    你的雙峰是連續(xù)出現(xiàn)還是只是出現(xiàn)在個(gè)別堿基的位置?如果是連續(xù)出現(xiàn)的話可能的原因有:序列中有poly結(jié)構(gòu),測(cè)序底物不純,或是有復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu),若只是單堿基的雙峰的話很有可能是突變或者是PCR錯(cuò)配導(dǎo)致的

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    評(píng)論

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GX液相出現(xiàn)雙峰重疊
對(duì)照品是腺嘌呤和枸櫞酸,供試品為CPDA1 昨天流動(dòng)相緩沖液是磷酸緩沖液,用的是磷酸氫二鈉4.5g,磷酸二氫鈉1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸調(diào)PH到2.5(PH計(jì)確認(rèn)無(wú)誤),加水至1000ML,和HPLC級(jí)甲醇15:85混得流動(dòng)相。 今天也是同樣配了200... 對(duì)照品是腺嘌呤和枸櫞酸,供試品為CPDA1 昨天流動(dòng)相緩沖液是磷酸緩沖液,用的是磷酸氫二鈉4.5g,磷酸二氫鈉1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸調(diào)PH到2.5(PH計(jì)確認(rèn)無(wú)誤),加水至1000ML,和HPLC級(jí)甲醇15:85混得流動(dòng)相。 今天也是同樣配了2000ML。先使用昨天配的流動(dòng)相稀釋和平衡柱子(排除清洗操作和稀釋的濃度問(wèn)題) 昨天使用時(shí)出峰很正常但是下峰收尾略拖長(zhǎng),但是今天出現(xiàn)雙峰重疊現(xiàn)象,起初伴有平頭峰,量程問(wèn)題已經(jīng)解決,但腺嘌呤和總枸櫞酸依然重疊,枸櫞酸對(duì)照品提前出峰(時(shí)間和腺嘌呤相近),是否是流動(dòng)相問(wèn)題,但是若是流動(dòng)相問(wèn)題昨天做液相出圖很正常,分離的很好,還是緩沖液冰箱里放過(guò)夜失靈?? 求解~ 展開(kāi)
2010-04-27 01:51:24 464 2
光譜儀檢測(cè)出現(xiàn)誤差有哪些原因

       雖然光譜儀本身具有很高的測(cè)量精度,但在測(cè)量樣品中元素含量時(shí),得到的結(jié)果往往與真實(shí)含量不符,存在一定的誤差,而且由于多種因素的影響,有些材料本身的含量很低。引起儀器檢測(cè)誤差的主要因素可分為以下幾類:

  系統(tǒng)誤差來(lái)源

  當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的含量和化學(xué)成分不完全相同時(shí),基體線和分析線的強(qiáng)度可能會(huì)發(fā)生變化,從而引入誤差。為了消除系統(tǒng)誤差,必須嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)樣品制備要求。為了檢查系統(tǒng)誤差,需要對(duì)多種校對(duì)結(jié)果進(jìn)行化學(xué)分析。

  當(dāng)澆注狀態(tài)下的鋼樣與退火、淬火、回火、熱軋、鍛造狀態(tài)下的類鋼金屬結(jié)構(gòu)不同時(shí),測(cè)量數(shù)據(jù)可能不同。未知元素譜線的重疊干涉。例如,在冶煉過(guò)程中添加脫氧劑或除硫劑時(shí),混合未知合金元素,并引入系統(tǒng)誤差。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)物和樣品的物理性質(zhì)不一致時(shí),激發(fā)的特征線就會(huì)不同,從而引起系統(tǒng)誤差。

  偶然誤差源

  與樣品成分不均勻有關(guān)的誤差。由于光電光譜分析所消耗的樣品量很小,樣品中元素分布不均勻,結(jié)構(gòu)不均勻,導(dǎo)致不同部位分析結(jié)果不同,偶爾出現(xiàn)誤差。主要原因如下:

  在冶煉過(guò)程中引入夾雜物,產(chǎn)生偏析,導(dǎo)致樣品元素分布不均。樣品的缺陷、氣孔、裂紋、氣泡等。磨樣線、磨樣過(guò)熱、磨樣面放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及指紋等因素。為了減少偶然誤差,需要仔細(xì)取樣以消除樣品不均勻性和鑄造缺陷,并且可以重復(fù)多次分析以減少分析誤差。

  其他因素誤差

  室溫升高會(huì)增加光電倍增管的暗電流,降低信噪比。濕度很可能引起高壓元件的泄漏和放電,使分析結(jié)果不穩(wěn)定。氬不純凈。當(dāng)氬中含有氧和水蒸氣時(shí),激發(fā)點(diǎn)會(huì)惡化。如果氬氣管道和電極夾持器不放電,分析結(jié)果會(huì)更差。


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測(cè)米油糠粗蛋白測(cè)定中出現(xiàn)誤差有哪些原因拜托各位大神
我們廠到得米油糠粗蛋白有12。8,那客戶非說(shuō)低,說(shuō)他的糠能達(dá)到15.而且他在別的廠化驗(yàn)的數(shù)據(jù)確實(shí)是十五??晌覀冞@就沒(méi)有做過(guò)這么高蛋白的米糠,為什么?是不是我們哪弄錯(cuò)了??求教大家。 還有,如果碎米粒比較明顯呢?蛋白應(yīng)該低些,對(duì)不?是不是稻子品種不一... 我們廠到得米油糠粗蛋白有12。8,那客戶非說(shuō)低,說(shuō)他的糠能達(dá)到15.而且他在別的廠化驗(yàn)的數(shù)據(jù)確實(shí)是十五。可我們這就沒(méi)有做過(guò)這么高蛋白的米糠,為什么?是不是我們哪弄錯(cuò)了??求教大家。 還有,如果碎米粒比較明顯呢?蛋白應(yīng)該低些,對(duì)不?是不是稻子品種不一樣,粗蛋白含量也存在差異?那如果米糠水分是十五,灰分是九個(gè),蛋白能達(dá)到十五不? 大家?guī)蛶兔?,可否提供些米糠的質(zhì)量方面的知道? 展開(kāi)
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