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在核磁共振分析中,為什么發(fā)生共振峰分裂現(xiàn)象

厙梓柔時代 2017-06-25 08:45:03 447  瀏覽
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參與評論

全部評論(1條)

  • 光頭女頭 2017-06-26 00:00:00
    比如某種原子核,在波譜上為一個頻率,代表一個共振峰。 但有些原子核,比如氫核,在自由離子狀態(tài)下(如水),和在其他碳水化合物中(如脂肪),共振頻率有一定的區(qū)別,造成譜線分裂。也稱作化學位移。

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1.5.由于目前的色譜柱性能優(yōu)良,因此極不可能出現(xiàn)伸舌峰(伸舌峰的現(xiàn)象隨著現(xiàn)今柱填充技術的提高已相當少見)。

伸舌峰一般是由柱過載或柱結構塌陷導致的(發(fā)生伸舌峰的一個原因是色譜柱內發(fā)生溝流或色譜柱結構的坍塌)。

如果在制造商推薦的條件下使用色譜柱,這種情況則很少發(fā)生。

大多數(shù)硅膠柱在pH2-8的范圍內可以保持穩(wěn)定。

pH低于2時,鍵合相會發(fā)生水解;pH高于8時,硅膠會溶解。

如果(如果您需要)在此pH范圍以外使用(操作)HPLC系統(tǒng),請確保選擇在選定條件下會保持穩(wěn)定的色譜柱。

圖5顯示了因柱過載(色譜柱發(fā)生溝流)導致的伸舌峰。

圖5a中顯示了正常的峰值形(峰形);在大約500次注射(進樣)后,觀察到伸舌峰(圖5b)。

使用這種方法便會出現(xiàn)這種變化,并且在每次運行的過程中會經(jīng)常出現(xiàn)(這種改變是該方法所特有,經(jīng)常在前一次分析結束后,下一次分析開始時突然發(fā)生)。

出現(xiàn)伸舌峰后,唯yi有效的解決辦法就是更換色譜柱。

該柱為100x2.1mm(直徑(內徑)),色譜柱填充5mC18顆粒(柱內填充5μm 粒徑的C18填料) 。流動相A是10mM碳酸氫銨(pH9.0) ; B是甲醇(MeOH)。

該方法包括5%B等度洗脫段,接下來是80%B的沖洗(然后用80%B淋洗)。

這種特殊的色譜柱可專門用于高達100%的水流動相,且無封端。

當流動相pH值升高時,封端可保護硅膠免于溶解。

在這種情況下,所使用的色譜柱流動相pH應遠高于推薦的范圍,并且無需保護性封端。硅膠在pH為9時會逐漸溶解,直到柱床結構不再穩(wěn)定,并且柱床會發(fā)生移動,
產(chǎn)生空隙(塌陷)或通道,而這又會導致圖5b伸舌峰的形成。

可以使用較低的流動相pH或采用在較高pH下能夠保持穩(wěn)定狀態(tài)的色譜柱,以避免這一問題(避免這一問題)。

圖5. 過載導致的伸舌峰。(a)正常的峰形;(b)伸舌峰。來源[2]。


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