不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳——蛋白質的分離
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如題，Z好是實驗報告還有思考題，希望幫助解答全部1．聚丙烯酰胺凝膠電泳，存在幾種物理效應？2．系統(tǒng)的不連續(xù)性表現在哪些方面？3．在不連續(xù)體系SDS-PAGE中，當分離膠加完后， 需在其上加一層水， 為什么????????? 4.... 如題，Z好是實驗報告還有思考題，希望幫助解答全部1．聚丙烯酰胺凝膠電泳，存在幾種物理效應？2．系統(tǒng)的不連續(xù)性表現在哪些方面？3．在不連續(xù)體系SDS-PAGE中，當分離膠加完后， 需在其上加一層水， 為什么????????? 4. 在不連續(xù)體系SDS-PAGE中， 分離膠與濃縮膠中均含有TEMED和APS， 試述其作用?5. 樣品液為何在加樣前需在沸水中加熱幾分鐘?6. 電極緩沖液中甘氨酸的作用????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????? ?? 展開
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- jscuan123 2016-12-02 00:48:54
- 1.聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)根據其有無濃縮效應，分為連續(xù)系統(tǒng)和不連續(xù)系統(tǒng)兩大類，連續(xù)系統(tǒng)電泳體系中緩沖液pH值及凝膠濃度相同，帶電顆粒在電場作用下，主要靠電荷和分子篩效應。不連續(xù)系統(tǒng)中由于緩沖液離子成分，pH，凝膠濃度及電位梯度的不連續(xù)性，帶電顆粒在電場中泳動不僅有電荷效應，分子篩效應，還具有濃縮效應，因而其分離條帶清晰度及分辨率均較前者佳。 2.不連續(xù)系統(tǒng)中由于緩沖液離子成分，pH，凝膠濃度及電位梯度的不連續(xù)性。 3隔離空氣，形成平整的界面。 4凝膠配制過程要迅速， 催化劑TEMED要在注膠前再加入，否則凝結無法注膠.注膠過程Z好一次性完成，避免產生氣泡. 5沸水中加熱3分鐘，去掉亞穩(wěn)態(tài)聚合。
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