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聚丙烯酰胺凝膠電泳能否測(cè)定蛋白質(zhì)的質(zhì)量

包紙麻花 2016-10-19 00:22:42 413  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 巨蟹king87 2016-10-20 00:00:00
    聚丙烯酰胺是一種陰離子去污劑,作為變性劑和助溶性試劑,它能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵,使分子去折疊,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。強(qiáng)還原劑,如β-巰基乙醇和二硫蘇糖醇則能使半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入聚丙烯酰胺和還原劑后,分子被解聚為組成它們的多肽鏈。解聚后的氨基酸側(cè)鏈與聚丙烯酰胺充分結(jié)合形成帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)-聚丙烯酰胺膠束,所帶的負(fù)電荷大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,這就消除了不同分子之間原有的電荷差異。蛋白質(zhì)-聚丙烯酰胺膠束在水溶液中的形狀像一個(gè)長橢圓棒,橢圓棒的短軸對(duì)不同的蛋白質(zhì)-聚丙烯酰胺膠束基本上是相同的。但長軸的長度與亞基分子質(zhì)量的大小成正比。因此這種膠束在聚丙烯酰胺-PAGE系統(tǒng)中的電泳遷移率不再受蛋白質(zhì)原有電荷的影響,而主要取決于橢圓棒的長軸的長度,即蛋白質(zhì)或亞基分子質(zhì)量的大小。

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