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- TA神BHDYF 2016-03-23 00:00:00
- 革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是: 1、 取載玻片用紗布擦干，載玻片的一面用marker筆畫一個小圈(用來大致確定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 涂片: 液體培養(yǎng)基:左手持菌液試管，在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋;右手持接種環(huán)在火焰中燒灼滅菌，等冷卻后從試管中沾取菌液一環(huán)，在潔凈無脂的載玻片上涂直徑2mm左右的涂膜，Z后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。 固體培養(yǎng)基:先在載玻片上滴一滴無菌水，再用接種環(huán)取少量菌體，涂在載玻片上，使其薄而均勻。 3、 晾干:讓涂片在空氣中自然干燥。 4、 固定:讓菌膜朝上，通過火焰2-3次固定(以不燙手為宜)。 5、 染色:將固定過的涂片放報(bào)紙上，滴加草酸銨結(jié)晶紫液，染1min。 6、 水洗:用水緩慢沖洗涂片上的染色液，用吸水紙吸干。簡單染色結(jié)束可觀察細(xì)胞形態(tài)。 7、 媒染:滴加1滴碘液，染1min，水洗。 8、 脫色:吸去殘留水，連續(xù)滴加95%乙醇脫色20-30s至流出液無紫色，立即水洗。 9、 復(fù)染:滴加蕃紅復(fù)染3-5min，水洗。至此，革蘭氏染色結(jié)束
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