參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

全部評(píng)論(3條)

• 

  t5H95H1xXd 2018-07-02 00:00:00

  霉菌一般生長速率都很快，挑邊緣菌絲不斷轉(zhuǎn)接可以純化，當(dāng)你有一株真菌時(shí)，測序有以下步驟：提取DNA，PCR，電泳，紫外拍照（檢查PCR是否成功），送出去測序。回來在NCBI比對(duì)，得出Z相近菌種。如果經(jīng)費(fèi)充足，直接把真菌樣品送出去公司全部可以搞定。

  贊(8)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  墮獄之心 2010-03-26 00:00:00

  給你個(gè)論文，希望對(duì)你有幫助 現(xiàn)代真菌鑒定分型方法 北京大學(xué)diyi醫(yī)院(100434) 王端禮 真菌 的 鑒 定不僅是臨床的需要，在植物病理學(xué)、生物退化、生物技術(shù)和環(huán)境的研究都很重要。許多真菌已經(jīng)鑒定到種，但是分類學(xué)家仍在忙于新種的描述和其分類的研究。有些菌種由于經(jīng)濟(jì)學(xué)的關(guān)系或是病理學(xué)的重要性，有深人的研究，其他則需要現(xiàn)代手段來進(jìn)行研究。 一 、 形 態(tài)學(xué) 用表 型 特 征來進(jìn)行分類鑒定，是過去和現(xiàn)在都普遍應(yīng)用的方法。致病真菌的鑒定，需要光鏡，現(xiàn)在更加上熒光顯微鏡和細(xì)胞化學(xué)，還有各種染色法，如子囊泡子染色法。真菌在宿主體內(nèi)鑒定比較困難，如菌絲只能看到有無分隔，有無色素。需要培養(yǎng)來鑒定菌種。某些病例用種特異性抗體探針非常有用，但此種技術(shù)尚未在醫(yī)真菌學(xué)領(lǐng)域內(nèi)作為常規(guī)技術(shù)使用。合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定菌種，是常用的方法。 醫(yī)學(xué) 真 菌 學(xué)家常見到的是半知菌，要看抱子形態(tài)和抱子發(fā)生，看產(chǎn)抱細(xì)胞，即分生抱子梗。有兩種型，一是芽生抱子發(fā)生，在產(chǎn)抱細(xì)胞上有一小點(diǎn)產(chǎn)生分生抱子，另一是葉狀抱子發(fā)生，整個(gè)細(xì)胞是產(chǎn)抱細(xì)胞，分成一至數(shù)個(gè)細(xì)胞?；诔⒔Y(jié)構(gòu)觀察，有許多詞語，但未能普遍應(yīng)用。有的真菌沒有分生抱子，但仍有一些特征，如菌核(sclerotia)、厚壁抱子和一些特殊的菌絲結(jié)構(gòu)，如皮膚癬菌。在少數(shù)情況下，一些機(jī)會(huì)真菌產(chǎn)生有性結(jié)構(gòu)，有許多特點(diǎn)用于菌種鑒定，如子囊菌、擔(dān)子菌和結(jié)合菌。 電鏡 ， T EM是觀察菌的斷面，子囊菌酵母和擔(dān)子菌酵母的橫隔不同，SEM在實(shí)際應(yīng)用有許多發(fā)現(xiàn)，如子囊菌的表面結(jié)構(gòu)可以鑒定到種。 現(xiàn) 代 形 態(tài)學(xué)技術(shù)，如自動(dòng)成像分析、電子顆粒體積、分?jǐn)?shù)幾何學(xué)分析形態(tài)學(xué)的特點(diǎn)。 由于 表 型 各種詞語沒有一定的標(biāo)準(zhǔn)，有很大的主觀性，某些表型特征也不穩(wěn)定，受環(huán)境影響，有的不能在人工培養(yǎng)基上生長，有一些真菌尚未分類，分類概念有待近一步建立。 二 、分 子 生物學(xué) 表型 分 類 受限，生理生化技術(shù)在絲狀真菌鑒定方面，或是費(fèi)時(shí)費(fèi)事或是結(jié)果不準(zhǔn)。分子生物學(xué)非常適用。有兩種技術(shù)，diyi，PCR技術(shù)，可以分析少量真菌細(xì)胞，甚至單個(gè)真菌抱子。第二，選擇通用寡核昔酸對(duì)真菌種特異性引物，測定其核昔酸序列。分子生物學(xué)的研究目的由于生物多樣性有四個(gè)目的。I)系統(tǒng)發(fā)生研究。2)分類學(xué)的研究，在屬、種水平。3)鑒定應(yīng)用，即決定明確的分類名稱。4)流行病學(xué)和群體的遺傳學(xué)研究。具體方法不再詳述。 三 、其 他 : I，生 理 學(xué) 和生物化學(xué) 在純 培 養(yǎng) 上真菌生長比較快，可以使用生理、生化方法來鑒定菌種。如黑酵母的鑒定。不同的生長溫度也用于鑒定。有性和無性是一個(gè)輔助工具。在一定的培養(yǎng)基上，有對(duì)照，其生長速度也可用于鑒定，如青霉。AP[系統(tǒng)也用于絲狀真菌的鑒定。 2. 次 級(jí) 代謝產(chǎn)物 次級(jí) 代 謝 產(chǎn)物既不是為了生長需要，也不是介導(dǎo)基本代謝，常常發(fā)現(xiàn)它是一個(gè)與分了有關(guān)的混合物，有特殊的和極罕見的化學(xué)結(jié)構(gòu)。常見的是固醇、菇、類堿、香豆素等，某些是真菌毒素。將小量從培養(yǎng)皿切下來的標(biāo)本，直接進(jìn)行層析色譜法檢查，比傳統(tǒng)濃縮抽取提純法簡單易行。此法用于地衣的鑒定較好。很少用于真菌分類，由于對(duì)環(huán)境有一定影響，而且比較難，較少應(yīng)用，但有人用于子囊菌的分類。 3. 泛 酉昆 系統(tǒng) 是一 種 初 級(jí)代謝產(chǎn)物，起重要作用。泛釀即輔酶Q，是呼吸系統(tǒng)電子傳播鏈的攜帶者。一些異戊二烯(isoprene)接觸醒核各有不同，對(duì)鑒定到屬或?qū)僖韵滤胶苡袔椭Ｖ饕b定細(xì)菌和酵母，也用于黑酵母和絲狀真菌。 (Ya ma da Y ，e tal. In t.J.Genet 1989;5 6:309 Y ag uchiJ > e tal .M ycoscience 1996;3 7:55)0 4. 脂 肪 酸組成 此法 在 細(xì) 菌學(xué)方面是常規(guī)應(yīng)用的。一是成分，二是相對(duì)濃度。極少用于真菌分類。使用熱解氣相色譜法、熱解塊狀光譜儀、氣相色譜儀、隔膜水相聚合物雙相系統(tǒng)等，主要應(yīng)用這些方法。近來應(yīng)用氣相色譜法合并多變量統(tǒng)計(jì)分析方法，成功地用于絲狀真菌，包括卵菌、擔(dān)子菌、結(jié)合菌、甚至只有菌絲的真菌。用于種間水平。應(yīng)注意許多變化，如培養(yǎng)狀態(tài)和溫度是Z主要的。 5. 細(xì) 胞 壁組成 子 囊 菌 和擔(dān)子菌含有幾丁質(zhì)和葡萄糖，結(jié)合菌含有脫乙酞幾丁質(zhì)(chitosen)和葡聚糖醛酸。不同的皮膚癬菌含有不同的糖分，醉母細(xì)胞壁或是缺乏或是含有少量其他多糖(如巖藻搪、乳糖、鼠李糖、木搪等)。 6. 蛋 白 質(zhì)組成 用 電 泳 方法可以產(chǎn)生同工酶，可鑒定到屬或種。電泳、免疫學(xué)方法、蛋白質(zhì)分析等可解決種間特性。同工酶分析是一個(gè)經(jīng)濟(jì)和實(shí)用技術(shù)。等位基因酶(allozyme)通常用于系統(tǒng)發(fā)生的研究。

  贊(18)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  kuct12345 2010-03-26 00:00:00

  直接讓TAKARA公司去測就行了！

  贊(7)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論