全部評(píng)論(1條)
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- 我不是*蓉她媽 2017-07-10 00:00:00
- 各類試劑包括:1、無機(jī)營養(yǎng):大量元素類有氮(硝酸鉀等)磷(磷酸二氫鉀)鉀(硝酸鉀)鈣(氯化鈣)鎂(硫酸鎂)硫(硫酸銨),微量元素有鐵、銅、鉬、鋅、錳、硼等2、有機(jī)營養(yǎng):維生素類、肌醇等3、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑:IAA、NAA、BK等4、瓊脂。 儀器包括:分析天平、高壓滅菌鍋、冰箱、無菌接種臺(tái)、各類培養(yǎng)瓶等。 一個(gè)完整的植物組織培養(yǎng)過程一般包括以下幾個(gè)步驟: (1)準(zhǔn)備階段 查閱相關(guān)文獻(xiàn),根據(jù)已成功培養(yǎng)的相近植物資料,結(jié)合實(shí)際制訂出切實(shí)可行的培養(yǎng)方案。然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案配制適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基,并經(jīng)高壓滅菌或過濾CJ后備用。 (2)外植體選擇與消毒 選擇合適的部位作為外植體,采回后經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,然后進(jìn)行消毒處理。將消毒后的外植體在無菌條件下切割成一定大小的小塊,或剝離出莖尖,挑出花,接種到初代培養(yǎng)基上。 (3)初代培養(yǎng) 接種后的材料置于培養(yǎng)室或光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),促使外植體中已分化的細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,或頂芽、腋芽直接萌發(fā)形成芽。然后將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基分化成不同的器官原基或形成胚狀體,Z后發(fā)育形成再生植株。 (4)繼代培養(yǎng) 分化形成的芽、原球莖數(shù)量有限,采用適當(dāng)?shù)睦^代培養(yǎng)基經(jīng)多次切割轉(zhuǎn)接。當(dāng)芽苗繁殖到一定數(shù)量后,再將一部分用于壯苗生根,另一部分保存或繼續(xù)擴(kuò)繁。進(jìn)行脫毒苗培養(yǎng)的需提前進(jìn)行病毒檢測(cè)。 (5)生根培養(yǎng) 剛形成的芽苗往往比較弱小,多數(shù)無根,此時(shí)可降低細(xì)胞分裂素濃度或不加,提高生長(zhǎng)素濃度,促進(jìn)小苗生根,提高其健壯度。 (6)煉苗移栽 選擇生長(zhǎng)健壯的生根苗進(jìn)行室外煉苗,待苗適應(yīng)外部環(huán)境后,再移栽到疏松透氣的基質(zhì)中,注意保溫、保濕、遮蔭,防止病蟲危害。當(dāng)組培苗完全成活并生長(zhǎng)一定大小后,即可移向大田用于生產(chǎn)。 如:莖尖→表面消毒→接種誘導(dǎo)培養(yǎng)基→莖尖生長(zhǎng)→病毒檢測(cè)鑒定→培養(yǎng)無根小植株→培養(yǎng)生根→完整小植株→煉苗20-25天→移栽成活。
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