全部評論(2條)
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- 灌水丶澆花 2012-05-24 00:00:00
- 蛋白無濃縮膠，跑的很難看
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- 伍祖加 2012-05-24 00:00:00
- DNA分子量大，就算是100bp，差不多是12K，分開很容易，條帶比較單一。而蛋白相對來說就小了些，30到40K的蛋白，很常見，而且各蛋白間相差小。多半是大大小小的蛋白混合物。相差小。 并且DNA結(jié)構(gòu)簡單，由四種堿基組成，同樣100bp速度接近。而蛋白由20種AA組成，各蛋白組成差別大。 所以DNA電泳，不用濃縮膠就可以跑得很好。沒必要用濃縮膠。 而蛋白電泳，本身的原因，再加上進(jìn)入電泳孔的時間不同，如果不用濃縮膠，分跑得很寬而分不開。有了濃縮膠，會在進(jìn)入分離膠時，讓所有的蛋白在同一起跑線上，這一條線，很細(xì)很細(xì)。染料在濃縮膠中可以觀察得到。
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熱門問答
- 為什么蛋白電泳需要濃縮膠而DNA電泳不用
- 懂的來啊，要網(wǎng)上沒有的。 復(fù)制的不要啊，我找了好幾天都搜索不到答案了都
2012-05-23 04:09:24
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- 蛋白電泳膠跑得不好
- Z近跑蛋白質(zhì)的膠，跑了十分鐘左右電壓為100V出現(xiàn)了條帶融合的情況，也就是上樣緩沖液看起來全部都混在一起了，連成了一條線，但是線不平~~這樣屬于正常的么？還是膠出現(xiàn)問題還是怎樣？
2010-08-09 01:24:33
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- dna提取的DNA的濃縮
2018-12-02 14:08:14
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- DNA電泳常見問題分析
一、DNA帶模糊
原因：
1.DNA降解；
2.電泳緩沖液陳舊；
3.所用電泳條件不合適；
4.DNA上樣量過多；
5.DNA樣含鹽過高；
6.有蛋白污染；
7.DNA變性。
解決辦法：
1.避免核酸酶污染；
2.電泳緩沖液多次使用后，離子強(qiáng)度降低，pH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果。建議經(jīng)常更換電泳緩沖液；
3.電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度<30℃;巨大DNA鏈電泳，溫度應(yīng)<15℃;核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力；
4.減少凝膠中DNA上樣量；
5.電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽；
6.電泳前酚抽提去除蛋白；
7.電泳前勿加熱，用20mM NaCI緩沖液稀釋DNA。
二、帶弱或無DNA帶
原因：
1.DNA的上樣量不夠；
2.DNA降解；
3.DNA走出凝膠；
4.對于EB染色的DNA，所用光源不合適。
解決辦法：
1.增加DNA的上樣量；聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高，上樣量可適當(dāng)降低；
2.避免DNA的核酸酶污染；
3.縮短電泳時間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度；
4.應(yīng)用短波長（254nm）的紫外光源。
三、DNA帶缺失
原因：
1.小DNA帶走出凝膠；
2.分子大小相近的DNA帶不易分辨；
3.DNA 變性；
4.DNA鏈巨大，常規(guī)凝膠電泳不合適。
解決辦法：
1.縮短電泳時間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度；
2.增加電泳時間，核準(zhǔn)正確的凝膠濃度；
3.電泳前請勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA；
4.在脈沖凝膠電泳上分析。
2020-09-02 16:49:09
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- 600bp的DNA大概要配多少濃度的膠跑電泳
- 我拿到上海生工去測序說有重疊峰，打算跑高濃度電泳，但不知道應(yīng)該如何控制膠的濃度和電泳電壓時間。。。。希望有經(jīng)驗的人給個參考。。謝謝
2008-11-17 03:17:52
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