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  blue_5213 2017-10-31 00:00:00

  番茄提取番茄紅素B-胡蘿卜素 、引言 番茄含番茄紅素少量B-胡蘿卜素二者均屬于類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)胡蘿卜素烯類(lèi)色素溶于水溶于脂溶性機(jī)溶劑本實(shí)驗(yàn)先用乙醇番茄水脫再用二氯甲烷萃取類(lèi)胡蘿卜素二氯甲烷與水混溶故除水才能效組織萃取類(lèi)胡蘿卜素根據(jù)番茄紅素與B-胡蘿卜素極性差別用柱層析離離效用薄層層析進(jìn)行檢驗(yàn) 二、實(shí)驗(yàn)材料試劑 新鮮番茄（或番茄醬） 95%乙醇；二氯甲烷；石油醚（60～90℃）；氯仿；性或酸性氧化鋁（柱層析用）；環(huán)乙烷；硅膠G；飽氯化鈉溶液；水硫酸鈉 三、實(shí)驗(yàn)步驟 1. 原料處理與色素提取 稱(chēng)取新鮮番茄漿[1]20g于100ml圓底燒瓶加95%乙醇40ml搖勻裝流冷凝管水浴加熱流5鐘趁熱抽濾溶液倒殘?jiān)羝績(jī)?nèi)加入30ml二氯甲烷水浴加熱流5鐘層溶液傾抽濾固體仍保留燒瓶?jī)?nèi)再加10ml二氯甲烷重復(fù)萃取合并乙醇兩二氯甲烷提取液倒入液漏斗加5ml飽氯化鈉溶液（利層）振搖靜置層橙黃色機(jī)相使其流經(jīng)頸部塞疏松棉花且棉花鋪層1cm厚水硫酸鈉三角漏斗除微量水溶液儲(chǔ)存于干燥塞錐形瓶層析前溶液通風(fēng)櫥用熱水浴蒸發(fā)至干 2. 柱層析離 取支15cm左右內(nèi)徑1～1.2cm層析柱柱內(nèi)裝用石油醚調(diào)制氧化鋁[2]粗制類(lèi)胡蘿卜素溶解于4ml苯用滴管氧化鋁表面附近沿柱壁緩緩加入柱（留1～2滴供薄層層析用）打塞至色物料拄頂剛流干即關(guān)閉塞用滴管取幾毫升石油醚沿柱壁洗色素并通放溶劑至柱頂剛流干使色素吸附柱加量石油醚洗脫黃色B-胡蘿卜素柱移較快紅色番茄紅素移較慢收集洗脫液至黃色B-胡蘿卜素柱完全除用極性較氯仿作洗脫劑洗脫番茄紅素（注意更換接收瓶）收集兩部通風(fēng)櫥內(nèi)用熱水浴蒸發(fā)至干品別溶于盡能少二氯甲烷盡快進(jìn)行薄層層析 3. 薄層層析檢驗(yàn) 用硅膠G鋪薄板[3]距離底邊約1cm處別用毛細(xì)管點(diǎn)三品間點(diǎn)未離混合物兩邊別點(diǎn)離B-胡蘿卜素番茄紅素點(diǎn)即點(diǎn)完待溶劑揮發(fā)再原位置點(diǎn)要注意必須同位置點(diǎn)且品斑點(diǎn)盡量點(diǎn)毛細(xì)管要輕輕接觸板面即切劃破硅膠層品間距離1～1.5cm板放入裝環(huán)已烷作展劑層析缸蓋蓋切勿讓展劑浸沒(méi)品斑點(diǎn)待溶劑展至10cm左右取層析板斑點(diǎn)氧化迅速消失故要用鉛筆立即圈計(jì)算同品R1值比較同品R1值原及離效 四、注釋 [1 ] 新鮮番茄漿制備：新鮮番茄洗凈用搗碎機(jī)搗碎或用市售番茄醬 [2] 氧化鋁層析柱裝填：層析柱垂直固定于鐵架鋪層薄薄石英砂關(guān)閉塞稱(chēng)取15g氧化鋁置于50ml錐形瓶加入15ml石油醚（順序能反）邊加邊攪且斷旋搖直至均勻漿液（稠厚能流）向柱內(nèi)加入溶劑（石油醚）至半滿(mǎn)啟塞讓溶劑每秒滴速度流入錐瓶搖漿液斷逐漸傾入流溶劑柱斷用木棒或帶橡皮管玻璃棒輕輕敲擊柱身使頂部水平面收集溶劑柱內(nèi)反復(fù)循環(huán)幾保證沉降完全裝緊柱整程能讓柱流干待溶劑剛放至柱頂剛變干即 [3] 硅膠G薄層板制備：4g硅膠G置于燒杯加入8ml蒸餾水?dāng)鄶嚢柚翝{糊狀傾倒洗凈玻板（18 x 6cm）流平或用涂布器鋪板并輕輕敲打均勻室溫放置半涼干移入烘箱緩慢升溫至105～110℃恒溫化半取放入干燥器備用

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