醋酸雙氧鈾-檸檬酸鉛染液復(fù)染方法的具體步驟及染色液的配置
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具體步驟,染色液的配置以及昆蟲組織的染色時(shí)間。... 具體步驟,染色液的配置以及昆蟲組織的染色時(shí)間。 展開
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- 梯h化s泡y軝 2008-07-07 00:00:00
- 把一張濾紙平鋪在有蓋平皿底部。用配制染劑的溶液將其潤濕,上放一小片干凈牙科蠟。將染液滴于蠟塊上,迅速蓋上平皿蓋。將欲染載網(wǎng)浮在液滴上,注意切片朝下。一般采用鈾-鉛雙染法:先用1~3%醋酸雙氧鈾水溶液或70%酒精溶液將載網(wǎng)按上述方法染20~30分鐘。染后必須清洗,一般用鐘表鑷子夾載網(wǎng)浸入清洗液中,反復(fù)清洗,清洗液可放在試管中或小瓶中。經(jīng)三瓶清洗液即可。注意將鑷子中間夾縫液體用一小片濾紙將其吸干。用硝酸鉛與檸檬酸鈉配制成檸檬酸鉛,將其溶于氫氧化鈉,可得到穩(wěn)定的強(qiáng)堿溶液(pH12)。染、洗方法同前。用鉛染時(shí),可用0.1MNaOH浸濕濾紙,以吸收空氣中CO2,防止生成碳酸鉛沉淀污染切片?;?qū)aOH放在牙科蠟周圍。配制染液用的蒸餾水應(yīng)煮沸10分鐘以驅(qū)除CO2,染畢,用0.02NNaOH和無CO2蒸餾水連續(xù)沖洗以除去載網(wǎng)上多余染液,載網(wǎng)清洗后置于培養(yǎng)皿的濾紙上干燥。
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- 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液的配置及注意事項(xiàng)
1、固態(tài)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度計(jì)算時(shí)乘以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的純度,計(jì)算公式如下:
其中, C1:儲(chǔ)備液的Z終濃度mg/L;
W1: 稱取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量mg;
10 定容體積,mL2、稱取10 mg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),因取用量少,且容量瓶口徑小,一般用一次性吸管,將細(xì)端剪出凹槽,用其作為藥匙使用;
3、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)取出后應(yīng)先恢復(fù)至室溫再進(jìn)行稱量;同理,儲(chǔ)備液及工作液也應(yīng)取出恢復(fù)室溫后再開始使用;
4、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)開封后,應(yīng)在瓶身標(biāo)注編號(hào)及開封日期;
5、配置溶劑選取色譜純;
6、Z先考慮直接稱量法,因其誤差Z??;
7、稀釋標(biāo)液時(shí),移液體積不小于10微升;
8、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配置過程中應(yīng)及時(shí)認(rèn)真填寫標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配置記錄及儲(chǔ)備液稀釋記錄,保證其配置的標(biāo)液相關(guān)信息以及濃度與填寫的記錄一致;
9、標(biāo)簽內(nèi)容應(yīng)標(biāo)明:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)編號(hào)及中文,濃度,有效期及配置日期,配置人。
10、在配置易揮發(fā)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),稱量樣品質(zhì)量不小于100Mg,以減少誤差。
(來源:北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司)
- 本生快訊——DAB染色液的使用方法及注意事項(xiàng)
本生快訊——DAB染色液的使用方法及注意事項(xiàng)
DAB染色液用于免疫組化染色,應(yīng)用在Dako 自動(dòng)染色系統(tǒng)上。
DAB染色液的使用方法
1.DAB顯色液配制
10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用
2. 顯色
準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。
3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。
4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現(xiàn)。
5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無離子水里清洗。
6.空氣中晾干。
7. 拍照記錄 。
DAB染色液的注意事項(xiàng)
1. DAB溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶溶解再行使用;
2. 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色,如顏色過深,請(qǐng)勿使用;
3. DAB在常溫下不穩(wěn)定,每次取用后均應(yīng)及時(shí)加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實(shí)驗(yàn),或因滲漏造成實(shí)驗(yàn)環(huán)境污染;
4. DAB有潛在致突變作用,操作時(shí)應(yīng)注意穿戴好防護(hù)用具。
DAB染色液本生公司產(chǎn)品種類已超過萬種,正廣泛應(yīng)用于科研院校、中心實(shí)驗(yàn)室、分子生物學(xué)等科研域。公司豐富的產(chǎn)品既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。
- 求助:檸檬酸的檢測(cè)方法
- 本生闡述:茜素紅S染色液配制方法及染色原理
茜素紅S染色液配制方法及染色原理
茜素紅S是橙黃色的針狀體。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素經(jīng)發(fā)煙硫酸磺化,然后轉(zhuǎn)變?yōu)殁c鹽制得。屬一種蒽醌(Anthraquinone)類的衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與鈣鹽以鰲和方式形成復(fù)合物,用以識(shí)別組織細(xì)胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過茜紅素染色,產(chǎn)生橘紅色沉積。
原理:茜素紅S(Alizarin Red S)鈣染色法是一種旨在通過鰲和技術(shù),使鈣離子和茜素紅S產(chǎn)生復(fù)合物,來分析固定處理的細(xì)胞樣本中橘紅色鈣沉積現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于動(dòng)物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測(cè)。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。
用途:絡(luò)合滴定指示劑和酸堿指示劑。茜素紅能和許多金屬離子生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)色物,在分析中常用作金屬指示劑;光度法測(cè)定金屬離子的顯色劑;在分析中常用作金屬指示劑;光度法測(cè)定金屬離子的顯色劑;酸堿指示劑,一變色范圍PH值3.7(黃)~5.2(紫),第二變色范圍PH值10.1(紫)~12.0(淺黃);用于極譜法測(cè)定金屬離子。
配制方法:將托盤天平上稱取0.1g茜素磺酸鈉定溶于100ml蒸餾水中轉(zhuǎn)移入滴瓶中,貼標(biāo)簽備用。 或用茜素紅粉加PBS溶解后,要注意調(diào)節(jié)PH值到7.2過濾就可以了。0.1%的茜素紅Tris-HCL(PH8.3), Tris的濃度做分子生物學(xué)一樣的,用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH調(diào)節(jié)。
保存:常溫保存,有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1.試劑溶液在樣品表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿樣品表面。
2.茜素紅S染色時(shí)間根據(jù)鈣鹽的含量來確定??稍陲@微鏡下面觀察,見鈣鹽成較深的橘紅色即取出洗滌,如染色液時(shí)間過長(zhǎng),可能出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。
3.為了您的健康和安全,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
茜素紅S染色液 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。
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