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新冠病毒檢測之Chemagen自動化核酸提取方案

珀金埃爾默 2020-02-13 15:33:40 1077  瀏覽
  • 2020庚子鼠年有一個不一樣的開場,一場新冠病毒性肺炎疫情牽動著國人的心。目前,疫情防控工作正進入攻堅階段。早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早ZL正是有效控制疫情發(fā)展的有效舉措。根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第五版 修正版)》,新冠肺炎確診標(biāo)準(zhǔn)之一是新型冠狀病毒核酸檢出陽性。然而近期媒體報道,在疑似患者人群中,新冠病毒核酸檢出陽性率低于50%,導(dǎo)致多數(shù)患者不能得到確診。這可能與樣本采集、核酸提取和RT-PCR等多環(huán)節(jié)的質(zhì)控密切相關(guān),而核酸提取作為檢測流程中非常重要的環(huán)節(jié),其良好的性能對檢測結(jié)果至關(guān)重要。

    全面的核酸提取解決方案

    珀金埃爾默專業(yè)的chemagen技術(shù)在核酸提取方面的優(yōu)勢有目共睹:

    一、安全

    ZLM-PVA親水性磁珠,提取全流程在室溫條件下進行,無需加熱,在保證核酸高得率與高純度的同時,有效防止加熱可能導(dǎo)致的氣溶膠污染。

    二、GX

    ZL的電磁分離技術(shù),可實現(xiàn)獨有的磁棒自旋轉(zhuǎn)式混勻,充分混勻反應(yīng)體系,液面平穩(wěn),有效避免孔間交叉污染。

    三、省力

    內(nèi)置自動化分液器,提取過程中自動添加試劑,大大減少手工操作時間。

    四、靈活

    多種機型可選,靈活的提取通量,可實現(xiàn)提取1-192樣本/批。

     

    Chemagic Prepito-D自動核酸提取儀

    Prepito-D是一款桌面式小型自動化核酸提取儀,批處理通量為1~12,可對血液、血漿、咽拭子、唾液、組織等多種類型的樣本進行自動化的核酸提取,提取過程中,試劑通過內(nèi)置分液器進行自動添加。

     

    Chemagic 360 自動核酸提取儀

    Chemagic360是基于電磁原理進行磁珠分離的高通量自動化核酸提取儀,可從各種類型樣本中提取核酸,通過金屬棒自我旋轉(zhuǎn)混勻而不是上下震蕩方式進行反應(yīng)體系的混勻,可以有效降低樣本間交叉污染的風(fēng)險;該系統(tǒng)規(guī)格為:90cm*90cm*95cm,內(nèi)置自動分液器,除樣本和部分小體積試劑需要手工加入提取體系之外,其余核酸提取試劑均自動加入,可大大減少手工操作時間。三個規(guī)格(12、24與96)提取頭可選,可實現(xiàn)1~96個/批次,可處理10μL~10mL的原始樣本,單孔反應(yīng)體系1.5mL~40mL,真正實現(xiàn)大體積樣品核酸提取。內(nèi)置控制電腦,觸摸屏操作。

     

    Chemagic Prime 全自動核酸提取與體系構(gòu)建系統(tǒng)

    Chemagic Prime是PerkinElmer JANUS自動化液體處理工作站與Chemagic 360自動核酸提取儀的wan美整合,可以實現(xiàn)高通量無人值守的自動化核酸提取。

    除了兼具Chemagic 360的所有性能特點之外,Chemagic Prime可以實現(xiàn)不同規(guī)格原始樣本管上機,自動化條碼掃描,試劑分裝及提取產(chǎn)物的轉(zhuǎn)移、分裝、濃度均一化等操作,還可以自動化構(gòu)建PCR反應(yīng)體系??刹⑿刑幚?塊96孔板,是一款真正高通量無人值守的全自動化核酸提取設(shè)備。

    儀器與配套提取試劑盒信息

     

    另外,PerkinElmer自動化機器人整合系統(tǒng)(ARS),可整合存儲板棧、JANUS G3液體處理工作站、chemagic 360自動核酸提取儀、封膜機以及主流熒光定量PCR儀,實現(xiàn)樣本從原始管上樣、核酸提取到RT-PCR檢測全流程的無人值守式自動化檢測方案,通量更高,有效提高樣本檢測效率,保護實驗人員免于感染風(fēng)險。

     

    自動化機器人整合系統(tǒng)(ARS

    全力支持各地的公共衛(wèi)生、YL部門及科研院校使用核酸提取技術(shù)是珀金埃爾默積極抗擊新冠肺炎疫情的承諾。我們將時刻做好準(zhǔn)備,與疫情抗?fàn)帲A得這場新冠戰(zhàn)“疫”。


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新冠病毒檢測之Chemagen自動化核酸提取方案

2020庚子鼠年有一個不一樣的開場,一場新冠病毒性肺炎疫情牽動著國人的心。目前,疫情防控工作正進入攻堅階段。早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早ZL正是有效控制疫情發(fā)展的有效舉措。根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第五版 修正版)》,新冠肺炎確診標(biāo)準(zhǔn)之一是新型冠狀病毒核酸檢出陽性。然而近期媒體報道,在疑似患者人群中,新冠病毒核酸檢出陽性率低于50%,導(dǎo)致多數(shù)患者不能得到確診。這可能與樣本采集、核酸提取和RT-PCR等多環(huán)節(jié)的質(zhì)控密切相關(guān),而核酸提取作為檢測流程中非常重要的環(huán)節(jié),其良好的性能對檢測結(jié)果至關(guān)重要。

全面的核酸提取解決方案

珀金埃爾默專業(yè)的chemagen技術(shù)在核酸提取方面的優(yōu)勢有目共睹:

一、安全

ZLM-PVA親水性磁珠,提取全流程在室溫條件下進行,無需加熱,在保證核酸高得率與高純度的同時,有效防止加熱可能導(dǎo)致的氣溶膠污染。

二、GX

ZL的電磁分離技術(shù),可實現(xiàn)獨有的磁棒自旋轉(zhuǎn)式混勻,充分混勻反應(yīng)體系,液面平穩(wěn),有效避免孔間交叉污染。

三、省力

內(nèi)置自動化分液器,提取過程中自動添加試劑,大大減少手工操作時間。

四、靈活

多種機型可選,靈活的提取通量,可實現(xiàn)提取1-192樣本/批。

 

Chemagic Prepito-D自動核酸提取儀

Prepito-D是一款桌面式小型自動化核酸提取儀,批處理通量為1~12,可對血液、血漿、咽拭子、唾液、組織等多種類型的樣本進行自動化的核酸提取,提取過程中,試劑通過內(nèi)置分液器進行自動添加。

 

Chemagic 360 自動核酸提取儀

Chemagic360是基于電磁原理進行磁珠分離的高通量自動化核酸提取儀,可從各種類型樣本中提取核酸,通過金屬棒自我旋轉(zhuǎn)混勻而不是上下震蕩方式進行反應(yīng)體系的混勻,可以有效降低樣本間交叉污染的風(fēng)險;該系統(tǒng)規(guī)格為:90cm*90cm*95cm,內(nèi)置自動分液器,除樣本和部分小體積試劑需要手工加入提取體系之外,其余核酸提取試劑均自動加入,可大大減少手工操作時間。三個規(guī)格(12、24與96)提取頭可選,可實現(xiàn)1~96個/批次,可處理10μL~10mL的原始樣本,單孔反應(yīng)體系1.5mL~40mL,真正實現(xiàn)大體積樣品核酸提取。內(nèi)置控制電腦,觸摸屏操作。

 

Chemagic Prime 全自動核酸提取與體系構(gòu)建系統(tǒng)

Chemagic Prime是PerkinElmer JANUS自動化液體處理工作站與Chemagic 360自動核酸提取儀的wan美整合,可以實現(xiàn)高通量無人值守的自動化核酸提取。

除了兼具Chemagic 360的所有性能特點之外,Chemagic Prime可以實現(xiàn)不同規(guī)格原始樣本管上機,自動化條碼掃描,試劑分裝及提取產(chǎn)物的轉(zhuǎn)移、分裝、濃度均一化等操作,還可以自動化構(gòu)建PCR反應(yīng)體系??刹⑿刑幚?塊96孔板,是一款真正高通量無人值守的全自動化核酸提取設(shè)備。

儀器與配套提取試劑盒信息

 

另外,PerkinElmer自動化機器人整合系統(tǒng)(ARS),可整合存儲板棧、JANUS G3液體處理工作站、chemagic 360自動核酸提取儀、封膜機以及主流熒光定量PCR儀,實現(xiàn)樣本從原始管上樣、核酸提取到RT-PCR檢測全流程的無人值守式自動化檢測方案,通量更高,有效提高樣本檢測效率,保護實驗人員免于感染風(fēng)險。

 

自動化機器人整合系統(tǒng)(ARS

全力支持各地的公共衛(wèi)生、YL部門及科研院校使用核酸提取技術(shù)是珀金埃爾默積極抗擊新冠肺炎疫情的承諾。我們將時刻做好準(zhǔn)備,與疫情抗?fàn)帲A得這場新冠戰(zhàn)“疫”。


2020-02-13 15:33:40 1077 0
戰(zhàn)“疫”直播 | 新冠診斷金標(biāo)準(zhǔn)之核酸熒光定量PCR檢測

2020-03-16 10:11:41 317 0
新冠病毒檢測中的氣溶膠危機

伴隨本次新型冠狀病毒肺炎疫情,諸如“體外膜肺氧合(ECMO)”、“肺部磨玻璃影”、“糞口傳播”等專業(yè)名詞不斷出現(xiàn)在大眾視野。


其中,“氣溶膠”一詞在Z初的新聞報道中就被提及,在《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第六版)》對傳播途徑的描述中,也增加了“在相對封閉的環(huán)境中長時間暴露于高濃度氣溶膠情況下存在經(jīng)氣溶膠傳播的可能”。


其實,普通大眾一般不會接觸到上述高濃度氣溶膠從而被病毒感染,但對目前Z主要的確診手段—核酸檢測來說,檢測人員是除一線醫(yī)務(wù)人員以外Z有可能因為氣溶膠而感染的群體。


那么,氣溶膠到底是什么?在檢測實驗中會存在哪些危險?怎么來降低氣溶膠引起的感染風(fēng)險呢?


氣溶膠,從廣義來說是由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系。在生物實驗中可以認(rèn)為是在外力作用下空氣與液體樣品的液面摩擦,樣品的分散體系向空氣中擴散形成分散體系。


可以引起氣溶膠的操作有離心、劇烈振蕩反應(yīng)管、PCR開蓋、移液器反復(fù)吸液等,分子實驗中常發(fā)生的核酸污染假陽性,大多都是由氣溶膠污染引起的。

核酸檢測和同源測序是本次新冠肺炎確診的兩種主要方式,不斷送入檢驗實驗室的患者樣本會進行核酸提取和熒光定量PCR或測序,這些實驗操作都是基于分子水平的,因此核酸污染也有可能發(fā)生。

檢測過程中產(chǎn)生的氣溶膠可能會帶來如下風(fēng)險:

·引起樣本間交叉污染造成假陽性,導(dǎo)致原本沒感染的人被誤確診

·帶有病毒的氣溶膠擴散到實驗室中,威脅到實驗人員的安全,并可能造成整個實驗室污染

·因此,除了要求在P2實驗室、人員采用三級生物安全防護等,操作中盡量避免氣溶膠的產(chǎn)生可以很大程度上減少上述風(fēng)險的發(fā)生。


一些實驗室已經(jīng)采取措施方式來減少氣溶膠的產(chǎn)生,如離心后靜置、在生物安全柜中開蓋、開蓋后再靜置、非必須混勻操作關(guān)閉儀器混勻功能、選用不需開蓋的分析儀器等。


對于檢測實驗中頻繁進行的移液步驟,使用濾芯吸頭可以有效防止氣溶膠進入移液器和擴散,減少移液過程中的氣溶膠風(fēng)險。


我們可以看到,使用普通吸頭時,氣溶膠伴隨吸液操作進入移液器內(nèi)部,移液器被污染。使用該移液器繼續(xù)吸取下一個樣品,就會造成樣品間的交叉污染。使用被污染移液器進行檢測試劑配制時會造成試劑污染,從而污染整個實驗體系。如果因為操作不當(dāng)造成氣溶膠擴散,還會使病毒在實驗室中擴散,進而威脅實驗人員安全,整個實驗室也將面臨短時關(guān)閉來清除污染,這對檢驗需求巨大的地方來說并不是好消息。


如果使用濾芯吸頭,氣溶膠可以有效地被阻擋在濾芯下方,無法通過濾芯進入移液器,從而減少氣溶膠帶來的風(fēng)險。

其實,一般的分子實驗中都應(yīng)該盡量選用濾芯吸頭來降低氣溶膠造成的污染風(fēng)險,從而減少因污染帶來的不必要花費,甚至面臨實驗室關(guān)閉的后果。對于包括本次新冠病毒在內(nèi)的一些致病微生物的分子水平實驗,濾芯吸頭更能起到保護實驗人員安全的作用。


梅特勒-托利多瑞寧(RAININ)擁有全面的移液解決方案,其濾芯吸頭產(chǎn)品:

·濾芯采用純聚乙烯燒結(jié),可有效防止氣溶膠污染

·吸頭生產(chǎn)過程全自動化,濾芯安裝和吸頭裝盒均由機器完成,全程無人員接觸

·無DNA/NDase/RNase/熱原/ATP/PCRYZ劑/蛋白質(zhì)/蛋白酶等外源生物污染物

·多種包裝的盒裝濾芯吸頭,可滿足不同實驗的操作需求

盒裝濾芯吸頭

雙盒裝濾芯吸頭

單盒環(huán)保補充裝濾芯吸頭

環(huán)保盒裝濾芯吸頭

瑞寧(RAININ)通用濾芯吸頭可匹配市面上主流移液器,目前正在進行買10贈1的優(yōu)惠促銷活動,有興趣的小伙伴可以聯(lián)系當(dāng)?shù)劁N售或經(jīng)銷商,或撥打客服熱線 4008-878-788咨詢。


2020-03-13 18:42:34 581 0
來吧,展示 | 新冠病毒高通量自動化檢測解決方案,explorer G3系統(tǒng)幫您實現(xiàn)

針對新冠病毒核酸檢測和抗體檢測,珀金埃爾默(PerkinElmer)提供全流程整體解決方案,包括試劑、儀器和耗材。模塊化設(shè)計、可擴展升級的explorer G3自動化整合系統(tǒng),每天可處理10000人份樣品,以及可靠的珀金埃爾默的試劑及耗材提供,可以全天候zui大限度地提高您實驗室的新冠病毒檢測能力。

explorer G3全自動化整合系統(tǒng)通過自動化和標(biāo)準(zhǔn)化不同地工作流步驟,提高了實驗室效率,同時避免了錯誤并減少了勞動力需求。explorer G3全自動化整合系統(tǒng)根據(jù)工作量和人員情況,提供不同程度地自動化解決方案。由于新型冠狀病毒在世界范圍內(nèi)的大流行且性質(zhì)快速變化,實驗人員很難預(yù)測下一步的測試需求。explorer自動化整合系統(tǒng)的可擴展和模塊化特性使它們非常適合這樣的情況,確保隨著需求的變化,自動化解決方案也可隨之變化。

在“執(zhí)行”完大批量新冠檢測的任務(wù)后,您的explorer G3全自動化整合系統(tǒng)可用于其它實驗流程。珀金埃爾默基于測試、通量和人員需求的優(yōu)化完整工作流程(包括試劑、儀器和耗材)方面,擁有超過20年的專業(yè)經(jīng)驗。

接下來,我們將為您展示一些針對新冠病毒核酸和抗體測試自動化優(yōu)化的explorer G3全自動化整合系統(tǒng)的案例:

01新冠病毒核酸檢測自動化整合系統(tǒng)

 

系統(tǒng)1

 

系統(tǒng)2

端到端的高通量explorer? G3全自動化整合系統(tǒng),用于新冠病毒RT-PCR檢測、日檢測量可達(dá)10000人份。

這套全自動化的explorer? G3整合系統(tǒng)(系統(tǒng)1)為新冠病毒核酸檢測提供了一個無人值守、高通量全流程自動化的解決方案。采用3臺珀金埃爾默的chemagic 360高通量核酸提取儀(three PerkinElmer chemagic? 360 extractors.)進行病毒RNA提取,1臺JANUS自動化移液工作站(JANUS? G3 PCR workstation)進行QPCR體系構(gòu)建(SARS-CoV-2 RT-PCR tests),通過整合的2臺RT-qPCR儀進行在線樣品檢測分析。

系統(tǒng)配置

●這套系統(tǒng)是設(shè)計用來與JANUS G3原始樣品分裝工作站(JANUS? G3 Primary Sample reformatter)配套使用

●3臺chemagic 360高通量核酸提取儀平行運轉(zhuǎn),基于聚乙烯醇磁珠技術(shù)和自帶旋轉(zhuǎn)混勻功能的電磁鐵磁棒技術(shù)

●整合BioTek? MultiFlo? FX快速分液器

●自動化微孔板棧,隨機存取輸入的微孔板載架

●整合JANUS? G3 PCR體系構(gòu)建工作站,用于RT-PCR微孔板體系構(gòu)建

●通量:~10,000個樣品/24小時

●無人值守處理:系統(tǒng)能夠處理多達(dá)1900個樣本而不需要用戶介入

●設(shè)計為每周7天、每天24小時的全天候運行

●專用廢棄物處理解決方案

●提供硬件和試劑盒

●還有僅配備2臺chemagic 360核酸提取儀的較小整合系統(tǒng)方案(系統(tǒng)2)

●通量:~7,000個樣品/24小時

●無人值守,按需處理

02新冠病毒RNA提取和PCR微孔板制備:

 

explorer自動化整合系統(tǒng)

這套explorer G3全自動化整合系統(tǒng)提供無人值守自動化新冠病毒核酸提取和RT-PCR體系構(gòu)建微孔板的制備。然后離線進行RT-PCR擴增及檢測。

系統(tǒng)配置

整合2臺JANUS G3自動化液體處理工作站(JANUS? liquid handling workstations ),用于自動化樣品管到微孔板的樣品轉(zhuǎn)移、磁珠和試劑添加、以及PCR反應(yīng)體系微孔板制備

整合2臺chemagic360自動化核酸提取儀(chemagic? 360 extractors)

自動化微孔板封膜機

自動化微孔板儲板棧和隨機存取輸入的微孔板載架

通量高達(dá)每天10,000人份(僅核酸提取)

根據(jù)操作需求,操作員提供新的樣品管后,系統(tǒng)可持續(xù)處理運行

專用廢棄物處理解決方案

03新冠病毒抗體檢測自動化整合系統(tǒng)

 

高通量新冠病毒ELISA血清學(xué)檢測系統(tǒng):explorer? G3全自動化整合系統(tǒng)

explorer? G3全自動化整合系統(tǒng)提供基于新冠病毒ELISA血清學(xué)檢測無人值守自動化檢測。

系統(tǒng)配置

整合JANUS? G3自動化液體處理工作站

整合BioTek? 洗板機

多通道分液器

整合PerkinElmer EnVision? 高通量檢測酶標(biāo)儀

隨機存取輸入的儲板架

微孔板儲板棧和微孔板培養(yǎng)箱

通量:基于具體實驗流程會有不同

 

中等通量新冠病毒ELISA血清學(xué)檢測系統(tǒng):explorer? G3全自動化整合系統(tǒng)

explorer? G3全自動化整合系統(tǒng),提供無人值守的基于ELISA血清學(xué)檢測的自動化檢測。

系統(tǒng)配置

整合JANUS? G3自動化液體處理工作站,并整合PlateStak? 儲板棧

整合BioTek? EL406洗板分液機

整合Victor? Nivo? 多標(biāo)記檢測分析儀(酶標(biāo)儀)

隨機存取輸入的耗材擺放載架

通量:基于具體不同實驗流程會有所不同

 

臺式explorer? G3全自動化整合系統(tǒng),新冠病毒ELISA血清學(xué)檢測

這套臺式explorer? G3自動化整合系統(tǒng),提供無人值守自動化新冠病毒ELISA血清學(xué)檢測。

系統(tǒng)配置

根據(jù)工作流程,確定整合Zephyr? G3液體處理工作站或 JANUS? G3液體處理工作站

整合 BioTek? EL406洗板分液機

整合INHECO? MP微孔板孵育器

整合Victor? Nivo?多標(biāo)記檢測儀(或其它類似酶標(biāo)儀)

隨機存取輸入的耗材擺放載架

關(guān)于我們的機器人工作流程自動化解決方案,我們的使命是為客戶提供量身定制的解決方案,以滿足您的確切需求。上面描述的整合系統(tǒng)是部分應(yīng)用示例。我們的銷售和應(yīng)用支持專家可根據(jù)您的應(yīng)用需求,與您進行深入溝通交流,進行定制化的設(shè)計,以滿足您的確切應(yīng)用需求。

僅供科研,不用于診斷。

了解更多應(yīng)用資料和產(chǎn)品信息,掃描下方二維碼,獲取珀金埃爾默explorer G3相關(guān)資料,還可獲得精美禮物。(從所有參與者中隨機抽取)

 

掃描參與調(diào)研:

 


2020-09-18 13:46:00 617 0
“新冠病毒與顆?!庇懻撝鹿诓《疽呙缪邪l(fā)中顆粒的作用

       對于戰(zhàn)勝新冠病毒疫情,除了ZL以外就是預(yù)防。研制有效的疫苗就是Z佳的預(yù)防形式。疫苗是將病毒或者相關(guān)成分,經(jīng)過人工減毒、滅活或者基因技術(shù)處理后打入人的體內(nèi),這些“有害成分”本身不會在體內(nèi)大量繁殖或者造成傷害,但會激發(fā)人的免疫反應(yīng)并形成記憶,一旦有真的病毒入侵,免疫系統(tǒng)就會迅速識別并展開“圍剿”,從而達(dá)到預(yù)防的目的。

       在疫苗中有大量的“顆粒”。比如說病毒本身就是一個個小的顆粒,直徑大約在幾十到幾百納米之間,這些病毒顆??梢酝ㄟ^電鏡直接觀察。研制疫苗需要對大量病毒進行培養(yǎng)和控制,病毒顆粒大小和粒度分布可以采用動態(tài)光散射的方法進行測試和評估。

       很多時候,我們還需要使用佐劑來提高疫苗的免疫效果,換句話說,疫苗是佐劑和病毒抗原的結(jié)合物,這樣可以大大提高疫苗的保護效力和持續(xù)時間。比如超細(xì)氫氧化鋁就是常用的疫苗佐劑,它的顆粒大小對于疫苗制劑工藝和產(chǎn)品質(zhì)量有顯著影響,包括影響制劑均勻性、佐劑跟病毒抗原的吸附作用等。

       隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展,人們對疫苗及免疫的認(rèn)識也不斷深入。當(dāng)病毒進入體內(nèi)時,引起特異性的免疫反應(yīng)并不是整個病毒,而是病毒表面某些特異性的抗原(蛋白、多肽等結(jié)構(gòu)),因此在制備疫苗的時候,就可以只保留對免疫有作用的成分,而把所有無關(guān)甚至有害的成分全部去除。對于一些特異性的抗原,我們可以通過基因工程的方式去“合成”表達(dá)獲?。ū热鐏唵挝灰呙?、基因工程疫苗、合成肽疫苗),提高疫苗的多樣性和可行性。而在這個過程中,我們就需要對大量的抗原、抗體甚至多肽進行處理,這些顆粒粒徑跨度比較大,比如抗原、抗體等蛋白一般粒徑在幾十到幾百納米,而一些分子量小的多肽可能粒徑只有幾個納米。這些都可通過激光粒度儀或動態(tài)光散射納米粒度儀來表征。

       在病毒的防護、診斷和ZL過程中,很多都與“顆?!焙汀按笮 泵芮邢嚓P(guān),因此可通過顆粒學(xué)的方法“監(jiān)視”病毒、蛋白、多肽、佐劑等等,為戰(zhàn)勝病毒助上一臂之力。只要各行各業(yè)共同努力,就能早日戰(zhàn)勝病毒,還“山河無恙,人間太平”!


2020-02-22 14:54:19 473 0
Cole-Parmer為新冠病毒核酸檢測助力

       2019年12月底武漢發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎以來,感染確診病例和疑似病例數(shù)量仍在不斷上升,疑似病例的快速確診迫在眉睫。目前臨床上確診新型冠狀病毒肺炎病例,Z通用的方式仍然是在臨床觀察的基礎(chǔ)上,采集痰液、咽拭子等呼吸道標(biāo)本進行病毒核酸基因檢測,并作出病原學(xué)診斷。目前核酸檢測的準(zhǔn)確性問題牽動了很多人的心,除去該病毒的一些特有特征外,檢測過程中的每一個環(huán)節(jié)涉及的科學(xué)儀器和操作步驟都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。

       目前新冠狀病毒核酸檢測主要通過PCR檢測的方法,其對試驗場地、檢驗儀器及操作人員的要求都非常高,輕微的污染就可能對結(jié)果造成偏差。另外,對檢測樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴(yán)苛的要求。并且,由于新冠狀病毒的傳染危險性,防護準(zhǔn)備和后續(xù)的消毒處理對整個檢測實驗來說也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商,可以為新冠狀病毒核酸檢測提供從防護,采樣,樣本保存,檢測,消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信jing準(zhǔn)可靠的儀器設(shè)備及防護消毒產(chǎn)品一定能為這場戰(zhàn)役中的檢測工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)!

Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單*手套還有病毒防護丁 腈系列可選

       以下是新冠病毒核算檢測實驗的具體標(biāo)準(zhǔn)介紹,可供各位老師參考,其中涉及的儀器設(shè)備和耗材,疫情期間歡迎在微信平臺直接聯(lián)系我們,或者直接聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。

新冠病毒核酸檢測實驗

diyi步:樣本采集

       通常是在采集地——定點發(fā)熱門診進行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其陽性率非常高)

       在采集過程中,Cole-Parmer可為您提供防護服,護目鏡,鞋套,以及手套等防護用品。

第二步、樣本的包裝、保存與運輸

       通常采樣管需經(jīng)過3層包裝,即:自封袋+運輸罐+專用運輸箱。在2-4℃進行保存,(通常保存不能超過72小時),再通過UN2814感染性物質(zhì)專用運輸箱,由經(jīng)過生物安全培訓(xùn)的專人,全身著防護用品運送轉(zhuǎn)運箱。

第三步、樣本的核酸檢測

  • 實驗地點:基因擴增實驗室

  • 實驗條件:二級生物安全實驗室(P2負(fù)壓實驗室)

  • 防護準(zhǔn)備:檢測人員需進行三級防護的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、醫(yī)用N95口罩、一次性防護服、一次性鞋套、一次性防水靴套、護目鏡和雙層乳膠手套。如有條件可加穿一次性隔離衣。                       

  • 檢測步驟:準(zhǔn)備工作,核酸提取(手動),基因擴增與檢測,結(jié)果分析     

1.準(zhǔn)備工作

       實驗儀器設(shè)備:二級生物安全柜,水浴或烘箱,移液器

       首先檢查運輸罐是否嚴(yán)格密閉,然后取出罐內(nèi)的密封袋進行56℃下30分鐘的消毒滅活,滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對采集的樣品進行分裝、混勻。

       整個過程應(yīng)在二級生物安全柜內(nèi)進行,滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進出安全柜內(nèi)的次數(shù)。

2.核酸提?。ㄊ謩樱?/strong>

       實驗儀器設(shè)備:二級生物安全柜,移液器,振蕩器,金屬加熱器,微型離心機

       首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進行裂解液的配置。然后,采用化學(xué)試劑法對核酸樣本進行裂解,樣品裂解前需經(jīng)過充分的振蕩混勻,如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過多次離心完成裂解產(chǎn)物的過濾收集。Z后利用離心純化法對裂解后的核酸進行洗滌與回收。

3.基因擴增與檢測

       實驗儀器設(shè)備:生物安全柜,PCR板離心機,實時熒光定量PCR儀

       首先,需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的體積量進行配置,并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個PCR反應(yīng)管中,加蓋密閉后進行充分的混勻、離心。Z后,將PCR反應(yīng)管置于實時熒光定量PCR儀中,按照試劑盒說明書的要求進行擴增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測。

4.結(jié)果分析

       Z后,通過計算出的CT值,依據(jù)檢測試劑盒廠家說明書的判斷標(biāo)準(zhǔn)進行判定,陽性、陰性或者不確定。

第四步、未測樣品的保存

       如樣本未能及時檢測,需將樣本于-70℃或以下進行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。

第五步、消毒處理

       生物安全柜內(nèi):對臺面、儀器、外層手套進行消毒,相關(guān)垃圾投入專用YL垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜,時長應(yīng)不低于30分鐘。

       核酸檢測實驗室內(nèi):對實驗室臺面、地面進行消毒,并開啟紫外照射燈進行空間消毒,時長應(yīng)不低于30分鐘。

       實驗人員:按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級防護穿戴,并置于專用YL垃圾桶內(nèi)。

       YL垃圾:所有與新型冠狀病毒相關(guān)的YL垃圾需經(jīng)過濕熱高壓滅菌(121℃,30分鐘)后再作為普通的YL垃圾處理,且垃圾袋上應(yīng)標(biāo)注新型冠狀病毒YL垃圾的相關(guān)信息。


        注意:實驗試劑、設(shè)備等需取得YL器械注冊證,科學(xué)研究除外。



2020-02-17 09:46:59 561 0
怎么從病毒中提取RNA核酸
 
2017-01-24 23:11:43 356 1
病毒核酸的提取需要注意哪些?
 
2010-06-10 03:25:13 750 1
病毒保存液快速找到隱藏的新冠病毒

當(dāng)疫情再一次伺機而動時,要想快速的控制病毒的傳播,做核酸檢測就成了必經(jīng)之路,同時也備受各界關(guān)注。但影響核酸檢測結(jié)果的因素是多種多樣的,包括樣本采集部位、采集方式、儲運過程、核酸提取操作等等。其中,樣本的穩(wěn)定性是一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如何能使病毒快速失活,又能保護病毒核酸不被降解,維持檢測穩(wěn)定性的病毒樣本保存液就成了重中之重。

第yi步:打破外殼,消滅“戰(zhàn)斗力”

和其他RNA病毒一樣,新冠病毒的結(jié)果簡單來說,是由蛋白質(zhì)外殼包裹著單鏈核酸——RNA構(gòu)成的。我們可以簡單地將病毒的RNA視為發(fā)號施令的“大腦”,蛋白質(zhì)則是執(zhí)行命令的“四肢”。新冠病毒感染人體并發(fā)生繁殖活動,引發(fā)病癥,這個過程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白結(jié)構(gòu)完成。

滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一種強有力的蛋白質(zhì)變性劑,能迅速溶解蛋白質(zhì),導(dǎo)致病毒結(jié)構(gòu)破碎。當(dāng)帶有新冠病毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病毒受裂解液作用,蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復(fù)原的。這時候,病毒就失去了作惡的“爪牙”,不再擁有對人的感染能力,從而保障了樣本運輸、處理過程中接觸者的安全。

第二步:抑zhi酶活,押送“身份證”

外殼裂解后,新冠病毒的RNA游離在保存液當(dāng)中。作為單鏈大分子,RNA的穩(wěn)定性不像雙鏈的DNA那樣巋然不動,在自然環(huán)境中隨處存在的RNA酶便是使RNA水解斷裂的罪魁禍?zhǔn)?。因此,通常認(rèn)為失去外殼保護的病毒RNA是脆弱、不穩(wěn)定的,需要低溫儲存才能保證它的完整性。

第三步:配合提取,確認(rèn)“真兇”

病毒RNA妥善地儲存在病毒樣本保存液中,在進行檢測前,還需要zui后一個步驟:將保存液中的RNA捕捉、濃縮,作為zui終樣本加入實時熒光PCR體系中,上機進行檢測。

德晟生產(chǎn)的病毒保存液除了滅活型病毒保存液外,還有非滅活型病毒保存液。它是同時保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時也有一定的感染性風(fēng)險。采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫。不管是哪種病毒保存液,我們在使用時都需要按照要求嚴(yán)格操作、存放或運輸。


2021-08-12 11:13:08 539 0
新冠病毒或?qū)⒄T發(fā)“癡呆癥浪潮”

      一項發(fā)表在Journal of Neurophysiology上,題為“COVID-19 and olfactory dysfunction: a looming wave of dementia?”的評論表示,新冠感染所導(dǎo)致的嗅覺喪失或許會增加感染者晚年患上癡呆癥的風(fēng)險,或會因此導(dǎo)致未來出現(xiàn) “癡呆癥浪潮”!

 

圖1 評論截圖

      嗅覺喪失是新冠病毒感染的標(biāo)志性癥狀之一,約有77-85%的感染者因新冠病毒而出現(xiàn)嗅覺喪失或嗅覺異常,大部分人會很快恢復(fù),但是會有一部分人經(jīng)歷持續(xù)性嗅覺喪失或嗅覺異常。既往有研究表明,新冠感染者的嗅覺上皮(位于鼻子上部,靠近嗅覺神經(jīng)進入大腦嗅球的位置)中攜帶高病毒載量。

      而嗅球是大腦中管理嗅覺并將感覺信息發(fā)送到大腦其他區(qū)域進行處理的結(jié)構(gòu),這些大腦區(qū)域與學(xué)習(xí)、記憶和情感有關(guān),正如評論作者Leslie M.Kay博士所說:“所有這一切都意味著嗅球所關(guān)涉的遠(yuǎn)不止嗅覺,它還涉及記憶、環(huán)境、情感以及其他許多過程”。也正因為如此,新冠病毒影響的也不只嗅覺障礙,很有可能會影響人的相關(guān)認(rèn)知功能,由于嗅覺上皮細(xì)胞靠近嗅球,即使在康復(fù)后,新冠感染也可能會影響認(rèn)知功能。

阿根廷的研究人員與阿爾茨海默癥協(xié)會聯(lián)盟合作研究了新冠感染導(dǎo)致的慢性神經(jīng)精神后遺癥,他們對766名年齡在55歲***95歲的人群進行了一年的跟蹤調(diào)查,對他們進行了一系列的身體、認(rèn)知、神經(jīng)、嗅覺等功能測試。研究人員發(fā)現(xiàn),新冠導(dǎo)致的持續(xù)性嗅覺喪失是認(rèn)知障礙的一個重要預(yù)測因素。

      評論作者表示:“以前的流行病也支持這樣的理論,即病毒入侵神經(jīng)系統(tǒng)可能是神經(jīng)退行性病變的觸發(fā)因素,導(dǎo)致神經(jīng)功能受損。該審查提供的證據(jù)表明,通過新冠病毒感染和免疫反應(yīng)引入嗅覺神經(jīng)的炎癥和對嗅球的損害也可能導(dǎo)致與嗅覺系統(tǒng)相關(guān)的大腦結(jié)構(gòu)退化和認(rèn)知障礙”。

      新冠病毒感染對神經(jīng)系統(tǒng)健康的影響越來越明顯,休斯頓衛(wèi)理公會的研究人員的一項***新研究發(fā)現(xiàn),新冠病毒可使人們易患不可逆轉(zhuǎn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,加速大腦老化,并增加中風(fēng)和腦出血的風(fēng)險。這項研究發(fā)表在Ageing Research Reviews上,題為“SARS-CoV-2 and the central nervous system: Emerging insights into hemorrhage-associated neurological consequences and therapeutic considerations”,研究表明,新冠感染會增加個體罹患神經(jīng)系統(tǒng)疾病、中風(fēng)、持續(xù)性腦損傷的幾率。

 

圖2 研究成果(圖源:[2])

研究表明:

■ 血腦屏障的主要成分、星形膠質(zhì)細(xì)胞和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞能夠表達(dá)ACE2受體,其與SARS-CoV-2結(jié)合并緊密連接,導(dǎo)致神經(jīng)炎癥增加;

■ 脈絡(luò)叢細(xì)胞中的SARS-CoV-2感染可能影響人腦中的神經(jīng)干細(xì)胞生態(tài)位,導(dǎo)致長期的神經(jīng)病理學(xué)并發(fā)癥;

■ 新冠感染者死后,其大腦中活化的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞亞群類似于AD等神經(jīng)退行性疾病的病理特征。

      研究人員推測,新冠病毒感染可以刺激許多致病機制的激活,進而導(dǎo)致新冠感染者出現(xiàn)復(fù)雜形式的神經(jīng)退行性疾病。

 

圖3 新冠感染引起的大腦微出血及其潛在后果(圖源:[2])

此外,研究還表明:

■ 感染新冠病毒之后,感染者可能會出現(xiàn)慢性心血管異常,這或許是由于腦干和延髓區(qū)域的微出血相關(guān)神經(jīng)元損傷而導(dǎo)致的;

■ 凝血通路的過度激活導(dǎo)致15-30%對抗凝和抗預(yù)防無反應(yīng)的患者出現(xiàn)靜脈血栓栓塞和血栓形成;

■ 新冠感染可能導(dǎo)致涉及腦內(nèi)皮細(xì)胞和微血管系統(tǒng)的CNS微血栓栓塞事件;

■ 微出血是大腦衰老的預(yù)測因子,形成大量微出血可能表明新冠患者的大腦加速老化;

■ 微出血在病理上與神經(jīng)退行性病變、認(rèn)知障礙和癡呆有關(guān)。

      綜上,研究表明,新冠感染引起的關(guān)鍵大腦區(qū)域微出血有可能加速感染者的大腦衰老,還可能導(dǎo)致復(fù)雜且不可逆轉(zhuǎn)的神經(jīng)退行性疾病,這是認(rèn)知和運動功能的危險因素。

     片段篩選磁珠作為高通量測序中的關(guān)鍵原料,是影響整體實驗結(jié)果的重要部分。如何對片段篩選磁珠進行穩(wěn)定性的規(guī)?;a(chǎn),也是各類磁珠廠商要面臨的問題。洛陽吉恩特生物科技有限公司作為生物磁珠的生產(chǎn)廠家,對片段篩選磁珠的關(guān)鍵工藝進行長期、大量的優(yōu)化,通過在實際應(yīng)用場景中的反復(fù)測試,目的片段篩選準(zhǔn)確,尤其對于200-500bp的片段,篩選效果良好穩(wěn)定,并且磁珠的磁響應(yīng)速度快,可以在較短的時間內(nèi)完成實驗,篩選結(jié)果可直接進行下游環(huán)節(jié)。


2022-09-01 09:08:09 242 0