?  什么是活細(xì)胞成像？  

活細(xì)胞成像(live cell imaging)統(tǒng)稱為捕捉活的、活動(dòng)狀態(tài)的細(xì)胞圖像的技術(shù)，這些細(xì)胞圖像可以是單個(gè)靜態(tài)圖像，也可以是延時(shí)系列圖像。相應(yīng)地，活細(xì)胞成像的應(yīng)用可以分為兩大類：

? 細(xì)胞在自然狀態(tài)下的圖像記錄。

? 實(shí)時(shí)觀察和記錄細(xì)胞、組織或整個(gè)生物體的動(dòng)態(tài)過程。

?  觀察分析活細(xì)胞時(shí)面臨的挑戰(zhàn)  

? 在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)采集大量信息。

? 要保持細(xì)胞保存在可調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境氣體濃度和溫度（在很多情況下）的培養(yǎng)室中。

? 激發(fā)光源會(huì)損害活細(xì)胞。

? 細(xì)胞焦面漂移，無法聚焦。

? 需要使用配備有軟件或硬件控制自動(dòng)對(duì)焦的成像儀器來避免這種情況。

Revolution全自動(dòng)顯微鏡成像系統(tǒng)

Revolution全自動(dòng)顯微鏡成像系統(tǒng)部件高度集成內(nèi)置，節(jié)省空間，避免繁瑣調(diào)試及維護(hù)；觸屏式操控觀察工作站，界面直觀簡(jiǎn)潔，易于學(xué)習(xí)，方便使用。Revolution全自動(dòng)顯微鏡成像系統(tǒng)的光源采用高能LED光源，自動(dòng)熒光切換把光毒降低。

▌智能化全自動(dòng)多功能系統(tǒng)：

? TimeLapse延時(shí)攝影：可以根據(jù)設(shè)定在特定時(shí)間內(nèi)完成特定間隔時(shí)間和特定的拍照張數(shù)。

? 獨(dú)有的Hyperscan快速成像：30幀高速成像，可以在幾秒鐘內(nèi)完成上百?gòu)堈掌牟杉?/p>

? Multi-well Point孔板導(dǎo)航成像：不限定孔位大小，只需輸入?yún)?shù)就可以自動(dòng)完成多孔或單孔采集。

? Focus Map自定義多點(diǎn)聚焦：可以自動(dòng)完成不同層面的自動(dòng)聚焦。

? Z-Stacking多層掃描大景深成像：完成多層面大景深成像。

? DHR智能實(shí)時(shí)數(shù)字化降噪：實(shí)時(shí)完成反卷積計(jì)算，得到清晰圖像。

▌ECHO INCUBATOR為活細(xì)胞觀察提供一個(gè)穩(wěn)定而靈活的培養(yǎng)環(huán)境

ECHO INCUBATOR采用緊湊的一體式設(shè)計(jì)，方便用戶快速安裝和拆卸。箱體結(jié)構(gòu)透明和大型前置開門設(shè)計(jì)，可為用戶提供清晰的觀察視野并方便操作樣本。采用無風(fēng)扇對(duì)流加熱和循環(huán)熱空氣方案，在消除振動(dòng)的同時(shí)并可防止外部灰塵進(jìn)入您的樣品和儀器光學(xué)元件。提供穩(wěn)定的細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境，確保適合的細(xì)胞培養(yǎng)條件，使細(xì)胞處于zuijia生長(zhǎng)狀態(tài)。

　　細(xì)胞生物學(xué)是生命科學(xué)的一門學(xué)科。顧名思義，它致力于研究生物。單憑這一事實(shí)就足以成為研究細(xì)胞自然生存狀態(tài)的理由。當(dāng)然，活細(xì)胞成像還有其他深層次的原因。在本篇文章中，我們列舉了用延時(shí)顯微鏡研究活細(xì)胞是有意義的五大很好的理由。

　　背景

　　活細(xì)胞成像允許在一定時(shí)間內(nèi)在顯微鏡下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)觀察。各種顯微鏡技術(shù)適用于活細(xì)胞成像：例如，可以采用無標(biāo)記的技術(shù)，如相差，DIC，或干涉測(cè)量法，也可以依靠熒光顯微鏡，利用熒光標(biāo)記標(biāo)記和可視化細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)、分子或蛋白質(zhì)。當(dāng)然，活細(xì)胞成像也面臨挑戰(zhàn)，在建立活細(xì)胞圖像實(shí)驗(yàn)時(shí)需要考慮某些要求。最重要的是，必須確保顯微鏡配備了一個(gè)stage top 培養(yǎng)箱，能夠提供理想的環(huán)境，使細(xì)胞在一段時(shí)間內(nèi)保持存活和健康。

圖1.A：活細(xì)胞成像過程中需要考慮和控制的環(huán)境參數(shù)

圖1.B：倒置顯微鏡的臺(tái)頂培養(yǎng)箱示意圖

　　參數(shù)和環(huán)境條件是此類實(shí)驗(yàn)的重要部分，我們將在以后的公眾號(hào)中討論。如果您有興趣，可以在本篇文章中查看更多相關(guān)內(nèi)容。在此我們已經(jīng)介紹了基本知識(shí)，接下來我們將繼續(xù)深入探討為什么您應(yīng)該使用活細(xì)胞成像來研究您的細(xì)胞：

　　1.避免固定過程中的人工制品

　　細(xì)胞通常在顯微鏡觀察前固定（如免疫熒光），以保存在逼真的狀態(tài)。多年來，許多不同的化學(xué)和物理程序已被優(yōu)化和建立，以保持原始樣品的質(zhì)量。然而，固定過程會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損害（當(dāng)然在這個(gè)過程之后，它們會(huì)死亡），并不可逆轉(zhuǎn)地改變其組織、結(jié)構(gòu)和形態(tài)（細(xì)胞器收縮、蛋白質(zhì)定位錯(cuò)誤等）。然而，活細(xì)胞成像可以讓我們研究活細(xì)胞。這意味著他們應(yīng)該展示他們的自然形態(tài)，這仍然會(huì)受到熒光標(biāo)簽、激光等的影響，但這就像環(huán)境條件一樣，是一個(gè)不同的狀況。

　　2.觀察和分析動(dòng)態(tài)過程

　　活細(xì)胞成像使我們能夠觀察整個(gè)細(xì)胞群、單個(gè)細(xì)胞甚至亞細(xì)胞水平的動(dòng)態(tài)事件。當(dāng)固定細(xì)胞將其鎖定在特定時(shí)間點(diǎn)的特定（行為或結(jié)構(gòu)）狀態(tài)時(shí)，對(duì)活細(xì)胞的顯微鏡觀察可以洞察整個(gè)動(dòng)態(tài)過程?；诠δ苄约?xì)胞的檢測(cè)，如損傷和遷移（圖2）或趨化實(shí)驗(yàn)是活細(xì)胞成像應(yīng)用的很好的例子。這些分析使得研究細(xì)胞對(duì)化學(xué)（趨化性）或機(jī)械（傷口愈合）刺激的反應(yīng)成為可能。

圖2：使用ibidi Stage Top孵育系統(tǒng)的活細(xì)胞成像顯示了傷口愈合和遷移試驗(yàn)中MCF7細(xì)胞的間隙閉合。相差；10倍物鏡。

　　3.實(shí)時(shí)跟蹤細(xì)胞變化

　　活細(xì)胞顯微鏡是實(shí)時(shí)了解細(xì)胞隨時(shí)空變化的一種有價(jià)值的方法，而不是依賴于固定細(xì)胞的端點(diǎn)的分析結(jié)果。通過使用延時(shí)視頻顯微鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的跟蹤，可以捕捉到結(jié)構(gòu)重排的動(dòng)態(tài)(如圖3，感受趨化刺激后細(xì)胞骨架的極化), 或使用固定細(xì)胞可能會(huì)錯(cuò)過的瞬時(shí)細(xì)胞性活動(dòng)(如，有絲分裂期間的染色體分離)。

圖3：應(yīng)用趨化梯度后，表達(dá)LifeAct的原代樹突狀小鼠細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)的活細(xì)胞成像

　　4. 研究單分子動(dòng)力學(xué)、定位和相互作用

　　先進(jìn)熒光標(biāo)記和成像技術(shù)的發(fā)展，如光脫色熒光恢復(fù)技術(shù)（FRAP）、熒光壽命成像顯微技術(shù)（FLIM）和熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)（FRET），使活細(xì)胞成像過程中單分子定位、動(dòng)力學(xué)和相互作用的觀察和分析成為可能。

　　FRAP可以測(cè)量活細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記分子和蛋白質(zhì)的遷移率。FLIM通過測(cè)量附著的熒光團(tuán)的壽命來提供有關(guān)細(xì)胞分子分布及其環(huán)境的信息。

　　利用FRET，人們可以通過檢測(cè)兩個(gè)分子在納米級(jí)相互接近時(shí)所附熒光團(tuán)的相互作用來測(cè)量活細(xì)胞中兩個(gè)分子的直接相互作用。

　　5. 從單個(gè)實(shí)驗(yàn)中獲取更多信息

　　總的來說，如果您進(jìn)行活細(xì)胞成像，您可以從單個(gè)實(shí)驗(yàn)中獲得比從固定細(xì)胞成像更多的信息。這是因?yàn)榛罴?xì)胞成像使人們能夠跟蹤分子動(dòng)力學(xué)和動(dòng)力學(xué)，并提供了您感興趣的一個(gè)更大、更全面的細(xì)胞過程圖像。

　　對(duì)固定樣本的分析通常只提供某個(gè)細(xì)胞性活動(dòng)的快照，而跟蹤整個(gè)動(dòng)態(tài)過程使人們能夠從單個(gè)實(shí)驗(yàn)中測(cè)量更多參數(shù)，并得出更多不同的結(jié)論。

　　如您有興趣了解更多關(guān)于活細(xì)胞成像的知識(shí)，請(qǐng)關(guān)注我們公眾號(hào)活細(xì)胞成像應(yīng)用相關(guān)內(nèi)容。也可以向我們索要相關(guān)資料。

　　活細(xì)胞成像應(yīng)用相關(guān)內(nèi)容：

利用微流控技術(shù)在微流控芯片通道內(nèi)進(jìn)行實(shí)時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)很多生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的工作人員來講是一個(gè)重大的挑戰(zhàn)和機(jī)會(huì)，通過該技術(shù)可以大規(guī)模的降低實(shí)驗(yàn)耗材消耗，提高實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)化效率，模擬實(shí)際生物環(huán)境下的細(xì)胞生長(zhǎng)行為等。在科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中，活細(xì)胞成像的細(xì)胞培養(yǎng)都具有較大的應(yīng)用前途，那么現(xiàn)在有沒有一款或一套合適的儀器來做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)呢？答案是有的，Elveflow微流控灌注套裝（Perfusion Pack）結(jié)合ALine公司的Microslides便可以完成細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。

ADHERENT MAMMALIAN CELLS

YEASTS

WORM EMBRYOS

在許多細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，活細(xì)胞成像是一種理想的分析工具。現(xiàn)有的活細(xì)胞成像主要依賴昂貴的、難以操作的大型設(shè)備。而明美新研發(fā)的一款活細(xì)胞成像儀，小巧輕便，適合放在超凈工作臺(tái)。

活細(xì)胞成像儀是一臺(tái)適合小規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的小巧輕便成像設(shè)備，它采用WiFi相機(jī)無線連接，可以適配電腦、手機(jī)、平板等多種終端設(shè)備，標(biāo)配明場(chǎng)和相差兩種觀察方式，可選三通道LED熒光實(shí)現(xiàn)熒光觀察，可選電動(dòng)XYZ三軸實(shí)現(xiàn)自動(dòng)對(duì)焦，可選3個(gè)物鏡實(shí)現(xiàn)不同觀察需要。

活細(xì)胞成像儀作為智能活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像監(jiān)測(cè)設(shè)備，能夠幫助您優(yōu)化日常細(xì)胞培養(yǎng)工作并將成像結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化，改善下游實(shí)驗(yàn)流程。

活細(xì)胞成像儀可用于數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和圖像分析，您可以在平板電腦實(shí)時(shí)地訪問實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和查看細(xì)胞培養(yǎng)。

來源：https://www.mshot.com/article/1363.html

干涉顯微鏡能看到活細(xì)胞嗎？這一問題在生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)研究中有著廣泛的關(guān)注。干涉顯微鏡作為一種先進(jìn)的光學(xué)成像技術(shù)，其高分辨率和非侵入性特點(diǎn)使其在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。本文將探討干涉顯微鏡在觀察活細(xì)胞方面的能力，分析其工作原理、優(yōu)點(diǎn)與局限性，并討論該技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)研究中的實(shí)際應(yīng)用。通過對(duì)這一問題的深度解析，讀者將對(duì)干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的應(yīng)用有更清晰的理解。

什么是干涉顯微鏡？

干涉顯微鏡是一種通過干涉效應(yīng)增強(qiáng)樣品對(duì)比度的顯微鏡。與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡不同，干涉顯微鏡利用相干光源生成干涉圖樣，從而能更清晰地呈現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其動(dòng)態(tài)過程。它能夠在不使用染料和標(biāo)記物的情況下，通過相位對(duì)比增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)細(xì)微結(jié)構(gòu)的可視化效果。這種技術(shù)特別適合觀察生物樣品，尤其是活細(xì)胞，因?yàn)樗粫?huì)對(duì)細(xì)胞造成損傷。

干涉顯微鏡對(duì)活細(xì)胞的觀察能力

干涉顯微鏡的優(yōu)勢(shì)之一是能夠觀察到活細(xì)胞的微觀動(dòng)態(tài)變化，而無需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色或其他干擾性處理。這使得研究者可以更真實(shí)地捕捉到細(xì)胞在不同生理狀態(tài)下的行為。例如，通過干涉顯微鏡，科學(xué)家可以觀察到活細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、細(xì)胞分裂、細(xì)胞遷移等過程，而這些在傳統(tǒng)顯微鏡下很難清晰呈現(xiàn)。

干涉顯微鏡的分辨率通常可以達(dá)到納米級(jí)，能夠揭示細(xì)胞結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，進(jìn)一步提高了活細(xì)胞成像的精確性。這對(duì)于細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究具有重要意義，尤其是在研究細(xì)胞疾病、細(xì)胞等領(lǐng)域時(shí)。

干涉顯微鏡的優(yōu)勢(shì)與局限性

干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)是其非侵入性。傳統(tǒng)的顯微鏡通常需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色處理，這可能會(huì)影響細(xì)胞的正常生理活動(dòng)。而干涉顯微鏡通過不接觸樣品的方式，能夠?qū)崟r(shí)觀察細(xì)胞內(nèi)的變化而不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成直接影響。因此，這項(xiàng)技術(shù)成為了觀察活細(xì)胞、追蹤細(xì)胞動(dòng)態(tài)過程的理想工具。

干涉顯微鏡也存在一定的局限性。由于其依賴于光波干涉的原理，這就要求顯微鏡系統(tǒng)的精度非常高，尤其是對(duì)光源的控制要求十分苛刻。干涉顯微鏡更適用于透明或半透明的樣品，對(duì)于不透明或高度復(fù)雜的樣本，其成像效果可能受到一定限制。干涉顯微鏡的操作和數(shù)據(jù)分析相對(duì)復(fù)雜，要求研究者具有一定的技術(shù)背景和經(jīng)驗(yàn)。

干涉顯微鏡在生物學(xué)研究中的應(yīng)用

干涉顯微鏡在生命科學(xué)中有著廣泛的應(yīng)用。例如，在癌癥研究中，研究者利用干涉顯微鏡觀察癌細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化，探索其與正常細(xì)胞的差異。在神經(jīng)科學(xué)中，干涉顯微鏡能夠幫助科學(xué)家實(shí)時(shí)觀察神經(jīng)元的活動(dòng)和突觸的變化，為研究大腦功能和疾病提供重要線索。該技術(shù)還被廣泛用于藥物篩選、細(xì)胞藥理學(xué)研究和臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)等領(lǐng)域。

結(jié)論

干涉顯微鏡在觀察活細(xì)胞方面具備巨大的潛力和優(yōu)勢(shì)。它不僅能提供高分辨率的細(xì)胞圖像，而且不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生任何干擾或損傷。盡管在操作上有一定的技術(shù)難度和局限性，但隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和改進(jìn)，干涉顯微鏡無疑將成為生命科學(xué)領(lǐng)域研究的核心工具之一。因此，干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的應(yīng)用前景廣闊，值得繼續(xù)深入探索與應(yīng)用。

利用微流控技術(shù)在微流控芯片通道內(nèi)進(jìn)行實(shí)時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)很多生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的工作人員來講是一個(gè)重大的挑戰(zhàn)和機(jī)會(huì)，通過該技術(shù)可以大規(guī)模的降低實(shí)驗(yàn)耗材消耗，提高實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)化效率，模擬實(shí)際生物環(huán)境下的細(xì)胞生長(zhǎng)行為等。在科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中，活細(xì)胞成像的細(xì)胞培養(yǎng)都具有較大的應(yīng)用前途，那么現(xiàn)在有沒有一款或一套合適的儀器來做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)呢？答案是有的，Elveflow微流控灌注套裝（Perfusion Pack）結(jié)合ALine公司的Microslides便可以完成細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。