1、氮吹儀氮氣源應(yīng)用是怎樣的?
 

如使用量較大的話建議買一個氮氣發(fā)生器;
 

檢測某些項目時氮吹儀是*的，使用高純氮氣便可;
 

氣象的氮氣一般都是99.99%以上，氮氣使用2-3個便可。
 

2、氮吹儀的四大優(yōu)勢
 

氮吹儀也叫自動快速濃縮儀，氮氣吹干儀等。目前，氮吹儀已經(jīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
 

相對于傳統(tǒng)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，氮吹儀具有如下優(yōu)勢：
 

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在溶劑沸騰時可能會造成樣品的損失，而氮吹儀在濃縮時準確、靈敏可避免樣品損失。
 

氮吹儀可以一次性處理多個樣品，在多水平以及多因素的重復(fù)試驗中更可凸顯其優(yōu)勢。
 

氮吹儀在實驗中操作者不需要長時間的維護，可節(jié)省人力。
 

實驗操作簡潔、靈活?？梢噪S時隨地調(diào)節(jié)濃縮的進程。推薦閱讀：四大氮吹儀優(yōu)勢介紹
 

3、為了安全起見，使用氮吹儀應(yīng)注意些什么?
 

氮吹儀在同樣環(huán)境條件下，加熱媒質(zhì)的干濕、通風(fēng)櫥內(nèi)污染程度以及吹掃氣體的純度都將影響蒸發(fā)濃縮效果。
 

氮吹儀應(yīng)當在通風(fēng)櫥中使用,以保證通風(fēng)良好。
 

使用氮吹儀時,應(yīng)保護好手和眼睛。
 

不要使用酸性或堿性物質(zhì),否則將會損毀氮吹儀。
 

加熱時不應(yīng)移動氮吹儀,以防燙shang。
 

調(diào)節(jié)時應(yīng)盡量用手扶住通氣板，使其能平穩(wěn)升降，也避免由于通氣板自身重力下降導(dǎo)致試管損壞，造成不必要得損失。
 

開始通入氮氣時，應(yīng)緩慢開啟閥門，使其壓力不超過壓力表量程，防止樣品濺起，造成損失和污染，也防止損壞壓力表。
 

不將氮吹儀用于燃點低于100℃的物質(zhì)，像石油醚等的高易燃物質(zhì)不應(yīng)使用氮吹儀。
 

為防止交叉污染，氮吹儀每次使用后，應(yīng)及時清洗氣針管。

氮吹儀具體有什么用途和在哪些實驗中會用到，以及氮吹儀氮氣源應(yīng)用怎樣的？
氮吹儀的用途：
用于除去少量易揮發(fā)的液體，比如水和一些有機溶劑，在實驗室用得比較多。
氮吹儀典型的應(yīng)用是在固相萃取-氣相色譜檢測中，固相萃取取完后可用氮吹儀將洗脫液中大部分溶液吹掉，即完成了一個濃縮過程，*后便可上機進樣檢測了。
氮吹儀氮氣源應(yīng)用是怎樣的
如使用量較大的話建議買一個氮氣發(fā)生器；
檢測某些項目時氮吹儀是必不可少的，使用高純氮氣便可；
氣象的氮氣一般都是99.99%以上，氮氣使用2-3個便可。
在哪些實驗中會用到氮吹儀？
氮吹儀采用惰性氣體對加熱樣液進行吹掃，使待處理樣品迅速濃縮，達到快速分離純化的效果。該方法操作簡便，尤其可以同時處理多個樣品，大大縮短了檢測時間
氮吹儀的4大優(yōu)勢
氮吹儀也叫自動快速濃縮儀，氮氣吹干儀等。目前，氮吹儀已經(jīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。相對于傳統(tǒng)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，氮吹儀具有如下優(yōu)勢：
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在溶劑沸騰時可能會造成樣品的損失，而氮吹儀在濃縮時準確、靈敏可避免樣品損失。
氮吹儀可以一次性處理多個樣品，在多水平以及多因素的重復(fù)試驗中更可凸顯其優(yōu)勢。
氮吹儀在實驗中操作者不需要長時間的維護，可節(jié)省人力。
實驗操作簡潔、靈活?？梢噪S時隨地調(diào)節(jié)濃縮的進程。
為了安全起見，使用氮吹儀應(yīng)注意些什么？ 
- 氮吹儀在同樣環(huán)境條件下，加熱媒質(zhì)的干濕、通風(fēng)櫥內(nèi)污染程度以及吹掃氣體的純度都將影響蒸發(fā)濃縮效果。
- 氮吹儀應(yīng)當在通風(fēng)櫥中使用,以保證通風(fēng)良好。
- 使用氮吹儀時,應(yīng)保護好手和眼睛。
- 不要使用酸性或堿性物質(zhì),否則將會損毀氮吹儀。
- 加熱時不應(yīng)移動氮吹儀,以防燙傷。
- 調(diào)節(jié)時應(yīng)盡量用手扶住通氣板，使其能平穩(wěn)升降，也避免由于通氣板自身重力下降導(dǎo)致試管損壞，造成不必要得損失。
- 開始通入氮氣時，應(yīng)緩慢開啟閥門，使其壓力不超過壓力表量程，防止樣品濺起，造成損失和污染，也防止損壞壓力表。
- 不將氮吹儀用于燃點低于100℃的物質(zhì)，像石油醚等的高易燃物質(zhì)不應(yīng)使用氮吹儀。
- 為防止交叉污染，氮吹儀每次使用后，應(yīng)及時清洗氣針管。
 
氮吹儀的原理及適用范圍
原理：
氮吹儀是采用惰性氣體對加熱樣液進行吹掃，使待處理樣品迅速濃縮，達到快速分離純化的效果。其方法操作簡單，尤其可以同時處理多個樣品，大大縮短了檢測時間。用于除去少量易揮發(fā)的液體，比如水和一些有機溶劑，在實驗室用得比較多。是使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀也不夠保險的場合（溶劑會暴沸），改用氮吹儀較理想。被廣泛應(yīng)用于農(nóng)殘檢測，制藥行業(yè)、環(huán)境監(jiān)測和通用研究中的樣品批量處理。
適用范圍：
農(nóng)殘分析：如蔬菜、水果、谷物、植物組織；
環(huán)境分析：如飲引用水、地下水和污染水水樣；
食品飲料：如牛奶、酒、啤酒等；
生物分析：如血清、血漿、血液、尿液等；
商品檢驗：如檢驗克羅夫特等；
制藥藥檢：如中藥制藥等。

雜交瘤技術(shù)又稱細胞融合技術(shù)，是將兩個或多個細胞融合成一個。 融合后形成的雜交瘤細胞承襲了兩親本細胞的特征。 自發(fā)的細胞融合很少發(fā)生，當加入一種融合劑，如：聚乙二醇（常用）、仙臺病毒或溶血卵磷脂后，兩種細胞就可發(fā)生融合。 首先是質(zhì)膜互相融合，形成具有兩個或多個核的異核體，細胞進一步分裂時，核互相融合，形成了雜交細胞。

雜交瘤技術(shù)優(yōu)缺點：

優(yōu)點：與傳統(tǒng)的免疫動物方法制備抗體相比，利用雜交瘤技術(shù)可以制備出高純度的單抗，并且可以進行單克隆抗體的大量生產(chǎn)。

缺點：a.操作步驟繁瑣。b.利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)出的單克隆抗體多為鼠源性，而鼠源性抗體在應(yīng)用中有諸多問題，例如被人類免疫系統(tǒng)所識別，產(chǎn)生人抗鼠抗體( HAMA）反應(yīng)、在人體循環(huán)系統(tǒng)中很快被清除等。

雜交瘤技術(shù)應(yīng)用：

①診斷應(yīng)用：單克隆抗體在疾病診斷中發(fā)揮了重要作用，其優(yōu)點在于診斷準確且無交叉反應(yīng)，例如在乙型肝炎及潛伏的乙型肝炎病毒的診斷中，單克隆抗體能顯著減少假陰性的漏診。

②治-療載體：單克隆抗體也可作為治-療疾病的載體。通過與抗腫瘤藥物結(jié)合，單克隆抗體能在體內(nèi)選擇性集中攻擊腫瘤細胞，具有靶向性，從而減少對正常組織的損傷并減輕抗-癌藥物的副作用。因此，載藥單克隆抗體被譽為“生物導(dǎo)-彈”。

③異種蛋白質(zhì)問題：目前大多數(shù)單克隆抗體為鼠-鼠型，對于人體來說屬于異種蛋白質(zhì)，容易引起排異反應(yīng)，限制了其在治-療中的應(yīng)用。

④人-人型單克隆抗體的研究：為了解決排異問題，研究者正在努力研發(fā)人-人型單克隆抗體，以利于其在治-療中的廣泛應(yīng)用。

雜交瘤技術(shù)常見問題解析：

①電融合和PEG融合的區(qū)別？

PEG化學(xué)融合是利用聚乙二醇分子能夠改變細胞膜結(jié)構(gòu)的特性來實現(xiàn)細胞融合的過程。聚乙二醇可以使兩個細胞接觸點質(zhì)膜的脂質(zhì)分子發(fā)生疏散和重組，兩個細胞接觸部位的質(zhì)膜由于相互親和以及彼此的表面張力作用，從而發(fā)生細胞融合。電融合則是先通過高頻交流電壓，使細胞成串珠狀排列，實現(xiàn)點接觸；然后施加方波脈沖，擊穿兩個細胞接觸部位的質(zhì)膜，質(zhì)膜脂質(zhì)分子發(fā)生重組，同時由于細胞表面張力作用，完成細胞融合。電融合法比PEG融合法有明顯的優(yōu)點：細胞融合率高，有利于雜交瘤的篩選；電脈沖擊穿對細胞的損傷小，有利于融合后細胞的生長增殖；可直接觀察融合過程；便于有目的地控制選擇融合條件。

②為什么要推薦進行2~3輪有限稀釋獲得穩(wěn)定的雜交瘤細胞株？

陽性單克隆細胞的獲得通常進行至少2輪有限稀釋，原因主要考慮兩點。第一，有限稀釋過程中，大多數(shù)是通過實驗者在顯微鏡下觀察細胞團狀態(tài)來判定是否是單克隆，存在一定的主觀經(jīng)驗值，至少進行兩輪有限稀釋可以增加判斷的準確性；第二，雜交瘤細胞由兩個細胞融合而成，存在基因的不穩(wěn)定性，連續(xù)2輪有限稀釋，客觀上增加了篩選中細胞培養(yǎng)時間，有利于淘汰不穩(wěn)定的雜交瘤細胞株。

③為什么要使用核酸免疫？

重組蛋白由于免疫靶向明確、劑量可控等優(yōu)勢，通常作為動物免疫階段的首-選免疫原。但有些重組蛋白因為表達純化困難，很難大量獲得并用于動物免疫；另外，重組蛋白與天然樣本之間存在或多少的結(jié)構(gòu)差異。而核酸免疫，跳過了蛋白表達純化的過程，成功避開了蛋白生產(chǎn)的難題，通過核酸體內(nèi)表達的蛋白結(jié)構(gòu)也更加接近天然蛋白，故而可以作為重組蛋白免疫的有效補充手段。但核酸免疫的免疫劑量很難判斷，整體免疫效價也會普遍低于蛋白和多肽免疫。

④除弗氏佐劑之外，免疫佐劑還有哪些？

免疫佐劑是指那些同抗原一起或預(yù)先注入機體內(nèi)能增強機體對抗原的免疫應(yīng)答能力或改變免疫應(yīng)答類型的輔助物質(zhì)。佐劑的免疫生物學(xué)作用是增強免疫原性、增強抗體的滴度、改變抗體產(chǎn)生的類型、引起或增強遲發(fā)超敏反應(yīng)等。除經(jīng)典的弗氏佐劑外，各類不同功能的佐劑也層出不窮，比較常見的有：1）無機佐劑，如磷酸鋁佐劑、氫氧化鋁佐劑；2）生物類佐劑，如以細菌胞壁或產(chǎn)物為主要組成的佐劑；3）具有佐劑活性的細胞因子類，如GSF、IL1、IL2、IFN -γ等；4）人工合成佐劑，如cpG等。

⑤雜交瘤融合后主克隆接種96孔細胞培養(yǎng)板數(shù)量通常是多少？

融合后的主克隆細胞接種96孔細胞培養(yǎng)板的數(shù)量與融合效率和脾細胞多少有密切關(guān)系。PEG化學(xué)融合后的主克隆，通常一只小鼠的脾細胞可以接種8-15塊96孔細胞培養(yǎng)板；電融合因為融合效率大大提高，通常一只小鼠的脾細胞可以接種30~50塊96孔細胞培養(yǎng)板。

更多雜交瘤技術(shù)開發(fā)平臺詳情可以關(guān)注：https://cn.sinobiological.com/services/platform/hybridoma-development

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課程大綱與簡介

1.原子吸收分光光度計基本原理和結(jié)構(gòu)

2.火焰法中常見的問題與解決方案

3.石墨爐法中常見的問題與解決方案

課程亮點

1.出現(xiàn)進樣問題時，如何進行問題排除和解決？

2.出現(xiàn)低靈敏度、線性差，重現(xiàn)性和回收率不良等問題時應(yīng)采取哪些措施？

直播時間：3月17日  15:00-16:00

培訓(xùn)費用：免費

聽課方式：日立微學(xué)院（提交表單后掃碼進群）

為了給您帶來更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，感謝您抽出1分鐘填寫表單完善需求。

表單地址：https://jinshuju.net/f/h2e7Gt

大家好，很高興又跟大家在《濱松光電知識小課堂》（曾用名：濱松光電問答事務(wù)所）產(chǎn)品技術(shù)知識分享欄目碰面。秉持著將光電相關(guān)的產(chǎn)品技術(shù)知識掰開了，揉碎了，一點點講給大家聽的原則，本期小編選取了5個光電倍增管相關(guān)的問題，一同與大家來分享學(xué)習(xí)一下：光電倍增管后脈沖產(chǎn)生的原因、光電倍增管設(shè)計外罩時需要考慮哪些因素、光電倍增管暗電流產(chǎn)生的6種原因、如何對光電倍增管進行有效的預(yù)熱、4步自查光電倍增管裸管狀態(tài)。

光電倍增管后脈沖產(chǎn)生原因

光電倍增管的后脈沖可以分為快后脈沖和慢后脈沖兩種。快后脈沖的出現(xiàn)是由于第 一倍增級的彈性散射電子產(chǎn)生的。慢后脈沖的出現(xiàn)，主要是由于光電倍增管內(nèi)的殘留氣體因為電子碰撞而電離，其中正離子返回到光陰極面而產(chǎn)生許多光電子造成的。

光電倍增管外罩設(shè)計考慮因素

光電倍增管在設(shè)計外罩時主要考慮三種因素：光屏蔽、電場屏蔽、磁場屏蔽。

光電倍增管暗電流產(chǎn)生原因

光電倍增管產(chǎn)生暗電流的原因主要有6種：熱電子發(fā)射、漏電電流、場致發(fā)射電流、光電流、因殘留氣體電離產(chǎn)生的電流(離子反饋)、宇宙射&放射線等。

光電倍增管如何有效預(yù)熱

光電倍增管預(yù)熱主要分為兩種情況：一種是在長時間使用的情況下，預(yù)熱時間可以長一點以保證后續(xù)工作的穩(wěn)定性；另一種是在間歇工作的情況下，首次的預(yù)熱時間要長一些，使用后的預(yù)熱時間可以短一些。

光電倍增管裸管自檢方法

光電倍增管裸管的初步檢查，主要是查看4個方面：檢查光電倍增管玻璃管殼有沒有裂縫或者是破損、檢查玻璃外殼是否有污染或者指紋、檢查光電倍增管管座引腳是否有破損或者生銹、檢查光電倍增管光陰極面的顏色。

本期主講工程師介紹：濱松產(chǎn)品技術(shù)工程師馬進發(fā)，畢業(yè)于西安理工大學(xué)，目前負責(zé)濱松光電倍增管、電子倍增器、MCP等產(chǎn)品的技術(shù)支持，主要應(yīng)用方向為大氣激光雷達、質(zhì)譜等。擅長機械設(shè)計，已經(jīng)通過國內(nèi)CAXC計算機輔助認證和全 球CSWP工程師認證。

4月20日安譜實驗學(xué)堂舉辦了室內(nèi)環(huán)境檢測常見問題專 題培訓(xùn)，邀請了資 深環(huán)境檢測專家李云龍老師就五個常見室內(nèi)環(huán)境檢測問題等方面內(nèi)容開展深入而細致的講解。培訓(xùn)氛圍熱烈濃厚，直播間訪問總?cè)舜芜_1500+，收獲點贊1800+。

我們在這里也為大家整理了當天的重 點知識，快來一起看看吧~

常見問題解答（精選）

這個甲醛的方法很難做出標準要求的斜率，但是我們實際做出來的斜率，用來計算標準樣品的結(jié)果，又是符合證書要求的，這個問題應(yīng)該怎么看待？

AHMT分光光度法測甲醛，標準曲線的斜率最 好在0.169-0.181之間（0.175±3.3%），這是實驗室進行方法驗證時對靈敏度、變異系數(shù)進行驗證的必然要求，除非貴實驗室沒有進行該方法驗證，只是其一；其二，之所以你的“標樣驗證結(jié)果能符合證書要求”，是因為標準樣品的濃度一般在標準曲線的3號—5號之間，當出現(xiàn)高濃度或者近零濃度時，依據(jù)你的標準曲線一定會出現(xiàn)較大誤差，導(dǎo)致無法判定結(jié)果的正確性。建議貴實驗室認真進行方法驗證。

老師，甲醛標準只說采集后盡快分析，這個盡快分析的時間怎么理解？1小時還是24小時，謝謝！

低溫冷藏不超過48小時為宜！夏季最 好不超過24小時，發(fā)現(xiàn)超標的點位，一定要復(fù)測，復(fù)測時最 好當天采樣、當天檢測，樣品儲藏運輸溫度不高于30℃。

室內(nèi)空氣氡的檢測（閃爍室法），同一個點位進行連續(xù)的測定，結(jié)果差異比較大，測氡儀是省計量院計量合格的。請問氡這個項目，是不是不存在平行樣這個說法，就算做了平行樣，檢測結(jié)果往往也是不平行的？

室內(nèi)空氣氡的檢測不存在平行樣的說法，因為室內(nèi)空間有限，一般在60m3左右，空氣樣本有限，再考慮離墻面距離、離地高度、避開進出風(fēng)口及門窗，可以采樣的位置十分有限，不像室外大氣、車間大氣，實驗證明很難在同一個地方采到結(jié)果相近的平行樣，因此GB50325并不要求進行平行樣采集及測定。氡的檢測是同一點多周期測定，是統(tǒng)計的結(jié)果，更不存在平行樣的說法。如果想重復(fù)測定，請完成本次測定后的第二天，對這個點再次檢測，比較其結(jié)果。

用50325同時受委托要檢測三苯跟TVOC，三苯的結(jié)果能否從TVOC中提取出來？因為在50325中，三苯、TVOC采樣方法一樣，檢測器一樣，選用的色譜柱根據(jù)標準要求也可以選用相同規(guī)格的非極性柱，標準曲線也可以做成標準里面的三苯、TVOC所用的濃度點都包括在內(nèi)，采樣管也可以都選用TC管，檢測方法也可以設(shè)置成一樣的，就是檢測這兩個項目，都可以在一樣的條件下進行。這樣的話三苯是不是可以不用單獨采樣進行檢測呢？因為實際中我們發(fā)現(xiàn)，在同一個點，同時用2個TC管進行采樣，一個做TVOC，一個做三苯，單獨的三苯采樣管中的結(jié)果，跟TVOC里面的有時候會有明顯差別。

利用T-C復(fù)合管采樣，一根管子采樣、檢測，可以報出TVOC和三苯兩個結(jié)果，以減輕采樣工作量、提高檢測效率，否則干嘛要發(fā)明T-C復(fù)合管法？如果出現(xiàn)超標時，再分別用T管或C管復(fù)核，以保證結(jié)果判定的科學(xué)性、準確性！

老師，請問18883-2022附錄c里的c.1.7有寫到對二甲苯、間二甲苯和鄰二甲苯的檢出限為0.003，我們報出二甲苯的值的話，檢出限是需要相加為0.009嗎？

不能！依然為0.003，檢出限對應(yīng)的每個組份。

中間點回測的“相對偏差”怎么計算，指的是不是相對標準偏差RSD？

比如你選擇標準曲線中5這個濃度點進行回測，那么進樣7次，按照標準偏差公式進行計算即可，參照標準GBT27417-2017。

做CCV時，含氯組分如三氯乙烯氯苯等結(jié)果經(jīng)常偏低，低碳烷烴如正己烷正庚烷環(huán)己烷等結(jié)果經(jīng)常偏高，這兩類容易超出18883要求的20%范圍，想學(xué)習(xí)一下有什么好的解決方法

含氯有機化合物在FID檢測器上的響應(yīng)值偏低，是方法本身的軟肋，在現(xiàn)有方法的約束下，只能認真做好方法驗證以提高標準曲線的質(zhì)量，保障結(jié)果準確；也可以聯(lián)系儀器廠家，求得最 佳儀器條件，保障結(jié)果準確。

氡檢測數(shù)據(jù)超標怎么根據(jù)換氣次數(shù)折算？

沒有“折算”一說，如果超標，首先分析超標原因，如果是換氣次數(shù)低于0.5次/小時，那么當提高換氣次數(shù)后重新檢測，而不是“折算”。

思維導(dǎo)圖

以上為課程《室內(nèi)環(huán)境檢測的五個常見問題》思維導(dǎo)圖，想要獲取高清版資料，可后臺回復(fù)：室內(nèi)環(huán)境 獲取高清版本下載鏈接喲~

胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）是由多基因編碼、具有多種功能的超家族酶，GST廣泛存在于細菌、真菌、動物和植物體內(nèi)的一種解-毒系統(tǒng)中，其專一性催化還原型的谷胱甘肽巰基與其他化合物的親電基團，生成谷胱甘肽衍生物，具有降低化學(xué)反應(yīng)活性的效應(yīng)。在各種生物體內(nèi)，GSTs是由多個基因編碼的、具有多種功能的一組同工酶，分子量為23∽29kDa，由200∽240個氨基酸組成。有膜結(jié)合和胞液兩種形式，以胞液GSTs為主。根據(jù)蛋白酶的一級序列、免疫原性、酶動力學(xué)和三、四級結(jié)構(gòu)的性質(zhì)，GST又可以分為多個亞類。

GST標簽作用機理

1）應(yīng)用于原核表達，作為一種高度可溶的蛋白，能增加外源蛋白的可溶性，在大腸桿菌中大量表達，起到提高表達量的作用；

2）GST標簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性；

3）GST在變性條件下會失去對谷胱甘肽樹脂的結(jié)合能力，因此不能在純化緩沖液中加入強變性劑（如：鹽酸胍或尿素等）；

4）GST融合蛋白已經(jīng)成為分子生物學(xué)領(lǐng)域的基本工具，其廣泛用于研究蛋白質(zhì)-DNA及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用，也可作為抗原用于免疫學(xué)或疫苗的研究。

5）GST標簽的切除：①凝血酶：一種應(yīng)用很廣泛的蛋白酶，主要特點是經(jīng)凝血酶切割后的重組蛋白在切割位點的C端會保留兩個氨基酸殘基。凝血酶可以識別兩種類型的氨基酸序列，分別為X4-X3-P-P[K]-X1?-X2?和X2-R[K]-X1?，凝血酶對前一種序列的識別效果更為理想。②Xa因子：Xa因子是一種較高效的去除融合標簽的工具酶，可特異性識別I-E[D]-G-R-X1序列，并將融合標簽從其C末端切除。

GST標簽純化蛋白的優(yōu)劣勢：

優(yōu)勢：

1. 適用范圍廣，可在不同宿主中表達；

2. 增強外源蛋白可溶性；

3. 可用不同的蛋白酶進行去除；

4.   有助于保持蛋白的抗原性與生物活性，提高外源蛋白的穩(wěn)定性；

5.   特異性好，純化方便且溫和。

劣勢：

1.   分子量較大，可能會影響蛋白質(zhì)的功能和下游實驗；

2.   僅能純化可溶性蛋白，若蛋白不可溶，則很難用變性的方法純化。

GST標簽純化蛋白常見問題解析：

問題一：GST 融合蛋白的產(chǎn)量低或無法檢測到

1、原因：融合蛋白形成包涵體

解決方案：

①采用低溫（16∽25℃）培養(yǎng)細胞，或者誘導(dǎo)過程中降低誘導(dǎo)劑的終濃度至1mM，或者縮短誘導(dǎo)時間。

②純化前需要完全融解和復(fù)性。將裂解液與GST標簽蛋白純化瓊脂糖凝膠在搖床上輕搖2個小時或者更長時間（過夜），充分結(jié)合后上柱純化。

2、原因：融合蛋白可能失活

解決方案：采用溫和的超聲破碎條件或者其他的裂解條件，比如采用溶菌酶。

3、原因：融合蛋白被蛋白酶降解

解決方案：在裂解步驟或洗滌步驟加入適量的蛋白酶抑-制劑，如PMSF。

4、原因：融合蛋白不能有效地從樹脂上洗脫下來

解決方案：

①延長洗脫時間，或者增加洗脫液中還原性谷胱甘肽的濃度至15mM或者更高調(diào)節(jié)洗脫液的pH值至8.0∽9.0。

②在洗脫液中加入Triton X-100（終濃度0.1%）、辛基-葡萄糖苷（終濃度2%）或者NaCl（終濃度0.1∽0.2 M）。

問題二：洗脫液中有較多雜帶

1、原因：融合蛋白被蛋白酶降解

解決方案：在裂解步驟或洗滌步驟加入適量的蛋白酶抑-制劑如PMSF。

2、原因：一些宿主蛋白，比如伴侶蛋白，可能會和融合蛋白互相作用

解決方案：

在洗滌液中加入DTT（終濃度5 mM）。在純化前將重組蛋白溶液和伴侶蛋白溶液(2 mM ATP, 10mM MgSO4, 50 mM   Tris-HCl)，37℃振蕩10 min

3、原因：過度的超聲處理會導(dǎo)致一些蛋白與融合蛋白相結(jié)合

解決方案：采用溫和的超聲破碎條件或者其他的裂解條件。

4、原因：有些蛋白會與融合蛋白或樹脂發(fā)生非特異性結(jié)合

解決方案：優(yōu)化洗滌條件：加入一些洗滌劑如1%   Triton X-100、1%Tween-20、0.03%   SDS 或者0.1% NP-40 可以降低非特異性吸附。優(yōu)化洗滌液中的鹽濃度也可以降低非特異性吸附。

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1、分光光度計可應(yīng)用于哪些行業(yè)？

答：可廣泛應(yīng)用于化工、制藥、生化、冶金、輕工業(yè)、紡織、材料、環(huán)保、醫(yī)學(xué)化驗及教育等行業(yè), 是分析試驗領(lǐng)域中重要的質(zhì)量檢測儀器之一, 是常規(guī)實驗室的必備儀器。

2、在選購儀器時應(yīng)注意哪些主要指標？

答：波長范圍、波長準確度、光度準確度、雜散光、穩(wěn)定性、噪聲水平、單光束或雙光束、固定帶寬或可調(diào)帶寬。

3、海能是如何保證光路系統(tǒng)更穩(wěn)定的？

答：海能光度計系列產(chǎn)品的光路系統(tǒng)中所有的元器件都固定在加強加厚的底板上，不會因為底板的變形或外部的輕微震動而影響光路的精確性。光路系統(tǒng)中燈源、檢測器及核心部件均為原裝進口。

4、為何需要配置PC套件？

答：PC套件也被稱為電腦控制軟件或工作站，能讓用戶更為方便地操作儀器。主要方便用戶對數(shù)據(jù)的儲存以及對實驗曲線的更細致的分析?？蓪崿F(xiàn)更多附加功能。

5、PC套件都能實現(xiàn)哪些功能？

答：光度測量、定量測試、定性測試、動力學(xué)測試、多波長測試、DNA/蛋白質(zhì)測試及數(shù)據(jù)圖譜的處理。

6、單光束與雙光束有什么區(qū)別？

雙光束：不僅消除了光源引起的誤差，同時抵消了溶劑引起的誤差,抵消部分雜散光，抵消噪聲。使測試結(jié)果更加準確穩(wěn)定。

7、固定帶寬與可調(diào)帶寬有什么區(qū)別？

答：如果要用到定性分析，帶寬可調(diào)會更好。帶寬越窄，單色性越好。但是，在實際應(yīng)用中，單色性好了，光的能量變?nèi)趿耍瑴y試結(jié)果波動會變大。所以，帶寬并不是越窄越好。而是根據(jù)樣品而定，一般帶寬的選擇是隨著帶寬的變窄、吸光度不變化的Z大帶寬為Z佳測試帶寬。

8、氘燈和鎢燈更換是否方便？

答：氘燈、鎢燈更換簡單，只需將已損壞的燈摘下，裝入新的即可，無需再為調(diào)試光路而費心。

（來源：濟南海能儀器股份有限公司）

1、電位滴定儀主要應(yīng)用在哪些行業(yè)？

答：自動電位滴定儀屬于實驗室通用基礎(chǔ)設(shè)備，使用非常廣泛，可應(yīng)用在食品、藥檢、疾控、商檢、水處理、石油、化工、海洋、電力、環(huán)保、新能源、教學(xué)、科研等相關(guān)領(lǐng)域。

2、電位滴定儀主要有幾種滴定方式？

答：1、酸堿滴定 2、氧化還原滴定 3、沉淀滴定 4、絡(luò)合滴定 5、非水滴定

3、如何鑒定滴定儀的準確性？

答：通過對某種已知濃度的標準樣品進行測試，來對儀器的準確性進行鑒定。

4、電位滴定儀的實驗如何確定相關(guān)電極？

答：儀器出廠時配置了適合各種標準實驗的標準電極，如做其他實驗分析需求，根據(jù)實驗需求配置相關(guān)電極。

5、什么是無死體積電磁閥？

答：海能公司生產(chǎn)的電位滴定儀，采用原裝進口電磁閥，保證電磁閥在開關(guān)后無殘留液體，使儀器獲得更高的滴定精度。

6、電位滴定儀的電極需要多長時間更換一次？

答：根據(jù)客戶的使用頻率及電極的自身使用壽命而定，當結(jié)果出現(xiàn)較大偏差及平行性不好時，首先要考慮更換電極。

7、滴定儀正常使用過程中的耗材有哪些？

答：機器本身的耗材主要是測量電極，同時還有在日常實驗過程中所需的試劑。

8、電位滴定儀對實驗室環(huán)境有什么要求？

答：有正常工作用電，保證實驗臺的平整度，無強磁場干擾。

9、凱氏定氮滴定系統(tǒng)與電位滴定的區(qū)別？

答：凱氏定氮滴定系統(tǒng)是顏色判斷終點，只適用于凱氏定氮法，而電位滴定儀應(yīng)用范圍廣泛，是實驗室通用基礎(chǔ)設(shè)備，完全可以代替凱氏定氮滴定系統(tǒng)。

10、自動移液泵的作用是什么、Z多可安裝幾個？

答：滴定過程中往往需要添加輔助試劑，如加酸酸化，加水稀釋等。Z多使用五個移液泵，它們可同或單獨使用，在滴定過程中的每一個階段，可以真正的實現(xiàn)自動化。測試過程中只需放入樣品，按鍵，即可得到Z終的結(jié)果。

11、自動移液泵的進液速度是多少？

答：排量：1毫升/秒 內(nèi)管：氯丁橡膠 外管：聚氯乙烯和聚四氟乙烯

12、自動滴定管有哪些特點？

答：配有48000步進電機、10毫升透明的刻度玻璃滴定管、防腐材料的四通閥、理論Z小滴定體積0.2ul、Z多可以安裝四個滴定管。

（來源：濟南海能儀器股份有限公司）

答： 食品、化工、醫(yī)藥、香精香料等行業(yè)中都有廣泛的應(yīng)用。

答：準確度、重復(fù)性都是儀器Z重要的指標，樣品透過率這一指標可以反映儀器的靈敏度，一般樣品透過率1%的都相對靈敏度比較高的。如果選購控溫型旋光儀，那么控溫精度就比較重要，如果控溫精度不夠高，穩(wěn)定性不夠好，那不如直接外接水浴進行控溫。

答：首先所有旋光度的測量，都是必須在固定的單波長下測量的，鈉燈在空氣中的波長是589.3nm，LED燈在配合特殊的濾光片后，也能達到589.3nm，起到和鈉燈一樣的效果。其次鈉燈的壽命一般在50—200小時不等，而LED燈的壽命一般都至少要超過5000小時，并且LED燈的價格也要遠遠低于鈉燈，所以LED燈取代鈉燈已經(jīng)是一個必然趨勢。

答：溫度對一切物質(zhì)的旋光度都有影響，所以理論上來說，所有樣品的測試都會對溫度有一定要求，但是也有一些物質(zhì)，比如說糖它自身有一套比較完整的溫度系數(shù)修正表，又或者是用戶對Z終結(jié)果要求不高，對溫度引起的數(shù)據(jù)偏差可以忽略的都可以選購不帶控溫的旋光儀。但除此之外的測試，都會對溫度有嚴格要求，大部分需要測量的樣品都沒有確定的溫度補償系數(shù)，同時ＧＭＰ中也嚴格規(guī)定了測試溫度的要求，因而需要選擇帶控溫的旋光儀。

答：彩色觸摸屏給用戶帶來的舒適操控感是無可替代的，好比iPhone手機推出之初帶給人們的那種震撼力，會更貼近用戶的使用習(xí)慣，更方便用戶自由的操控儀器。

答：儀器具備了自動校準功能，可以讓用戶時刻了解儀器的運行情況，并且及時的調(diào)整儀器的測試精度，使儀器自始至終達到一個良好的工作狀態(tài)。

答：P850內(nèi)置了帕爾帖控溫系統(tǒng)，通過各種溫度傳感器，半導(dǎo)體控溫傳感器，以及PID溫度控制等電路，Z終使儀器具備了溫度波動不大于0.1度，精確度不大于0.3度的這樣一個非常精確的控溫環(huán)境，完全滿足各類樣品測試對溫度精度的需要。

答：主要有旋光度、比旋度、濃度、糖度這四種模式，目前我公司推出的幾款儀器都具有這四種模式隨意切換的功能，省去了用戶再次計算的繁瑣。

答：可以根據(jù)使用頻率和對精度的要求，選擇每周或者每月校準一次，如果用戶比較集中的使用某一段角度的測量，也可以每天選用1根Z接近測試角度的石英標準旋光管對儀器進行校準。

答：由于溫度對樣品的測量結(jié)果有影響，所以即使在可以進行對樣品控溫測量的條件的，也建議用戶盡量將室溫接近于20度，Z好儀器常年的工作環(huán)境可以在15-25度之間，以避免環(huán)境溫度于測試溫度之間的溫差過大，造成測試結(jié)果的不準確。

答：同外接水浴相比，帕爾帖控溫具有控溫體積小、速度快等優(yōu)勢，內(nèi)置在儀器內(nèi)部更可以方便用戶設(shè)定各種測試要求，避免了多個儀器一起配合工作時造成的誤差或錯誤。

（來源：濟南海能儀器股份有限公司）