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- 趙俠915915 2009-07-24 00:00:00
- 色譜法 chromatography 薄層色譜色譜法又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”,是一種分離和分析方法,在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動相對固定相中的混合物進(jìn)行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動,Z終達(dá)到分離的效果。色譜法起源于20世紀(jì)初,1950年代之后飛速發(fā)展,并發(fā)展出一個獨立的三級學(xué)科-色譜學(xué)。歷史上曾經(jīng)先后有兩位化學(xué)家因為在色譜領(lǐng)域的突出貢獻(xiàn)而獲得諾貝爾化學(xué)獎,此外色譜分析方法還在12項獲得諾貝爾化學(xué)獎的研究工作中起到關(guān)鍵作用。[編輯本段]歷史 色譜法從二十世紀(jì)初發(fā)明以來,經(jīng)歷了整整一個世紀(jì)的發(fā)展到今天已經(jīng)成為Z重要的分離分析科學(xué),廣泛地應(yīng)用于許多領(lǐng)域,如石油化工、有機(jī)合成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù),乃至空間探索等。 將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布或一片紙上,隨著溶液的展開可以觀察到一個個同心圓環(huán)出現(xiàn),這種層析現(xiàn)象雖然古人就已有初步認(rèn)識并有一些簡單的應(yīng)用,但真正首先認(rèn)識到這種層析現(xiàn)象在分離分析方面具有重大價值的是俄國植物學(xué)家Tswett。 Tswett關(guān)于色譜分離方法的研究始于1901年,兩年后他發(fā)表了他的研究成果"一種新型吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用,提出了應(yīng)用吸附原理分離植物色素的新方法。三年后,他將這種方法命名為色譜法(Chromatography),很顯然色譜法 (Chromatography)這個詞是由顏色(chrom)和圖譜(graph)這兩個詞根組成的,派生詞有chromatograph(色譜儀),chromatogram(色譜圖),chromatographer(色譜工作者)等。由于Tswett的開創(chuàng)性工作,因此人們尊稱他為"色譜學(xué)之父",而以他的名字命名的Tswett獎也成為了色譜界的Z高榮譽獎。 色譜法發(fā)明后的Z初二三十年發(fā)展非常緩慢。液-固色譜的進(jìn)一步發(fā)展有賴于瑞典科學(xué)家Tiselius(1948年Nobel Chemistry Prize獲得者)和Claesson的努力,他們創(chuàng)立了液相色譜的迎頭法和頂替法。分配色譜是由的英國科學(xué)家Martin和Synge創(chuàng)立的,他們因此而獲得1952年的諾貝爾化學(xué)獎。1941年,Martin和Synge采用水分飽和的硅膠為固定相,以含有乙醇的氯仿為流動相分離乙?;被?,他們在這一工作的論文中預(yù)言了用氣體代替液體作為流動相來分離各類化合物的可能性。 1951年,Martin和James報道了用自動滴定儀作檢測器分析脂肪酸,創(chuàng)立了氣-液色譜法;1958年,Golay首先提出了分離效能極高的毛細(xì)管柱氣相色譜法,發(fā)明了玻璃毛細(xì)管拉制機(jī),從此氣相色譜法超過Z先發(fā)明的液相色譜法而迅速發(fā)展起來,今天常用的氣相色譜檢測器也幾乎是在五十年代發(fā)展起來的。七十年代發(fā)明了石英毛細(xì)管柱和固定液的交聯(lián)技術(shù)。隨著電子技術(shù)和計算機(jī)技術(shù)的發(fā)展氣相色譜儀器也在不斷發(fā)展完善中,到現(xiàn)在Z先進(jìn)的氣相色譜儀已實現(xiàn)了全自動化和計算機(jī)控制,并可通過網(wǎng)絡(luò)實現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷和控制。 色譜的起源 色譜法起源于20世紀(jì)初,1906年俄國植物學(xué)家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經(jīng)過一段時間洗脫之后,植物色素在碳酸鈣柱中實現(xiàn)分離,由一條色帶分散為數(shù)條平行的色帶。由于這一實驗將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名為Хроматография,這個單詞Z終被英語等拼音語言接受,成為色譜法的名稱。漢語中的色譜也是對這個單詞的意譯。 茨維特并非科學(xué)家,他對色譜的研究以俄語發(fā)表在俄國的學(xué)術(shù)雜志之后不久,diyi次世界大戰(zhàn)爆發(fā),歐洲正常的學(xué)術(shù)交流被迫終止。這些因素使得色譜法問世后十余年間不為學(xué)術(shù)界所知,直到1931年德國柏林威廉皇帝研究所的庫恩將茨維特的方法應(yīng)用于葉紅素和葉黃素的研究,庫恩的研究獲得了廣泛的承認(rèn),也讓科學(xué)界接受了色譜法,此后的一段時間內(nèi),以氧化鋁為固定相的色譜法在有色物質(zhì)的分離中取得了廣泛的應(yīng)用,這就是今天的吸附色譜。 分配色譜的出現(xiàn)和色譜方法的普及 1938年阿切爾·約翰·波特·馬丁和理查德·勞倫斯·米林頓·辛格準(zhǔn)備利用氨基酸在水和有機(jī)溶劑中的溶解度差異分離不同種類的氨基酸,馬丁早期曾經(jīng)設(shè)計了逆流萃取系統(tǒng)以分離維生素,馬丁和辛格準(zhǔn)備用兩種逆向流動的溶劑分離氨基酸,但是沒有獲得成功。后來他們將水吸附在固相的硅膠上,以氯仿沖洗,成功地分離了氨基酸,這就是現(xiàn)在常用的分配色譜。在獲得成功之后,馬丁和辛格的方法被廣泛應(yīng)用于各種有機(jī)物的分離。1943年馬丁以及辛格又發(fā)明了在蒸汽飽和環(huán)境下進(jìn)行的紙色譜法。 氣相色譜和色譜理論的出現(xiàn) 1952年馬丁和詹姆斯提出用氣體作為流動相進(jìn)行色譜分離的想法,他們用硅藻土吸附的硅酮油作為固定相,用氮氣作為流動相分離了若干種小分子量揮發(fā)性有機(jī)酸。 氣相色譜的出現(xiàn)使色譜技術(shù)從Z初的定性分離手段進(jìn)一步演化為具有分離功能的定量測定手段,并且極大的刺激了色譜技術(shù)和理論的發(fā)展。相比于早期的液相色譜,以氣體為流動相的色譜對設(shè)備的要求更高,這促進(jìn)了色譜技術(shù)的機(jī)械化、標(biāo)準(zhǔn)化和自動化;氣相色譜需要特殊和更靈敏的檢測裝置,這促進(jìn)了檢測器的開發(fā);而氣相色譜的標(biāo)準(zhǔn)化又使得色譜學(xué)理論得以形成色譜學(xué)理論中有著重要地位的塔板理論和Van Deemter方程,以及保留時間、保留指數(shù)、峰寬等概念都是在研究氣相色譜行為的過程中形成的。 GX液相色譜 1960年代,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易汽化的大分子物質(zhì),氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上diyi臺GX液相色譜儀,開啟了GX液相色譜的時代。GX液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),以高壓驅(qū)動流動相,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。 1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書,標(biāo)志著GX液相色譜法 (HPLC)正式建立。在此后的時間里,GX液相色譜成為Z為常用的分離和檢測手段,在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。GX液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù)、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。
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- 我家柔柔萌 2009-07-27 00:00:00
- 色譜有很多種,是一種實驗分離方法。 Z早是有人用一個裝置把葉綠素和其他一些物質(zhì)分開,因而形成不同的顏色譜帶,就叫色譜。 現(xiàn)在說得Z多的色譜指的是儀器,如:氣相色譜、液相色譜、;離子色譜、薄層色譜等等,都是基于上面的原理弄出來的儀器。
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- 汪陽伯 2009-07-23 00:00:00
- http://baike.baidu.com/view/933.htm#1_1
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