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轉化大腸桿菌之前用了PCR純化,會不會有影響

曹毯場拜 2014-11-16 01:36:51 393  瀏覽
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全部評論(1條)

  • 大大拿0 2014-11-17 00:00:00
    如果你指的是PCR產物,在酶切和連接之前做了純化,這往往是必要的(如果條帶單一,純度好,酶切和連接體系成熟,也可以不純化); 如果是在連接試驗后,再用試劑盒純化一次,這會對實驗有很大的影響: 1、純化過程本身會有較大損失,起始量約少,相對損失就越大; 2. pcr的純化試劑盒往往是針對小片段(100-5k bp以內)DNA的,對于質粒,其回收效率可能進一步下降; 所以,這樣極有可能導致轉化效率大幅下降,但如果你的連接產物本身較易轉化,還是有可能成功的。 個人見解,僅供參考,祝愉快!

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