臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有較高的分化潛能，可向多個(gè)方向進(jìn)行分化。它在骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、內(nèi)皮和心肌等組織工程方面具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。有報(bào)道從人臍帶中分離出MSCs，且細(xì)胞含量、增殖能力優(yōu)于MSCs，免疫原性比MSCs低  ，并且具有取材方便，無倫理學(xué)爭議等優(yōu)點(diǎn)，因此越來越受到研究工作者們的關(guān)注。

近期有位客戶需要一臺顯微鏡用于觀察臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，由于它是需要培養(yǎng)皿培養(yǎng)的，因此銷售經(jīng)理推薦細(xì)胞工廠顯微鏡MI52-CF。

 
顯微鏡MI52-CF觀察臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

細(xì)胞工廠MI52-CF采用優(yōu)良的無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)，可實(shí)現(xiàn)明視場、相襯觀察?？蓪Ω吲囵B(yǎng)皿或圓筒狀燒瓶進(jìn)行無沾染培養(yǎng)細(xì)胞觀察?；?qū)?xì)胞組織，透明液態(tài)組織的顯微觀察，可對培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)組織進(jìn)行動(dòng)態(tài)顯微觀察，也可對“細(xì)胞工廠”進(jìn)行顯微觀察?？蓱?yīng)用于科研院所、高等院校、醫(yī)療衛(wèi)生、生物醫(yī)藥、檢驗(yàn)檢疫、農(nóng)牧乳業(yè)等部門。

除此之外，熒光顯微鏡也可應(yīng)用于人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞主庫支原體

熒光生物顯微鏡MF31-M采用無限遠(yuǎn)平場消色差物鏡和大視野目鏡，可用雙目或三目觀察，搭配LED熒光激發(fā)裝置，實(shí)現(xiàn)明場和熒光顯微觀察，供臨床試驗(yàn)室利用顯微放大原理觀察微小細(xì)胞、組織等樣本用。

如果您對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞顯微鏡感興趣或有疑問，歡迎與我們聯(lián)系，期待與您相約！

來源：http://www.mshot.com.cn/kehuanli/202303313.html，轉(zhuǎn)載請保留出處，謝謝！

基因工程細(xì)胞的同質(zhì)性對于很多應(yīng)用都是必要條件，例如細(xì)胞株開發(fā)、基因ZL、組織工程以及細(xì)胞ZL與再生醫(yī)學(xué)。CRISPR/Cas9基因編輯存在脫靶等情況，無法直接得到均質(zhì)的細(xì)胞，因此需要開展單細(xì)胞克隆，之后才能用于臨床。

CloneSelect單細(xì)胞分離系統(tǒng)（CloneSelect Single Cell Printer）采用類似噴墨打印的技術(shù)，柔和地產(chǎn)生包裹細(xì)胞的液滴無接觸地直接分配到微孔板中（圖1）。同時(shí)，該系統(tǒng)借助智能圖像分析，確認(rèn)細(xì)胞數(shù)目，分析細(xì)胞的形態(tài)（大小和圓度）及熒光強(qiáng)度，聯(lián)動(dòng)的真空裝置將不符合要求的液滴（如空液滴或者含多個(gè)細(xì)胞的液滴）直接吸走，而符合要求的細(xì)胞液滴則分配至微孔板，從而實(shí)現(xiàn)對單個(gè)細(xì)胞的分選和接種。單細(xì)胞分離系統(tǒng)是一種可比移液器操作的柔和的單細(xì)胞分離技術(shù)，而流式分選由于高的液體剪切力和電壓的影響，會(huì)降低敏感細(xì)胞和部分受損細(xì)胞（如電轉(zhuǎn)后的細(xì)胞）的成克隆率，因此單細(xì)胞分離系統(tǒng)更適用于基因工程細(xì)胞的克隆，維持細(xì)胞活力，并提供直接的單克隆性圖像證據(jù)。

圖1：CloneSelect f.sight單細(xì)胞分離系統(tǒng)

最近發(fā)表的一篇文章（Characterization of CRISPR/Cas9 RANKL knockout mesenchymal stem cell clones based on single-cell printing technology and emulsion coupling assay as a low-cellularity workflow for single-cell cloning），作者用CRISPR/Cas9對間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）開展RANKL基因敲除以提高其骨骼形成能力。整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程起始于轉(zhuǎn)染，接著用CloneSelect f.sight單細(xì)胞分離系統(tǒng)開展單細(xì)胞克隆，隨后在DNA、RNA以及蛋白質(zhì)水平開展分析，ZH開展細(xì)胞功能分析（圖2）。

圖2：基因編輯間充質(zhì)干細(xì)胞的單細(xì)胞克隆及分析流程。（圖片來源：文獻(xiàn)1）。

作者在CRISPR/Cas9基因敲除質(zhì)粒中加入了GFP基因，轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞后，用具備熒光分選功能的CloneSelect f.sight系統(tǒng)分選出轉(zhuǎn)染成功的單細(xì)胞。系統(tǒng)可設(shè)定細(xì)胞直徑、圓度和熒光強(qiáng)度等指標(biāo)，分選出單個(gè)活細(xì)胞并接種至微孔板。圖3為系統(tǒng)分選基因編輯的間充質(zhì)干細(xì)胞的5張連續(xù)的圖像。通過瀏覽單細(xì)胞分離過程中記錄的5張連續(xù)的圖像，作者統(tǒng)計(jì)單細(xì)胞接種的成功率為93.9±2.7%（n=451），即僅有~6%的孔為多細(xì)胞孔，或空孔或無法確認(rèn)（圖4）。這一結(jié)果表明f.sight單細(xì)胞分離系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地識別細(xì)胞并成功將其接種至微孔內(nèi)。

圖3：CloneSelect f.sight系統(tǒng)分選間充質(zhì)干細(xì)胞時(shí)采集的5張連續(xù)圖像，可用于證明單克隆性。（圖片來源：文獻(xiàn)¹）。

除了帶GFP的基因敲除質(zhì)粒外，作者還將pmaxGFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至間充質(zhì)干細(xì)胞作為對照用于評估單細(xì)胞分離效率和克隆率。此外，作者轉(zhuǎn)染了多個(gè)不同的基因敲除質(zhì)粒。雖然不同的質(zhì)粒因?yàn)榇笮〔煌尸F(xiàn)各異的轉(zhuǎn)染效率，但是成克隆率都達(dá)到了30%。此外，作者還發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的間充質(zhì)干細(xì)胞（31.3±8%）和未轉(zhuǎn)染的間充質(zhì)干細(xì)胞（39.6±15.6%）在成克隆率上差異較小，這也表明f.sight的單細(xì)胞分選過程柔和，因此產(chǎn)生的系統(tǒng)偏差較?。▓D4）。

圖4：CloneSelect f.sight單細(xì)胞分離系統(tǒng)的高接種效率（左）和高成克隆率（右）。（圖片來源：文獻(xiàn)¹）。

接著作者采用surveyor assay、RT-PCR和emulsion coupling分別從DNA、RNA和蛋白質(zhì)水平對基因編輯后的間充質(zhì)單細(xì)胞開展分析。ZH作者選出一株雙等位基因敲除的間充質(zhì)干細(xì)胞（g23d）檢測其成骨分化的能力，并以未編輯的MSC為對照開展平行實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞轉(zhuǎn)移到成骨分化培養(yǎng)基后，分別在第7天、14天和21天用茜素紅染色。在第14天，細(xì)胞失去細(xì)長的成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，開始呈現(xiàn)出成骨細(xì)胞樣的形態(tài)，然后在第21天開始出現(xiàn)鈣沉積，發(fā)展過程與親本的MSC對照類似（圖5）。這表明基因編輯后的MSC其成骨分化能力并沒有因?yàn)榛蚓庉嫼秃Y選過程而受到影響。

圖5：RANKL基因敲除的間充質(zhì)干細(xì)胞（g23d）和親本間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和成骨分化。（圖片來源：文獻(xiàn)1）。

在這個(gè)研究中，作者搭建了一整套實(shí)驗(yàn)流程，起始于CRISPR/Cas9基因編輯，單細(xì)胞克隆以及DNA、RNA和蛋白質(zhì)各個(gè)水平的分析和細(xì)胞功能測試。實(shí)驗(yàn)流程中采用CloneSelect f.sight單細(xì)胞分離系統(tǒng)成功GX地分選出基因編輯后帶GFP的間充質(zhì)干細(xì)胞。單細(xì)胞接種效率高達(dá)93.9% (± 2.7%)，且成克隆率高達(dá)31.3% (±8%)。相比傳統(tǒng)的有限稀釋法和流式分選，CloneSelect單細(xì)胞分離系統(tǒng)具有GX率，高活率，操作簡單，單克隆性證據(jù)充分等優(yōu)勢，是基因工程細(xì)胞克隆的理想工具。

       隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，對蛋白質(zhì)、核酸及細(xì)胞標(biāo)記的要求越來越高，傳統(tǒng)的同位素標(biāo)記方法已不能適應(yīng)當(dāng)今的發(fā)展。而發(fā)展起來的熒光探針技術(shù)已經(jīng)在蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞檢測及免疫分析等方面顯現(xiàn)出巨大的潛能。熒光探針技術(shù)具備高度靈敏性和極寬的動(dòng)態(tài)響應(yīng)時(shí)間，可以使研究人員高靈敏和高選擇性地檢測復(fù)雜生物分子，包括活細(xì)胞中的特定成分。尤其近年來發(fā)展起來的熒光化學(xué)傳感器和分子信號系統(tǒng)更是使熒光探針技術(shù)的應(yīng)用有了很大程度的提高和擴(kuò)充。如今，它的應(yīng)用已深入到藥物學(xué)、生理學(xué)、環(huán)境科學(xué)、信息科學(xué)等諸多領(lǐng)域。隨著生命科學(xué)的飛速發(fā)展，對活性高、特異選擇性好和靈敏度高的新型熒光探針的需求就顯得越來越迫切了。目前，用于標(biāo)記或衍生的熒光探針主要有熒光素類、羅丹明類、鄰苯二甲醛類等化合物。其中熒光素及其衍生物在生物研究領(lǐng)域中占有極其重要的位置。

       近期，有客戶聯(lián)系明美公司，已有一臺徠卡DMIL顯微鏡，之前所配套的成像系統(tǒng)發(fā)霉不能使用，需要重新搭配一套CCD顯微鏡相機(jī)，明美公司在當(dāng)?shù)赜修k事處，帶有一套500W像素CCD顯微鏡相機(jī)上門給老師測試，拍攝熒光和明場都合適，效果很滿意。

如果您也有這方面的需求或感興趣，歡迎與我們聯(lián)系，期待與您相約！

（來源：http://www.mshot.com/kehuanli/20200302.html廣州市明美光電技術(shù)有限公司）

    飼料中淀粉以不同的形式存在，飼料加工過程中，一定的水熱處理破壞部分淀粉原有的結(jié)晶結(jié)構(gòu)形成 α-淀粉，即糊化淀粉。這種淀粉在較高糊化度的狀態(tài)下能被動(dòng)物體內(nèi)的酶充分水解，并改善飼料的風(fēng)味，提高畜禽的生長性能。淀粉糊化度的高低受加工工藝和工藝參數(shù)的直接影響，也是評價(jià)飼料的重要指標(biāo)。熟化加工經(jīng)過高溫、高濕能使抗?fàn)I養(yǎng)因子失活，淀粉糊化，比普通飼料的色、香、味更佳，飼料利用率更高，同時(shí)也能降低飼料的顆粒硬度。飼料的顆粒硬度不僅制約生產(chǎn)成本，也對動(dòng)物的生產(chǎn)性能有一定的影響。顆粒硬度過高的飼料不利于動(dòng)物采食，而淀粉糊化度較高的飼料可以提高動(dòng)物的采食量和各種營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。

    質(zhì)構(gòu)儀作為一種客觀、數(shù)據(jù)量化的物性分析儀器，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、材料、醫(yī)藥和化工等領(lǐng)域樣品的質(zhì)構(gòu)分析與物性測試，可以用于測定樣品的硬度、彈性、回復(fù)性、咀嚼性、粘性、凝膠強(qiáng)度、拉伸強(qiáng)度和斷裂強(qiáng)度等指標(biāo)。

1、儀器測定

儀器：Universal TA研究型質(zhì)構(gòu)儀（或Rapid TA+專業(yè)型質(zhì)構(gòu)儀或Rapid TA實(shí)用型國產(chǎn)質(zhì)構(gòu)儀）

探頭：P/36R柱形探頭

選取規(guī)格相似的熟化軟顆粒飼料放于柱形探頭的正下方，測試條件設(shè)置如下

測試模式：壓縮

測試前速度：1mm/s

測試速度：0.2mm/s

測試后速度：1mm/s

觸發(fā)力：10g

目標(biāo)模式：形變50%

測試結(jié)果：可以測定熟化軟顆粒飼料的硬度。