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  CF云強(qiáng)菜鳥 2009-10-28 00:00:00

  首先建議樓主可以到專業(yè)的行業(yè)論壇進(jìn)行提問，因?yàn)檎搲锍３?huì)遇到和你有過相同遭遇的人，這樣解決問題更為準(zhǔn)確啊~~我一般常常上論壇（http://www.instrument.com.cn/bbs/）主要是這個(gè)壇子專業(yè)性比較強(qiáng)，牛人也多一些，您也可以來試試啊 此外，不知道樓主所說的電色譜是否指的就是GX毛細(xì)管電泳??？ 以下是一些資源，希望對(duì)您有所幫助： 色譜圖書庫（電子版） http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090812/2055222/ 毛細(xì)管電泳的模式及應(yīng)用 http://www.instrument.com.cn/search/BBSArchive_318197_1.htm CEC應(yīng)用文章選集 http://www.instrument.com.cn/download/shtml/024291.shtml GX毛細(xì)管電泳的基本原理 GX毛細(xì)管電泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE）是近年來發(fā)展起來的分離、分析技術(shù)，它是凝膠電泳技術(shù)的發(fā)展，是GX液相色譜分析的補(bǔ)充。該技術(shù)可分析的成分小至有機(jī)離子、大至生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等?？捎糜诜治龆喾N體液樣本如血清或血漿、尿、腦脊液及唾液等，HPLC分析GX、快速、微量。 電泳遷移 不同分子所帶電荷性質(zhì)、多少不同，形狀、大小各異。一定電解質(zhì)及PH的緩沖液或其它溶液內(nèi)，受電場作用，樣本中各組分按一定速度遷移，從而形成電泳。 電泳遷移速度(v)可用下式表示： 其中E為電場強(qiáng)度(E＝V/L，V為電壓，L為毛細(xì)管總長度)。u為電泳淌度。 電滲遷移 電滲遷移指在電場作用下溶液相對(duì)于帶電管壁移動(dòng)的現(xiàn)象。特殊結(jié)構(gòu)的熔合硅毛細(xì)管管壁通常在水溶液中帶負(fù)電荷，在電壓作用下溶液整體向負(fù)極移動(dòng)，形成電滲流。帶電微粒在毛細(xì)管內(nèi)實(shí)際移動(dòng)的速度為電泳流和電滲流的矢量和。分析化學(xué)博客-jl2~d d& 6}8eE4B3q5T I5U0 分離分析類型 B[D hv，m cF2Z0 根據(jù)其分離樣本的原理設(shè)計(jì)不同主要分為以下幾種類型： b[ _0]&uL+\$C0①毛細(xì)管區(qū)帶電泳（capillaryzoneelectrophoresis，CZE）；②毛細(xì)管等速電泳（capillary chromatography，CITP）； ③毛細(xì)管膠速電動(dòng)色譜（miceller electrokinetic capillary chromatography，MECC）； ④毛細(xì)管凝膠電泳（capillary gelelectrophoresis，CGE）； ⑤毛細(xì)管等電聚焦（capillary isoelectric focusing ，CIEF）。 毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE）為HPCE的基本操作模式，一般采用磷酸鹽或硼酸鹽緩沖液，實(shí)驗(yàn)條件包括緩沖液濃度、pH值、電壓、溫度、改性劑（乙腈、甲醇等），用于對(duì)帶電物質(zhì)（藥物、蛋白質(zhì)、肽類等）分離分析，對(duì)于中性物質(zhì)無法實(shí)現(xiàn)分離。毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜（MECC）為一種基于膠束增溶和電動(dòng)遷移的新型液體色譜，在緩沖液中加入離子型表面活性劑作為膠束劑，利用溶質(zhì)分子在水相和膠束相分配的差異進(jìn)行分離，拓寬了CZE的應(yīng)用范圍，適合于中性物質(zhì)的分離，亦可區(qū)別手性化合物，可用于氨基酸、肽類、小分子物質(zhì)、手性物質(zhì)、藥物樣品及體液樣品的分析。毛細(xì)管等速電泳（CITP）采用先導(dǎo)電解質(zhì)和后繼電解質(zhì)，構(gòu)成不連續(xù)緩沖體系，基于溶質(zhì)的電泳淌度差異進(jìn)行分離，常用于離子型物質(zhì)（如有機(jī)酸），并因適用較大內(nèi)徑的毛細(xì)管而可用于微制備，但本法空間分辨率較差。毛細(xì)管等電聚焦電泳（CIEF）用于具兼性離子的樣品（蛋白質(zhì)、肽類），等電點(diǎn)僅差0.001可分離的物質(zhì)。毛細(xì)管凝膠電泳（CGE）依據(jù)大分子物質(zhì)的分子量大小進(jìn)行分離，主要用于蛋白質(zhì)、核苷酸片段的分離。此外，還有毛細(xì)管電色譜（CEC）及非水毛細(xì)管電泳（CNACE），用于水溶性差的物質(zhì)和水中難進(jìn)行反應(yīng)的分析研究。CZE和MECC用得較多，本文以兩種方法為例來說明HPLC的原理。 CZE的基本原理 HPLC選用的毛細(xì)管一般內(nèi)徑約為50μm（20～200μm），外徑為375μm，有效長度為50cm（7～100cm）。毛細(xì)管兩端分別浸入兩分開的緩沖液中，同時(shí)兩緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極，該電壓使得分析樣品沿毛細(xì)管遷移，當(dāng)分離樣品通過檢測器時(shí)，可對(duì)樣品進(jìn)行分析處理。HPLC進(jìn)樣一般采用電動(dòng)力學(xué)進(jìn)樣（低電壓）或流體力學(xué)進(jìn)樣（壓力或抽吸）兩種方式。在毛細(xì)管電泳系統(tǒng)中，帶電溶質(zhì)在電場作用下發(fā)生定向遷移，其表觀遷移速度是溶質(zhì)遷移速度與溶液電滲流速度的矢量和。所謂電滲是指在高電壓作用下，雙電層中的水合陰離子引起流體整體地朝負(fù)極方向移動(dòng)的現(xiàn)象；電泳是指在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子在電場作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。溶質(zhì)的遷移速度由其所帶電荷數(shù)和分子量大小決定，另外還受緩沖液的組成、性質(zhì)、pH值等多種因素影響。帶正電荷的組份沿毛細(xì)管壁形成有機(jī)雙層向負(fù)極移動(dòng)，帶負(fù)電荷的組分被分配至毛細(xì)管近中區(qū)域，在電場作用下向正極移動(dòng)。與此同時(shí)，緩沖液的電滲流向負(fù)極移動(dòng)，其作用超過電泳，Z終導(dǎo)致帶正電荷、中性電荷、負(fù)電荷的組份依次通過檢測器。 MECC的基本原理 MECC是在CZE基礎(chǔ)上使用表面活性劑來充當(dāng)膠束相，以膠束增溶作為分配原理，溶質(zhì)在水相、膠束相中的分配系數(shù)不同，在電場作用下，毛細(xì)管中溶液的電滲流和膠束的電泳，使膠束和水相有不同的遷移速度，同時(shí)待分離物質(zhì)在水相和膠束相中被多次分配，在電滲流和這種分配過程的雙重作用下得以分離。MECC是電泳技術(shù)與色譜法的結(jié)合，適合同時(shí)分離分析中性和帶電的樣品分子。 毛細(xì)管電泳技術(shù)可檢測多種樣品，如血清、血漿、尿樣、腦脊液、紅細(xì)胞、體液或組織及其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物活體實(shí)驗(yàn)；且可分離分析多種組分，如核酸/核苷酸、蛋白質(zhì)/多肽/氨基酸、糖類/糖蛋白、酶、堿氨基酸、微量元素、小的生物活性分子等的快速分析，以及DNA序列分析和DNA合成中產(chǎn)物純度測定等，甚至可用于堿性藥物分子及其代謝產(chǎn)物、無機(jī)及有機(jī)離子/有機(jī)酸、單細(xì)胞分析、藥物與細(xì)胞的相互作用和病毒的分析，如在緩沖液中加入表面活性劑則可用于手性分離中性化合物。 I |o"u5v4TP(e0 毛細(xì)管電泳技術(shù)不僅在基礎(chǔ)科學(xué)中得到廣泛應(yīng)用，在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用也有較多應(yīng)用。如臨床疾病診斷、臨床蛋白分析、臨床藥物監(jiān)測、代謝研究、病理研究、同工酶分析、PCR產(chǎn)物分析、DNA片段及序列分析等。隨著人類基因組計(jì)劃的實(shí)施，人類基因組計(jì)劃的完成比預(yù)期時(shí)間一再提前，其主要工具是毛細(xì)管電泳儀。但是人類基因組圖譜并沒有告訴我們所有基因的“身份”以及它們所編碼的蛋白質(zhì)。人體內(nèi)真正發(fā)揮作用的是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)扮演著構(gòu)筑生命大廈的“磚塊”角色，其中可能藏著開發(fā)疾病診斷方法和新藥的“鑰匙”?！昂蠡驎r(shí)代”，一個(gè)以“蛋白質(zhì)組”為ZD的生命科學(xué)的新時(shí)代到來，需要對(duì)蛋白質(zhì)更多的研究，毛細(xì)管電泳技術(shù)將發(fā)揮更大的作用。在醫(yī)學(xué)研究中毛細(xì)管電泳技術(shù)越來越受到重視，但其臨床應(yīng)用尚屬起步階段，隨著毛細(xì)管電泳技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，CE將在臨床研究和基礎(chǔ)研究領(lǐng)域發(fā)揮更重要的作用。

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