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全基因合成拿到之后怎么處理

WY06868 2017-01-14 00:40:47 479  瀏覽
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全部評論(1條)

  • 敏姐是個好人0 2017-01-15 00:00:00
    全基因合成拿到之后怎么處理 1)反向轉錄法:這種方法主要用于分子量較大而又不知其序列的基因,它以目的基因的mRNA為模板,設計上下游引物,借助反轉錄酶合成堿基互補的DNA片段,即cDNA,再在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈cDNA,亦即目的基因的雙鏈DNA。 2)基因組擴增法:利用基因組抽提試劑盒,可以從細胞、植物、血液、動物組織中直接分離基因組,設計特異擴增的引物,利用抽提的基因組為模版,直接PCR擴增,以獲取目的基因。 3)人工合成:依照某一蛋白質(zhì)的氨基酸序列,或基因序列,設計全長引物,利用OVERLAP方法形成模版DNA,再利用PCR擴增的方法得到雙鏈DNA,然后將PCR產(chǎn)物轉化克隆至克隆載體或者表達載體中。化學合成全基因目前是準確率Z高,速度Z快的方法,同時可以依據(jù)密碼子在不同宿主細胞的偏愛性和不同的實驗需求,設計基因序列,提高表達水平。

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