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在基因組dna的提取過程中應(yīng)注意哪些問題

*控cri 2015-06-18 13:34:11 1343  瀏覽
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全部評論(1條)

  • 幻雪夜57 2015-06-19 00:00:00
    1、 裂解液要預(yù)熱,以YZDNase,加速蛋白變性,促進(jìn)DNA溶解. 2、 酚一定要堿平衡.苯酚具有高度腐蝕性,飛濺到皮膚、粘膜和眼睛會造成損傷,因此應(yīng)注意防護(hù).氯仿易燃、易爆、易揮發(fā),具有神經(jīng)毒作用,操作時應(yīng)注意防護(hù). 3、 各操作步驟要輕柔,盡量減少DNA的人為降解. 4、 取各上清時,不應(yīng)貪多,以防非核酸類成分干擾. 5、 異丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要預(yù)冷,以減少DNA的降解,促進(jìn)DNA與蛋白等的分相及DNA沉淀. 6、 提取DNA過程中所用到的試劑和器材要通過高壓烤干等辦法進(jìn)行無核酸酶化處理. 7、 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配制.

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1.淋洗液務(wù)必當(dāng)天配制當(dāng)天使用。

2.在啟動泵之前一定要檢查淋洗液儲液瓶至高壓平流泵之間的管路是否充滿液體,以免抽入空氣。

3.離子色譜儀按照要求需每周開機(jī)一次,保證零配件始終處于濕潤狀態(tài)(YZ器電流設(shè)為零)。

4.機(jī)器長時間不用時,一旦開機(jī)要檢測樣品時,一定要在未加電流的情況下運(yùn)行1-2天(YZ器電流設(shè)為零)。

5.YZ器電流一定在開機(jī)后20-30分鐘后YZ器出口有液體及氣泡時才能加電流,以免燒壞YZ器。

6.分析樣品時,為了保護(hù)分離柱,一定要對樣品進(jìn)行前處理,基本的做法是,過預(yù)處理柱,吸附有機(jī)物,過濾膜,除去雜質(zhì)。

7.濃度高的樣品還要酌情進(jìn)行稀釋。



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