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問(wèn)答社區(qū)

如何用溶膠凝膠裝柱?

黎約神風(fēng)5958 2011-05-21 05:42:14 742  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 韓野吧簽到呵護(hù) 2011-05-22 00:00:00
    裝柱前要將色譜柱垂直固定在支架上。因?yàn)楦傻哪z和用緩沖液平衡好的凝膠的體積差別很大,因此裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計(jì)算所需要的凝膠量。實(shí)驗(yàn)一般使用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠 (Sephadex G-75)?!癎”表示凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5 g。凝膠用蒸餾水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液,在與色譜柱下端連接的尼龍管打開(kāi)的情況下,一次性緩慢倒入色譜柱內(nèi),裝填時(shí)可輕輕敲動(dòng)色譜柱,使凝膠裝填均勻。注意色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝。裝填完后,立即連接緩沖液洗脫瓶,在約50 cm高的操作壓下,用300 mL的物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)充分洗滌平衡凝膠12 h,使凝膠裝填緊密。

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