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電泳染色方法有哪些

lswaizp 2015-11-15 16:24:11 703  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 臭美麗的二毛啊 2015-11-16 00:00:00
    泳后,核酸需經(jīng)染色才能顯色出帶型,常用以下核酸染色劑: 1、溴化乙錠(ethidium bromide, EB) Z常用的核酸熒光染料,可嵌入核酸雙鏈的配對(duì)堿基之間,在紫外線激發(fā)下,發(fā)出桔紅色熒光。 EB-DNA復(fù)合物中的EB發(fā)出的熒光,比游離的凝膠中的EB發(fā)出的熒光強(qiáng)度大10倍,因此無需洗凈背景即可清楚觀察核酸帶型。若EB背景太深,可將凝膠 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非結(jié)合的EB褪色,這 樣可檢查到10ng的DNA樣品,EB也可用于檢測(cè)單鏈DNA或RNA,但其對(duì)單鏈核酸的親和力相對(duì)較小,熒光產(chǎn)率也相對(duì)較低。 在凝膠或電泳緩沖液中加入終濃度為0.5μg/ml的EB,染色可在電泳過程中進(jìn)行,能隨時(shí)觀察核酸的遷移情況。但EB帶正電荷,嵌入堿基后增加了 核酸分子的剛性,使遷移率減慢,故不宜用于測(cè)定核酸分子量的大小,這時(shí)應(yīng)在電泳后將凝膠浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min進(jìn)行染色。EB見光 易分解,應(yīng)于4℃避光保存, 2、吖啶橙(acridine orange, AO): 吖啶橙可嵌入雙鏈核酸堿基對(duì)之間,在254nm紫外線激發(fā)下發(fā)出530nm的綠色熒光;還通過靜電與單鏈核酸的磷酸基結(jié)合,在254nm紫外線激發(fā) 下產(chǎn)生640nm的紅色熒光。因此可區(qū)分單鏈和雙鏈核酸,靈敏度分別為0.1μg和0.05μg。但吖啶橙的染色操作要求嚴(yán)格,應(yīng)在 22℃,0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盤中用該緩沖劑4℃脫色過夜或22℃脫色1~2小時(shí)。 3、銀(Ag+)試劑: Ag+與核酸形成穩(wěn)定復(fù)合物,然后用甲醛使Ag+還原成銀顆粒。AgNO3等試劑可使聚丙烯酰胺凝膠上的單鏈,雙鏈DNA及 RNA都染成黑褐色。銀染法的靈敏度比EB染色高200倍左右,比亞甲藍(lán)染色高100~1000倍,在小于0.5mm厚的凝膠中,能檢測(cè)出0.5ng的 RNA,其缺點(diǎn)是專一性不強(qiáng),能與蛋白質(zhì),去污劑反應(yīng)也產(chǎn)生褐色,而且對(duì)DNA的染色定量不準(zhǔn)確。銀與DNA穩(wěn)定結(jié)合,對(duì)DNA有破壞作用,不適于DNA 片段回收的制備。 4、亞甲藍(lán)(methylene blue) 可將RNA染成藍(lán)色,但靈敏度不高,而且操作時(shí)間長(zhǎng)。染色過程:膠浸泡于0.02%的亞甲藍(lán),10mmol/L Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用凈水洗5~8h(反復(fù)換水),帶型肉眼可見,Z低檢測(cè)量為 250ng。

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重錘式料位計(jì)方法有哪些?

重錘式料位計(jì)方法

在現(xiàn)代工業(yè)中,料位計(jì)的使用廣泛應(yīng)用于各種生產(chǎn)過程中,尤其是在測(cè)量粉料、顆粒物料以及液體物料的存儲(chǔ)和輸送系統(tǒng)中。重錘式料位計(jì)作為一種常見的物料測(cè)量工具,以其高效、可靠和的特性被廣泛應(yīng)用于化工、冶金、礦業(yè)、食品和制藥等行業(yè)。本文將詳細(xì)介紹重錘式料位計(jì)的工作原理、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)以及在實(shí)際操作中的使用方法,幫助讀者更好地理解這一技術(shù)的核心價(jià)值。

重錘式料位計(jì)的工作原理

重錘式料位計(jì)的工作原理基于“靜力平衡”的原理,通過重錘的下落和位移來測(cè)量物料的料位。當(dāng)料位計(jì)的重錘在物料中下落時(shí),由于物料的密度和特性,重錘受到物料的阻力作用,發(fā)生一定的偏移。通過感應(yīng)裝置(通常是力傳感器或電位計(jì))實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)重錘的偏移量,并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),得出物料的高度數(shù)據(jù)。

這一過程確保了重錘式料位計(jì)能夠精確測(cè)量物料的料位,尤其適用于大多數(shù)復(fù)雜的固體和粉末物料。其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)在于能夠在不同物料、不同溫度、不同濕度下穩(wěn)定工作。

重錘式料位計(jì)的主要優(yōu)點(diǎn)

  1. 高可靠性和耐用性:重錘式料位計(jì)在極端的工業(yè)環(huán)境中依然能夠保持高度的穩(wěn)定性,尤其適用于高溫、壓力或腐蝕性環(huán)境下的應(yīng)用。這種耐用性大大降低了設(shè)備的維護(hù)成本。

  2. 適用范圍廣:無論是顆粒、粉塵還是液體,重錘式料位計(jì)都能測(cè)量。這使得它在多個(gè)行業(yè)中均能獲得廣泛應(yīng)用,特別是在料倉(cāng)、料斗、罐體等設(shè)備中,常常能夠高效監(jiān)測(cè)各種物料的料位。

  3. 抗干擾能力強(qiáng):由于重錘式料位計(jì)的工作不依賴于物料的電導(dǎo)率、介電常數(shù)等特性,因此它能有效避免因物料特性變化而導(dǎo)致的測(cè)量誤差。這一特性特別適合于多變和不規(guī)則的物料條件。

  4. 維護(hù)簡(jiǎn)便:與其他類型的料位計(jì)相比,重錘式料位計(jì)的結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單,故障率較低,且不需要頻繁的維護(hù)。這為企業(yè)節(jié)省了大量的時(shí)間和成本。

重錘式料位計(jì)的應(yīng)用領(lǐng)域

重錘式料位計(jì)在多個(gè)行業(yè)中發(fā)揮著重要作用。在化工行業(yè)中,尤其是對(duì)于高密度、高溫度以及腐蝕性強(qiáng)的化學(xué)物料,重錘式料位計(jì)具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。在礦業(yè)、冶金等領(lǐng)域,料位計(jì)能夠有效監(jiān)控礦石、煤炭等物料的存儲(chǔ)和運(yùn)輸,確保生產(chǎn)過程的順利進(jìn)行。在食品和制藥行業(yè),重錘式料位計(jì)能夠保證物料的精確測(cè)量,提升生產(chǎn)質(zhì)量和效率。

總結(jié)

通過對(duì)重錘式料位計(jì)原理、優(yōu)勢(shì)以及應(yīng)用的分析,我們可以看出,重錘式料位計(jì)在工業(yè)物料測(cè)量中具有不可忽視的重要性。憑借其可靠性、適應(yīng)性和性,重錘式料位計(jì)無疑是物料測(cè)量系統(tǒng)中的核心設(shè)備之一。在日益復(fù)雜和嚴(yán)苛的工業(yè)環(huán)境中,重錘式料位計(jì)的技術(shù)優(yōu)勢(shì)為生產(chǎn)企業(yè)提供了更加高效、安全的解決方案,確保生產(chǎn)線的穩(wěn)定性和精確性。

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