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- asd704616717a 2016-12-18 00:00:00
- trizol法提取rna 如何去除dna 1，裂解組織或者細(xì)胞使用的TRIzol量偏少； 2，使用的組織材料中含有大量的有機(jī)溶劑（如：乙醇/異丙醇等）、高純度的Buffer、堿性溶劑等； 3，如果提取的RNA中含有DNA時(shí)，也可以使用DNase I進(jìn)行DNA消化。 這個(gè)如果你做反轉(zhuǎn)錄的話，只能是用PCR檢測(cè)了。電泳基本檢測(cè)不出來(lái)。象現(xiàn)在的試劑盒或者TRIZOL提的RNA，除質(zhì)量太差，一般含基因組很少。 如果RT－PCR發(fā)現(xiàn)結(jié)果不對(duì)，可以用那種不含RNA酶的DNA酶處理一下。 如果引物能避開的話，有點(diǎn)DNA也沒(méi)關(guān)系。
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- 高氯酸提取DNA和RNA
- 有一篇文獻(xiàn)中使用高氯酸同時(shí)提取DNA和RNA，具體步驟如下：取2mL0.5% 組織勻漿液，加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸，冰上放置10min后500g離心10min， 棄上清，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗滌兩次，兩次洗滌后都以500g離心l0min，棄上清，將沉淀物溶解于2mL0.3mol/L... 有一篇文獻(xiàn)中使用高氯酸同時(shí)提取DNA和RNA，具體步驟如下：取2mL0.5% 組織勻漿液，加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸，冰上放置10min后500g離心10min， 棄上清，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗滌兩次，兩次洗滌后都以500g離心l0min，棄上清，將沉淀物溶解于2mL0.3mol/L的KOH，37℃條件下培養(yǎng)60min，然后加入1mL1.2mol/L高氯酸，冰上放置10min，500g離心15min，收集上清液(I)，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸溶解后再離心，再收集上清液(II)，集中上清液(I和II)用于RNA濃度的測(cè)定，沉淀物用于測(cè)定DNA的濃度。 不知各位有沒(méi)有用過(guò)這種方法，高氯酸的作用是什么？請(qǐng)賜教！ 展開
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