血液分析是動物健康和福利控制中非常重要和強大的診斷工具。它通常在高等脊椎動物中進(jìn)行，其參考值已經(jīng)確立，但魚類血液學(xué)仍需要進(jìn)一步研究。許多內(nèi)在和環(huán)境因素對魚的血液學(xué)值有深遠(yuǎn)的影響，使參考值的確定變得困難。此外，由于凝血時間短，魚血通常需要添加抗凝劑?？鼓齽┑倪x擇對于獲得可靠的血液檢測值至關(guān)重要。在本研究中，兩種常見的抗凝劑的影響，K 2 EDTA（1.8毫克/毫升）和肝素鋰（18國際單位/毫升），在養(yǎng)殖的斑鱒血液學(xué)值褐鱒對產(chǎn)卵季節(jié)的產(chǎn)卵者進(jìn)行了調(diào)查。

基本血液學(xué)分析的結(jié)果，例如壓實細(xì)胞體積 (PCV)、血紅蛋白濃度 (HGB)、紅細(xì)胞計數(shù) (RBC)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白 (MCH)、平均紅細(xì)胞體積 (MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度 (MCHC)和白細(xì)胞計數(shù) (WBC)，在K 2 EDTA和肝素鋰之間進(jìn)行了比較。在 PCV、MCV 和 MCHC 中觀察到統(tǒng)計學(xué)上的顯著差異，而 HGB、RBC、MCH 和 WBC 沒有顯示出這種差異。這些結(jié)果表明肝素鋰提供了更可靠的結(jié)果，因為 K 2 EDTA 處理的樣品中的紅細(xì)胞有膨脹的趨勢。

乙二胺四乙酸 (EDTA) 的鹽類被國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會 (ICSH) 和臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)研究所 (CLSI) 推薦為血細(xì)胞計數(shù)的shou選抗凝劑 。EDTA 作為 Ca 2+和 Mg 2+離子的螯合劑。它結(jié)合鈣，對于凝血級聯(lián)中的酶促反應(yīng)必不可少，從而產(chǎn)生抗凝作用，對細(xì)胞形態(tài)的影響最小。EDTA 可以最可靠地保存染色血膜上的細(xì)胞，它常用于人類、哺乳動物和其他脊椎動物的常規(guī)血液學(xué)測試。它還在魚類中取得了一些成功 。然而，EDTA 鹽有一些缺點。在某些情況下，它們會導(dǎo)致血液溶血，尤其是在用未緩沖的三卡因甲磺酸鹽 (MS 222) 麻醉的標(biāo)本中。

肝素鹽主要用于臨床生物化學(xué)。它阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶（因子 II），從而抑zhi纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。根據(jù)一些爬行動物和鳥類的 EDTA 保存的血液樣本中溶血的報道很少，建議在對有紅細(xì)胞的動物進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)時使用肝素。出于這個原因，許多作者使用肝素作為魚類血液學(xué)中shou選的抗凝劑。然而，肝素并不能完全阻止白細(xì)胞和血小板聚集，這會導(dǎo)致樣本凝固，并且還會產(chǎn)生 Wright 染色的血涂片的藍(lán)色背景染色。另外它也比其他抗凝劑更昂貴。

一些研究者觀察到從 EDTA 和肝素鹽中獲得的 HGB 和 RBC 存在顯著差異，肝素鋰比乙二胺四乙酸二鉀更適合用于養(yǎng)殖鱒魚產(chǎn)卵的血液學(xué)評估。肝素不會影響紅細(xì)胞的大小，從而將溶血的可能性降至zui低，與肝素相比，用EDTA處理的血液制成的血液涂片質(zhì)量更高。根據(jù)目前的研究，我們建議K2EDTA可以謹(jǐn)慎地用于血細(xì)胞計數(shù)和HGB的測定。為了更好地了解抗凝劑對血液學(xué)參數(shù)的影響，還需要進(jìn)一步的研究。

（來源：貝士德儀器科技（北京）有限公司）