晚期腎?。‥SRD）患者接受免疫抑 制劑的治 療后，能夠在體內(nèi)維持一種免疫平衡的狀態(tài)，此時的T細胞的免疫功能狀態(tài)已經(jīng)有過系統(tǒng)的研究了，但是B細胞的免疫功能狀態(tài)還未有過系統(tǒng)的研究。

盡管免疫抑制劑主要作用于T細胞，但是考慮到免疫抑制劑過量使用時會造成病毒的機會感染，表明其對B細胞仍然有一定的影響，因而本文即將介紹的一篇文章就對腎移植后服用免疫抑制劑后的患者體內(nèi)的B細胞亞群及功能狀態(tài)做了闡明。

本研究選擇了2012-2016年間接受腎移植的103名病人，入組了其中73位處于未排斥且未感染的免疫平衡狀態(tài)的病人，作者將其分成了2組，一組34人為接受移植后一年，另一組39人為移植后五年，同時還入組了35名未接受移植的腎透析ESRD病人和36名參與健康體檢的健康對照。

為詳細描繪B細胞的免疫分型及功能狀態(tài)，本文使用了8種流式抗體進行染色，抗體的詳細信息如下：

此Panel為貝克曼公司推出的Duraclone IM全套抗體組合方案中的第2種（貨號B53318）。該產(chǎn)品的優(yōu)點是粉末裝，保存的時間比液體更久；而且預混抗體也能節(jié)省實驗時間，相比于自己混勻抗體后分裝染色，樣本間的一致性會更高。產(chǎn)品質(zhì)量滿足ISO 9001認證標準（ISO 9001-2008）。

所有樣本染色好后使用貝克曼庫爾特的3激光13色流式分析儀CytoFlex分析。本儀器可以輕松做到10色以上的流式分析，本文使用的8色Panel，檢測分析起來較為簡單。

文章檢測完所有樣本之后，使用的圈門策略模式圖如下圖所示。

研究發(fā)現(xiàn)，總的B細胞比例在病人體內(nèi)明顯下降，但是不同組的病人之間沒有顯著差異，說明B細胞比例的降低并不是免疫抑制劑造成的，而有可能是晚期腎病的臨床表現(xiàn)之一。

隨后對B細胞的細分亞群及功能狀態(tài)進行分析，如以下各圖所示。

可以看到，使用Duraclone IM全套抗體組合方案種的B細胞亞群試劑（貨號B53318）和Beckman CytoFlex流式儀檢測得到的流式結果圖，分群清晰明了，這對于后面結果的判斷十分重要，流式圖分群清晰才能使后續(xù)的結論更可信。

總的來說，腎移植后的病人Breg(CD38hiCD27+CD24+)、過渡型B細胞(IgM+CD38hiCD24hi)、邊緣區(qū)B細胞(IgD-CD27+)、亞型轉(zhuǎn)換記憶B細胞(IgM-IgD-CD38lowCD27+)比例降低，而非轉(zhuǎn)換記憶B細胞(IgM+IgD+CD38lowCD27+)比例升高，漿細胞(CD38hiCD27+CD24-)的比例在ESRD病人中最 高，CD38lowCD21- B細胞比例在移植后5年病人組最 高 。即主要的B細胞亞群都在病人和健康人組之間有差異，但是腎透析和腎移植組的病人之間則很少有差異。由此可以說明，腎移植組病人的這些B細胞亞群的差異，并不是由于免疫抑制劑造成的，而主要是晚期腎病的臨床表現(xiàn)。

如果讀者對于B細胞的每種細胞亞群的詳細功能有疑問，可以詳細查看2019年發(fā)表于Frontiers in Immunology上的一篇綜述【1】，詳細解釋了B細胞的亞群怎樣細分以及每種細胞亞群的功能，相信對于讀者會有一定的啟示意義。

文章來源： 

Q. Zhuang, H. Li, M. Yu, et al., Profiles of B-cell subsets in immunologically stable renal allograft recipients and end-stage renal disease patients, Transplant Immunology(2018), https://doi.org/10.1016/j.trim.2019.101249

B細胞分群及功能的參考文獻： 

【1】 Sanz I, Wei C, Jenks SA, Cashman KS, Tipton C, Woodruff MC, Hom J and Lee FE-H (2019) Challenges and Opportunities for Consistent Classification of Human B Cell and Plasma Cell Populations. Front. Immunol. 10:2458. doi: 10.3389/fimmu.2019.02458