腎移植后B細(xì)胞監(jiān)測(cè)

貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)（中國(guó)）有限公司 2022-12-08 14:43:50 320  瀏覽

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  晚期腎病（ESRD）患者接受免疫抑 制劑的治 療后，能夠在體內(nèi)維持一種免疫平衡的狀態(tài)，此時(shí)的T細(xì)胞的免疫功能狀態(tài)已經(jīng)有過(guò)系統(tǒng)的研究了，但是B細(xì)胞的免疫功能狀態(tài)還未有過(guò)系統(tǒng)的研究。

  
  

  盡管免疫抑制劑主要作用于T細(xì)胞，但是考慮到免疫抑制劑過(guò)量使用時(shí)會(huì)造成病毒的機(jī)會(huì)感染，表明其對(duì)B細(xì)胞仍然有一定的影響，因而本文即將介紹的一篇文章就對(duì)腎移植后服用免疫抑制劑后的患者體內(nèi)的B細(xì)胞亞群及功能狀態(tài)做了闡明。

  
  

  本研究選擇了2012-2016年間接受腎移植的103名病人，入組了其中73位處于未排斥且未感染的免疫平衡狀態(tài)的病人，作者將其分成了2組，一組34人為接受移植后一年，另一組39人為移植后五年，同時(shí)還入組了35名未接受移植的腎透析ESRD病人和36名參與健康體檢的健康對(duì)照。

  
  

  為詳細(xì)描繪B細(xì)胞的免疫分型及功能狀態(tài)，本文使用了8種流式抗體進(jìn)行染色，抗體的詳細(xì)信息如下：

  
  

  
  

  此Panel為貝克曼公司推出的Duraclone IM全套抗體組合方案中的第2種（貨號(hào)B53318）。該產(chǎn)品的優(yōu)點(diǎn)是粉末裝，保存的時(shí)間比液體更久；而且預(yù)混抗體也能節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間，相比于自己混勻抗體后分裝染色，樣本間的一致性會(huì)更高。產(chǎn)品質(zhì)量滿(mǎn)足ISO 9001認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)（ISO 9001-2008）。

  
  

  
  

  所有樣本染色好后使用貝克曼庫(kù)爾特的3激光13色流式分析儀CytoFlex分析。本儀器可以輕松做到10色以上的流式分析，本文使用的8色Panel，檢測(cè)分析起來(lái)較為簡(jiǎn)單。

  
  

  文章檢測(cè)完所有樣本之后，使用的圈門(mén)策略模式圖如下圖所示。

  
  

  
  

  研究發(fā)現(xiàn)，總的B細(xì)胞比例在病人體內(nèi)明顯下降，但是不同組的病人之間沒(méi)有顯著差異，說(shuō)明B細(xì)胞比例的降低并不是免疫抑制劑造成的，而有可能是晚期腎病的臨床表現(xiàn)之一。

  
  

  隨后對(duì)B細(xì)胞的細(xì)分亞群及功能狀態(tài)進(jìn)行分析，如以下各圖所示。

  
  

  
  

  
  

  可以看到，使用Duraclone IM全套抗體組合方案種的B細(xì)胞亞群試劑（貨號(hào)B53318）和Beckman CytoFlex流式儀檢測(cè)得到的流式結(jié)果圖，分群清晰明了，這對(duì)于后面結(jié)果的判斷十分重要，流式圖分群清晰才能使后續(xù)的結(jié)論更可信。

  
  

  總的來(lái)說(shuō)，腎移植后的病人Breg(CD38hiCD27+CD24+)、過(guò)渡型B細(xì)胞(IgM+CD38hiCD24hi)、邊緣區(qū)B細(xì)胞(IgD-CD27+)、亞型轉(zhuǎn)換記憶B細(xì)胞(IgM-IgD-CD38lowCD27+)比例降低，而非轉(zhuǎn)換記憶B細(xì)胞(IgM+IgD+CD38lowCD27+)比例升高，漿細(xì)胞(CD38hiCD27+CD24-)的比例在ESRD病人中最 高，CD38lowCD21- B細(xì)胞比例在移植后5年病人組最 高 。即主要的B細(xì)胞亞群都在病人和健康人組之間有差異，但是腎透析和腎移植組的病人之間則很少有差異。由此可以說(shuō)明，腎移植組病人的這些B細(xì)胞亞群的差異，并不是由于免疫抑制劑造成的，而主要是晚期腎病的臨床表現(xiàn)。

  如果讀者對(duì)于B細(xì)胞的每種細(xì)胞亞群的詳細(xì)功能有疑問(wèn)，可以詳細(xì)查看2019年發(fā)表于Frontiers in Immunology上的一篇綜述【1】，詳細(xì)解釋了B細(xì)胞的亞群怎樣細(xì)分以及每種細(xì)胞亞群的功能，相信對(duì)于讀者會(huì)有一定的啟示意義。

  
  

  文章來(lái)源： 

  Q. Zhuang, H. Li, M. Yu, et al., Profiles of B-cell subsets in immunologically stable renal allograft recipients and end-stage renal disease patients, Transplant Immunology(2018), https://doi.org/10.1016/j.trim.2019.101249

  
  

  B細(xì)胞分群及功能的參考文獻(xiàn)： 

  【1】 Sanz I, Wei C, Jenks SA, Cashman KS, Tipton C, Woodruff MC, Hom J and Lee FE-H (2019) Challenges and Opportunities for Consistent Classification of Human B Cell and Plasma Cell Populations. Front. Immunol. 10:2458. doi: 10.3389/fimmu.2019.02458