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- *baolai1962 2010-10-12 00:00:00
- PCR，然后產(chǎn)物連接到pMD-T19上，注入到大腸桿菌中擴(kuò)增，提取質(zhì)粒，再通過(guò)酶切，連接到表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)入到表達(dá)菌種中，誘導(dǎo)表達(dá)，提取總蛋白，SDS檢測(cè)，OK
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- 一只小鳥(niǎo)5711 2010-10-13 00:00:00
- 首先根據(jù)蛋白性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)要求選擇表達(dá)載體，比如是原核還是真核表達(dá)，是否加標(biāo)簽，是否控制表達(dá)位置及強(qiáng)度等。 然后根據(jù)載體和目的蛋白設(shè)計(jì)引物，要考慮加酶切位點(diǎn)，保護(hù)堿基等。 其次選擇合適組織提取RNA，RT-PCR，酶切，克隆，鑒定，擴(kuò)增質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入宿主，誘導(dǎo)表達(dá)，純化，鑒定。
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