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問(wèn)答社區(qū)

核酸吸附為什么酸性吸附堿性洗脫

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全部評(píng)論(1條)

  • 幻雪夜57 2017-05-17 00:00:00
    羥基磷灰石填料廣泛用于核酸和蛋白的純化,酸性和中性蛋白能被填料的鈣離子吸附,鹽不影響吸附和洗脫,這樣的蛋白需要用用低濃度(30-120mM)的pH7.0的磷酸鹽緩沖液洗脫。堿性蛋白被磷酸根吸附,鹽會(huì)影響吸附和洗脫,所以洗脫可以用鹽或者高濃度(120-500mM)的pH7.0磷酸鹽緩沖液洗脫。:羥基磷灰石因陶瓷化工藝不同分為2種類型:I型和II型,I型對(duì)蛋白質(zhì)具有更大的保留,對(duì)普通蛋白質(zhì)具有更大的動(dòng)態(tài)載量,主要純化大部分蛋白質(zhì)(分子量一般在100kd一下);II型由于孔徑較I型大,因而對(duì)抗體和部分重組疫苗等大分子量蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)載量更高,而對(duì)HSA幾乎無(wú)保留,因而更適合于抗體的純化,同時(shí)II型對(duì)核酸具有更大的保留,能夠分辯單、雙鏈、是否超螺旋等各種高級(jí)結(jié)構(gòu)的核酸,因而也適合純化核酸。

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