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  zq0l0e 2013-10-14 00:00:00

  CLSM為生命科學開拓了一條觀察生命活細胞的結構及特定分子、離子生物學變化的新途徑，成為分子細胞生物學，神經科學，藥理學，遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具。共聚焦及雙光子具有以下優(yōu)點： 1.熒光標記的特異性及可定量性。 2.共聚焦針孔的運用，有效的消除了焦平面上下散射光，提高軸向分辨率。 3.點光源激光的應用，對熒光素能達到有效的激發(fā)，激發(fā)的特異性高，降低對熒光的淬滅，增強側向分辨率。 4.雙光子的應用，相對較低平均功率的紅外激發(fā)，大大減低對活細胞的損傷；熒光激發(fā)高度聚焦在焦點處，可避免了焦點以外的光漂白（Photobleaching）和光毒（cytotoxicity）作用，延長觀察時間，是目前用于活細胞跟蹤的Z理想方法。 5.脈沖激光散射和吸收程度小，透射性強，對厚樣品的穿透可達400um，是對厚的組織分析的Z首先方法。 6.結合META新技術，尤其對熒光蛋白成像具有更方便，更精確的效果。應用領域：共聚焦及雙光子在現(xiàn)代生物學研究中有如下應用： 1.多色熒光成像(Multi-color imaging)，具有多磁道和雙向掃描，曲線掃描等特性。 2.三維重構（Three dimentional reconstruction）及定量分析。 3.實時成像（Time series，real time imaging），可進行活細胞跟蹤。 4.離子成像（Ion imaging）/比率成像（Ratio imaging），可進行Ca2+，Mg2+，H+，Na+，K+，Zn2+，Ni2+，F(xiàn)e2+，Hg2+，Pb2+及Cd2+等成像。 5.熒光原位雜交（FISH:fluorescence in situ hybridization）； 6.熒光漂白恢復（FRAP：fluorescence recovery after photobleaching）； 7.熒光共振能量轉移（FRETM:fluorescence resonance energy transfer； 8.光生命期成像顯微術（FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy）。

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