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文獻(xiàn)速遞?動物活體成像系統(tǒng)在白血病耐藥機(jī)制研究中的應(yīng)用

廣州博鷺騰生物科技有限公司 2021-08-20 17:33:32 515  瀏覽
  • 慢性髓系白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是一種由造血干細(xì)胞染色體t(9;22)(q34;q11)易位引起,并在分子水平上形成Bcr-Abl融合基因的骨 髓增生性疾病。使用酪氨酸激酶抑 制劑(Tyrosine kinase inhibitors, TKIs)可以緩解疾病,但TKIs耐藥性是治 療失敗或誘發(fā)急性白血病的主要問題。


    根據(jù)Abl激酶結(jié)構(gòu)域點(diǎn)突變的不同,TKIs的耐藥機(jī)制主要包括Bcr-Abl依賴型和非Bcr-Abl依賴型。Bcr-Abl依賴型的耐藥性最常見,它會干擾小分子酪氨酸激酶抑 制劑伊馬替尼(Imtatinib, IM)結(jié)合和隨后的激酶抑 制。然而,超過50%的耐藥CML患者中并沒有Bcr-Abl突變。


    ▲ 慢性髓系白血病


    蛋白激酶C(Protein kinases C, PKCs)在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、增殖、凋亡和造血干細(xì)胞分化等多種細(xì)胞過程中發(fā)揮作用,并和Bcr-Abl協(xié)調(diào)參與對惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)化至關(guān)重要的幾種信號通路。實(shí)驗(yàn)和臨床證據(jù)表明,使用PKC抑 制劑可以有效地治 療CML。最近,不同的PKC亞型也被報(bào)道參與CML細(xì)胞的耐藥,但是,PKC信號在CML TKIs耐藥中的作用并不清楚。


    ▲ 蛋白激酶C的晶體結(jié)構(gòu)


    近日,貴州醫(yī)科大學(xué)王季石教授課題組根據(jù)先前的研究結(jié)果:一種泛PKCs抑 制劑星孢菌素(Stauroporine)在低濃度下可以有效地逆轉(zhuǎn)K562R細(xì)胞(沒有任何突變)的IM耐藥,因此推測Bcr-Abl非依賴型IM耐藥可能是由PKC亞型介導(dǎo)。在此基礎(chǔ)上,鑒于白血病干細(xì)胞(Leukemia stem cells)在CML TKIs耐藥中起基礎(chǔ)性作用,研究首次在Bcr-Abl非依賴型TKI耐藥的CML患者CD34+細(xì)胞中檢測到9種PKCs亞型的表達(dá)。對PKC亞型異常表達(dá)所介導(dǎo)的機(jī)制進(jìn)行深入研究時,使用博鷺騰AniView100多模式動物活體成像系統(tǒng)拍攝的活體成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從體內(nèi)進(jìn)一步證明PKC-β的過表達(dá)與腫瘤耐藥密切相關(guān),表明靶向PKC-β過表達(dá)可能是克服CML耐藥的一種新的治 療機(jī)制。


    相關(guān)成果已發(fā)表在期刊《Journal of Cellular Physiology》。


    ▲抑 制PKC-β可增強(qiáng)IM對CML細(xì)胞的體內(nèi)殺傷作用

    (a) 博鷺騰AniView100拍攝的不同藥物處理的CML小鼠模型中白血病細(xì)胞的活體示蹤成像圖。LY333531: PKCβ 抑 制劑。

    (b) 流式細(xì)胞儀檢測各組小鼠CD33+和CD45+細(xì)胞。

    (c) 直方圖顯示流式細(xì)胞儀檢測的各組小鼠CML細(xì)胞的差異。

    (d) 各組小鼠的生存曲線。

    (e、f) 比較各組小鼠脾 臟體積和重量。

    (g、h) Wright‘s染色檢測各組小鼠外周血中CML的進(jìn)展情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)。**表示p<0.01,*表示p<0.05。



    參考文獻(xiàn)

    1、Ma D, et al. PKC‐β/Alox5 axis activation promotes Bcr‐Abl‐independent TKI‐resistance in chronic myeloid leukemia[J]. Journal of Cellular Physiology, 2021.

    2、Zubair M S, et al. Cembranoid Diterpenes as Antitumor: Molecular Docking Study to Several Protein Receptor Targets[C]// International Conference on Computation for Science & Technology. 2015.


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文獻(xiàn)速遞?動物活體成像系統(tǒng)在白血病耐藥機(jī)制研究中的應(yīng)用

慢性髓系白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是一種由造血干細(xì)胞染色體t(9;22)(q34;q11)易位引起,并在分子水平上形成Bcr-Abl融合基因的骨 髓增生性疾病。使用酪氨酸激酶抑 制劑(Tyrosine kinase inhibitors, TKIs)可以緩解疾病,但TKIs耐藥性是治 療失敗或誘發(fā)急性白血病的主要問題。


根據(jù)Abl激酶結(jié)構(gòu)域點(diǎn)突變的不同,TKIs的耐藥機(jī)制主要包括Bcr-Abl依賴型和非Bcr-Abl依賴型。Bcr-Abl依賴型的耐藥性最常見,它會干擾小分子酪氨酸激酶抑 制劑伊馬替尼(Imtatinib, IM)結(jié)合和隨后的激酶抑 制。然而,超過50%的耐藥CML患者中并沒有Bcr-Abl突變。


▲ 慢性髓系白血病


蛋白激酶C(Protein kinases C, PKCs)在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、增殖、凋亡和造血干細(xì)胞分化等多種細(xì)胞過程中發(fā)揮作用,并和Bcr-Abl協(xié)調(diào)參與對惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)化至關(guān)重要的幾種信號通路。實(shí)驗(yàn)和臨床證據(jù)表明,使用PKC抑 制劑可以有效地治 療CML。最近,不同的PKC亞型也被報(bào)道參與CML細(xì)胞的耐藥,但是,PKC信號在CML TKIs耐藥中的作用并不清楚。


▲ 蛋白激酶C的晶體結(jié)構(gòu)


近日,貴州醫(yī)科大學(xué)王季石教授課題組根據(jù)先前的研究結(jié)果:一種泛PKCs抑 制劑星孢菌素(Stauroporine)在低濃度下可以有效地逆轉(zhuǎn)K562R細(xì)胞(沒有任何突變)的IM耐藥,因此推測Bcr-Abl非依賴型IM耐藥可能是由PKC亞型介導(dǎo)。在此基礎(chǔ)上,鑒于白血病干細(xì)胞(Leukemia stem cells)在CML TKIs耐藥中起基礎(chǔ)性作用,研究首次在Bcr-Abl非依賴型TKI耐藥的CML患者CD34+細(xì)胞中檢測到9種PKCs亞型的表達(dá)。對PKC亞型異常表達(dá)所介導(dǎo)的機(jī)制進(jìn)行深入研究時,使用博鷺騰AniView100多模式動物活體成像系統(tǒng)拍攝的活體成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從體內(nèi)進(jìn)一步證明PKC-β的過表達(dá)與腫瘤耐藥密切相關(guān),表明靶向PKC-β過表達(dá)可能是克服CML耐藥的一種新的治 療機(jī)制。


相關(guān)成果已發(fā)表在期刊《Journal of Cellular Physiology》。


▲抑 制PKC-β可增強(qiáng)IM對CML細(xì)胞的體內(nèi)殺傷作用

(a) 博鷺騰AniView100拍攝的不同藥物處理的CML小鼠模型中白血病細(xì)胞的活體示蹤成像圖。LY333531: PKCβ 抑 制劑。

(b) 流式細(xì)胞儀檢測各組小鼠CD33+和CD45+細(xì)胞。

(c) 直方圖顯示流式細(xì)胞儀檢測的各組小鼠CML細(xì)胞的差異。

(d) 各組小鼠的生存曲線。

(e、f) 比較各組小鼠脾 臟體積和重量。

(g、h) Wright‘s染色檢測各組小鼠外周血中CML的進(jìn)展情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)。**表示p<0.01,*表示p<0.05。



參考文獻(xiàn)

1、Ma D, et al. PKC‐β/Alox5 axis activation promotes Bcr‐Abl‐independent TKI‐resistance in chronic myeloid leukemia[J]. Journal of Cellular Physiology, 2021.

2、Zubair M S, et al. Cembranoid Diterpenes as Antitumor: Molecular Docking Study to Several Protein Receptor Targets[C]// International Conference on Computation for Science & Technology. 2015.


2021-08-20 17:33:32 515 0
文獻(xiàn)速遞?多模式活體成像系統(tǒng)在肝癌藥物載體研究中的應(yīng)用

肝癌是最常見的致命癌癥之一。目前臨床上主要采用手術(shù)切除癌變肝組織,同時以化療、放療等方式阻止正常肝細(xì)胞被感染惡化來治 療肝癌;但是,化療會濫殺濫傷各組織的正常細(xì)胞,并產(chǎn)生極大的副作用,而且在肝癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移或再生后也難以治愈。


因此,設(shè)計(jì)與制造出更好的用于肝癌治 療的藥物,是醫(yī)藥研究人員亟待解決的難題。如何提高藥物療 效,不僅可以從藥物結(jié)構(gòu)本身出發(fā),而且可以從藥物載體入手。選擇新型藥物載體或靶向基團(tuán),可以使有效藥物分子直接作用于癌癥患處,提高藥物靶向性,減少藥物對正常組織的傷害,減輕患者的疼痛。


近日,遼寧新藥研發(fā)重 點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室李麗教授課題組成功構(gòu)建并制備了兩種甘草次酸修飾的金屬有機(jī)框架藥物載體,并通過組織分布和活體成像實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證載體具有明顯的肝靶向性。該成果已發(fā)表在納米技術(shù)與精密工程領(lǐng)域國際權(quán)威期刊《Nanotechnology》。



1. 甘草次酸(GA)

甘草次酸(Glycyrrhetininc Acid,GA)是從中草藥甘草中提取分離出來的具有抗 炎、抗病毒、抗?jié)兊榷喾N藥理活性的甘草酸苷元。近期研究發(fā)現(xiàn),在肝細(xì)胞膜上鑲嵌著許多GA特異性受體,可與GA特異性結(jié)合,因此,GA作為藥物靶向分子進(jìn)行修飾的藥物載體已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)和一種新的靶向性治 療肝癌的有效途徑。


2. 金屬有機(jī)框架(MOFs)

金屬有機(jī)框架材料(Metal-organic Frameworks,MOFs),是一類通過組裝無機(jī)金屬離子與有機(jī)配體形成的具有多孔隙、高比表面積的新型材料。它的最 大的優(yōu)點(diǎn)是具有良好的生物相容性,而且會在體內(nèi)特定環(huán)境中自行分解,減少藥物在體內(nèi)的副作用,降低耐藥性,提高藥物治 LX率。


通過在MOFs表面修飾GA,可以實(shí)現(xiàn)MOFs的肝靶向性,并且MOFs的孔隙率高,具有超大比表面積,可以有效裝載藥物,提高載藥能力。

兩種MOFs載體:Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA與UiO-66-NH2-GA。


3. 小鼠體內(nèi)靶向性研究

DiR熒光染料,DiR@Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA和DiR@Uio-66-NH2-GA 在小鼠體內(nèi)不同時間段的熒光成像圖

DiR熒光染料,DiR@Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA和DiR@Uio-66-NH2-GA 在心、肝、脾、肺、腎的熒光成像圖


關(guān)于多模式動物活體成像系統(tǒng)

AniView100多模式動物活體成像系統(tǒng)是廣州博鷺騰生物科技有限公司全新推出的高靈敏度、多模式動物活體成像系統(tǒng)。其采用一級背部薄化、背部感光超低溫CCD相機(jī),具有極高的檢測靈敏度。大功率全波長鹵素?zé)艏ぐl(fā)光源配合精密復(fù)雜的全局光源和萬向鵝頸管點(diǎn)狀光源光路系統(tǒng),再加上頂 級的光譜轉(zhuǎn)換能力和多組濾光片組合,極大的提高了熒光信號的特異性,并大大縮短曝光時間。


2021-08-26 17:16:31 554 0
文獻(xiàn)速遞|多模式動物活體成像系統(tǒng)在魚疫苗研發(fā)中的應(yīng)用

病毒性疾病爆發(fā)是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)最嚴(yán)重的問題,具有傳播快、發(fā)病快和致死率高等特點(diǎn),對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失;而疫苗免疫是對其進(jìn)行防控的最有效措施。在水產(chǎn)動物免疫途徑中,注射方式效果較好,但不適合漁業(yè)生產(chǎn);浸浴免疫操作簡單,適合在魚苗和魚類大規(guī)模養(yǎng)殖中推廣使用,但是浸浴疫苗的應(yīng)用需要克服生物屏障等阻礙作用,才能使疫苗發(fā)揮出理想的免疫效果。

研究發(fā)現(xiàn),納米載疫苗靶向遞呈技術(shù)是解決水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)實(shí)現(xiàn)疫苗高效免疫保護(hù)最安全有效的手段之一;單壁碳納米管(SWCNTs)是一種高效的疫苗載體,具有高穿透性、高承載力、易修飾性和安全性等特性;甘露糖受體(Mannose receptor)是抗原呈遞細(xì)胞上的標(biāo)志性受體,能夠結(jié)合甘露糖修飾的抗原物質(zhì),可以作為疫苗的靶點(diǎn)。

近日,西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院朱斌教授課題組運(yùn)用納米載疫苗靶向遞呈技術(shù),構(gòu)建靶向性碳納米管載疫苗系統(tǒng),選擇高效的疫苗載體(單壁碳納米管)來突破生物屏障的限制,并利用合適的佐劑(甘露糖修飾的抗原物質(zhì))來增強(qiáng)疫苗的免疫效果,使疫苗充分發(fā)揮治療和免疫保護(hù)效果。這些研究成果相繼發(fā)表在期刊Vaccines和Journal of Nanobiotechnology,可以為其它水產(chǎn)動物納米載疫苗系統(tǒng)的研究、應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ),對漁業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和水產(chǎn)品食品安全生產(chǎn)具有重要意義。


文章一

草魚呼腸孤病毒(GCRV)已被公認(rèn)為是所有水生病毒物種中最具致病性,VP7作為GCRV的外衣殼蛋白,是一種可以誘導(dǎo)宿主免疫反應(yīng)的主要抗原。通過構(gòu)建靶向浸沒疫苗遞送系統(tǒng)(CNTs-M-VP7),該系統(tǒng)由SWCNTs作為疫苗載體,GCRV VP7蛋白作為抗原,甘露糖作為抗原呈遞細(xì)胞靶向部分。結(jié)果表明CNTs-M-VP7疫苗可通過粘膜組織(皮膚,腮和腸)進(jìn)入魚體內(nèi),呈現(xiàn)給免疫相關(guān)組織,顯著誘導(dǎo)的成熟和呈遞過程,從而引發(fā)強(qiáng)大的免疫反應(yīng)。

a、CNTs-M-VP7納米疫苗的制備過程;

b、巨噬細(xì)胞對納米疫苗的吸收;

c、魚組織中納米疫苗的攝??;

d、用博鷺騰多模式動物活體成像系統(tǒng)檢測接種魚體內(nèi)和體外熒光的分布;

e、草魚接種后,用GCRV人工攻擊后的相對存活百分比(每組n =100)。


文章二

鯉春病毒血癥(Spring viremia of carp,SVC)是危害最嚴(yán)重的水產(chǎn)病毒性疾病之一,SVCV作為SVC的病原,其表面糖蛋白(G)被認(rèn)為是一種主要抗原,可以誘導(dǎo)原發(fā)性宿主免疫反應(yīng)。通過化學(xué)修飾的方法將SVCV的抗原蛋白(G)、功能化單壁碳納米管和功能化甘露糖進(jìn)行結(jié)合,構(gòu)建了靶向性碳納米管載疫苗系統(tǒng)(SWCNTs-MG)。結(jié)果表明SWCNTs-MG通過提高疫苗進(jìn)入魚體的含量,并增強(qiáng)對抗原呈遞細(xì)胞的靶向呈遞作用,進(jìn)而提高疫苗浸浴免疫的效果。

a、SWCNTs-MG納米疫苗的制備過程;

b、納米疫苗在體內(nèi)和體外的安全性評估;

c、鯉魚巨噬細(xì)胞體外納米疫苗的攝??;

d、魚組織中納米疫苗的攝??;

e、用博鷺騰多模式動物活體成像系統(tǒng)檢測接種魚體內(nèi)和體外熒光的分布;

f、在接種的鯉魚中用SVCV人工攻擊后的相對存活百分比。


Tips   AniView 100多模式動物活體成像系統(tǒng)


AniView 100多模式動物活體成像系統(tǒng)作為廣州博鷺騰生物科技有限公司推出的高靈敏度動物活體成像系統(tǒng),其采用全密閉抗干擾暗箱,避免外界光源及宇宙射線對拍照影響的同時,配合零缺陷、科研級高靈敏背部薄化、背部感應(yīng)型冷CCD相機(jī),極大地提高成像的靈敏度。AniView 100可以檢測到<100個Luciferase標(biāo)記細(xì)胞,或<10ng FITC。


參考文獻(xiàn):

1、Zhang C ,  Wang G X ,  Zhu B . Journal of Nanobiotechnology, 2020, 18(1).

2、Zhu B, Zhang C, Zhao Z, Wang GX. Vaccines(Basel). 2020;8(1):87. 

3、張晨.[D]. 西北農(nóng)林科技大學(xué),2019.


2022-01-04 14:47:15 334 0
Echo Revolve顯微鏡在非小細(xì)胞肺癌靶向治療獲得性耐藥機(jī)制研究中的應(yīng)用

       在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)靶向治療過程中,有可能會出現(xiàn)獲得性耐藥的問題。雖然目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多獲得性耐藥的驅(qū)動因素,但在治療過程中導(dǎo)致腫瘤進(jìn)化的潛在分子機(jī)制還不完全了解,治療在多大程度上通過促進(jìn)突變過程積極推動腫瘤的發(fā)展尚不明確。因此來自美國馬薩諸塞州總醫(yī)院的Hideko Isozaki和Ammal Abbasi等科學(xué)家發(fā)表了一篇名為《APOBEC3A drives acquired resistance to targeted therapies in non-small cell lung cancer》的文章,文中作者研究了在NSCLC靶向治療期間,是否有特定的突變機(jī)制驅(qū)動肺癌的基因組進(jìn)化。結(jié)果表明靶向治療誘導(dǎo)胞苷脫氨酶APOBEC3A (A3A)突變可能促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌獲得性耐藥的發(fā)展。


       作者在研究中發(fā)現(xiàn),臨床常用的肺癌靶向治療誘導(dǎo)A3A的表達(dá),導(dǎo)致耐藥癌細(xì)胞持續(xù)發(fā)生突變。誘導(dǎo)A3A可以促進(jìn)了藥物治療細(xì)胞中雙鏈DNA斷裂(DSBs) 的形成,從而導(dǎo)致耐藥細(xì)胞進(jìn)化過程中的染色體不穩(wěn)定性,如拷貝數(shù)改變和結(jié)構(gòu)變異。通過基因缺失或RNAi介導(dǎo)來預(yù)治療誘導(dǎo)的A3A突變可以延緩耐藥的出現(xiàn)。因此,靶向治療誘導(dǎo)A3A突變可能促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌獲得性耐藥的發(fā)展。A3A的表達(dá)或酶活性可能是一種潛在的治療策略,以預(yù)防或延遲獲得性耐藥的肺癌靶向治療。因此靶向治療誘導(dǎo)A3A突變可能促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌獲得性耐藥的發(fā)展。 A3A的表達(dá)或酶活性可能是一種潛在的治療策略,以預(yù)防或延遲獲得性耐藥的肺癌靶向治療。

       在DNA雙鏈損傷形成時,H2AX的Ser139 位點(diǎn)會被迅速磷酸化,從而形成γH2AX,γH2AX可以作為雙鏈修復(fù)的標(biāo)志物。文章中作者通過免疫熒光技術(shù),利用ECHO Revolve正倒置一體熒光顯微鏡進(jìn)行免疫熒光觀察。在奧希替尼治療2周后,我們觀察到PC9細(xì)胞中組蛋白變體H2AX的Ser139磷酸化水平升高(圖1),說明TKI誘導(dǎo)的A3A突變導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定,促進(jìn)耐藥克隆的進(jìn)化。將γH2AX映射到TKI處理的PC9細(xì)胞的細(xì)胞周期分布上顯示,γH2AX最顯著地定位于一個恢復(fù)細(xì)胞分裂并處于G2期的細(xì)胞亞群(圖2),因此,TKI治療誘導(dǎo)增殖耐藥細(xì)胞中A3A催化的基因組損傷。

▲圖1:用1 μM奧希替尼處理PC9細(xì)胞0或14天,用γH2AX染色以量化DNA損傷。NT,沒有處理;比例尺= 70μm。

▲圖2:左圖是用1 μM奧希替尼處理PC9細(xì)胞14天,用EdU/DAPI染色以分辨細(xì)胞周期,代表G1、S、G2細(xì)胞;比例尺= 10 μm。右圖是EdU細(xì)胞周期試驗(yàn)的散點(diǎn)圖,用γH2AX定量DNA損傷。NT:未處理。

       
      作者的研究結(jié)果表明,TKI治療后APOBEC突變信號的獲取可能指示了耐藥克隆的進(jìn)化路徑,并提供了一種新的機(jī)制,通過該機(jī)制,靶向治療可能在治療期間無意中增加了癌細(xì)胞的適應(yīng)性突變。因此,阻止A3A的表達(dá)或酶活性可能是一種潛在的治療策略,以預(yù)防或延遲獲得性耐藥的肺癌靶向治療。

參考文獻(xiàn):H Isozaki, Abbasi A , Nikpour N , et al. APOBEC3A drives acquired resistance to targeted therapies in non-small cell lung cancer. 2021.

DOI:10.1101/2021.01.20.426852

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2022-01-26 15:46:53 476 0
低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用(文獻(xiàn)解讀)

低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用(文獻(xiàn)解讀)


本文收集了四篇相關(guān)文獻(xiàn),主要討論:低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用

畜禽屠宰后,鮮肉仍保持細(xì)胞結(jié)構(gòu),其水分主要分布在肌原纖維內(nèi)、肌原纖維與細(xì)胞膜之間、肌細(xì)胞之間以及肌束之間。肌肉組織的自身結(jié)構(gòu)和鮮肉的處理方法會對肉中水分分布產(chǎn)生影響,并zui 終影響鮮肉的保水性,因而生鮮肉在成熟、保鮮貯藏過程中的水分變化受到廣泛關(guān)注。


低場核磁共振技術(shù)(lowfield NMR,LF-NMR)是一種快速、無損的分析檢測技術(shù),可以通過測定肉品中氫原子核在磁場中的弛豫特性來確定肉品中水分的不同狀態(tài),因而在肉品領(lǐng)域已有諸多研究。

主要集中在以下3個方面:

1)測定肉與肉制品中不同狀態(tài)水分的分布和遷移;

2)結(jié)合其他指標(biāo)判斷肉的食用品質(zhì)和加工品 質(zhì);

3)進(jìn)行注水、注膠肉的鑒偽,異質(zhì)肉的鑒別和肉品新鮮度檢測。



低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用:肉品水分分布/水分含量分析,肉品品質(zhì)評定

文獻(xiàn)結(jié)論:

肉中不易流動水、自由水與肉的持水力、保水性、風(fēng)味等品質(zhì)指標(biāo)相關(guān)。從相關(guān)性分析可以看出牦牛肉在貯藏過程中,物理化學(xué)性質(zhì)的變化常伴隨著肉中水分子流動性的變化??衫肨2弛豫時間進(jìn)行不同貯藏時間下牦牛肉品質(zhì)的評定。

▲牦牛肉在貯藏過程中橫向弛豫時間分布

 

▲牦牛肉指標(biāo)間的相關(guān)性分析


文獻(xiàn)來源:

袁乙平,李靖,馬螈小等,低場核磁結(jié)合理化指標(biāo)分析低溫貯藏真空包裝牦牛肉的品質(zhì)[J].食品工業(yè)科技,2019,40(06):31-36.


低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用:肉品貯藏溫度Tg研究

文獻(xiàn)結(jié)論:

通過對牛肉品質(zhì)指標(biāo)與核磁共振參數(shù)T2的相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)T22與各品質(zhì)參數(shù)均有強(qiáng)的相關(guān)性,因此可根據(jù)T22 變化表征牛肉品質(zhì)變化。 通過核磁成像實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),-10℃貯藏牛肉干耗現(xiàn)象嚴(yán)重,肉的保水性差,不利于牛肉的長期貯藏。基于水分損失和經(jīng)濟(jì)成本考慮,牛肉盡量在Tg以下貯藏,控制在-15~-20℃ 左右為宜。

▲LF-NMR T2與測量指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)

 

  ▲不同貯藏溫度和時間下牛肉的核磁成像


文獻(xiàn)來源:

馬瑩,楊菊梅,王松磊等,基于LF_NMR及成像技術(shù)分析牛肉貯藏水分含量變化[J].食品工業(yè)科技,2018,39(02) :278-284.


低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用:冷凍肉品解凍方式研究

文獻(xiàn)結(jié)論:

不同的解凍方式對凍豬肉的橫向弛豫時間T2的影響也不盡相同。凍豬肉解凍過程中發(fā)生了不同水分群之間的水分遷移。

LF-NMR T2弛豫的水分分布情況顯示,解凍方式對 豬肉中不同水分群間的遷移具有顯著影響,冷藏解凍使凍豬肉中的不易流動水向自由水進(jìn)行遷移,微波-1解凍則使凍豬肉中的自由水向不易流動水進(jìn)行遷移,而微波-2解凍更傾向于使不易流動水向結(jié)合水遷移。


▲肉樣橫向弛豫時間T2變化的三維瀑布圖

 

  ▲不同解凍方式下肉樣橫向弛豫時間T2的變化

 

文獻(xiàn)來源:

程天賦,蔣奕,張翼飛等 ,基于低場核磁共振研究不同解凍方式對凍豬肉食用品質(zhì)的影響[J].食品科學(xué),2019,40(07):20-26.


低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用:5種不同解凍方式對比

下面我們通過一個新的案例,來了解整個研究過程的思路和模式。

文獻(xiàn)來源:

程天賦,俞龍浩,蔣奕等,基于低場核磁共振探究解凍過程中肌原纖維水對雞肉食用品質(zhì)的影響[J].食品科學(xué),2019,40(09),16-22.


本文研究旨在基于低場核磁共振橫向弛豫時間T2分析解凍過程中肌原纖維水的分布及流動性與雞肉食用品質(zhì)間的關(guān)聯(lián)性。

  研究思路

  冷鮮雞胸肉(宰后32?h)為對照,采用冷藏解凍、微波解凍(微波-1、微波-2)與超聲解凍(180、200 W) 5 種不同方式解凍中心溫度為-20 ℃的凍結(jié)雞胸肉,測定肉樣T2、品質(zhì)特性指標(biāo)并分析它們之間的相關(guān)性。

  研究方案  


▲肉樣橫向弛豫時間T2變化的三維瀑布圖

▲不同解凍方式下肉樣橫向弛豫時間T2的變化表


解凍方式對T22峰頂點(diǎn)時間和T22峰比例有顯著影響(P<0.05)。與對照組相比,冷藏解凍和200W超聲解凍肉樣的T22峰頂點(diǎn)時間顯著延長(P<0.05)(表),峰值右移(圖)。其他3組解凍肉樣之間T22峰頂點(diǎn)時間無顯著差異,但兩組微波解凍肉樣的T22有左移的趨勢。5組解凍肉樣的T22峰比例與對照組相比均顯著下降,其中微波-2解凍肉樣與對照組相比差異顯著(P<0.050),其余4組與對照組相比差異極顯著(P<0.01)。該結(jié)果說明解凍過程會降低凍雞肉肉樣肌水中的不易流動水含量。


文獻(xiàn)結(jié)論:

品質(zhì)方面:從解凍過程中肌水對雞胸肉品質(zhì)影響的角度考慮,微波-2解凍技術(shù)更適合冷凍雞胸肉的解凍。


水分遷移:結(jié)果表明結(jié)合水、不易流動水含量與肉樣的WHC、嫩度和多汁性評分呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),與解凍損失率、蒸煮損失率和剪切力呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01);自由水與這些指標(biāo)的相關(guān)性與之相反。 冷藏解凍、微波-1解凍與兩組超聲解凍肉樣出現(xiàn)較為明顯的不易流動水向自由水遷移的現(xiàn)象,且肉品質(zhì)均顯著變差;而微波-2解凍對雞胸肉品質(zhì)的負(fù)面影響最小,肌水水分群中還出現(xiàn)了強(qiáng)結(jié)合水水分群,并且微波解凍具有解凍速度快的天然優(yōu)勢。


核磁共振( nuclear?magnetic?resonance, NMR)可以提供關(guān)于水質(zhì)子與蛋白質(zhì)中可交換質(zhì)子之間相互作用的直接信息,從而提供肌水的化學(xué)物理狀態(tài)。


小結(jié):
低場核磁共振技術(shù)在肉品研究中的應(yīng)用,主要集中在:測定肉品中的水分分布和遷移;判斷肉的食用品質(zhì)和加工品質(zhì);進(jìn)行注水、注膠肉的鑒偽,異質(zhì)肉的鑒別和肉品新鮮度檢測。


2022-04-22 12:20:49 436 0
Sapphire文獻(xiàn)速遞|在囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)劑(CFT

2020年4月21日,由Tara N. Guhr Lee等在《Journal of Cystic Fibrosis》期刊中發(fā)表了《Accumulation and persistence of ivacaftor in airway epithelia with prolonged treatment》的文章,文中使用Azure Sapphire對IRDye 680孵育的印跡膜掃描成像,對CFTR蛋白進(jìn)行定量分析。


背景:

囊性纖維化(CF)的基本缺陷反映了囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)劑(CFTR)的功能喪失,囊性纖維蛋白是參與氯離子和碳酸氫鹽跨細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)的質(zhì)膜蛋白。CF的一個關(guān)鍵ZL方法是CFTR調(diào)節(jié)劑,即用于改善異常CFTR功能的藥物。

CFTR調(diào)節(jié)劑的當(dāng)前劑量策略基于血清藥代動力學(xué),但靶組織(如氣道上皮)中的藥物濃度尚不清楚。先前的數(shù)據(jù)表明,CFTR調(diào)節(jié)劑可能在氣道上皮中積聚,血清藥代動力學(xué)可能無法準(zhǔn)確預(yù)測慢性ZL的效果。

方法:

在ZL和沖洗階段的各個時間間隔,通過質(zhì)譜法測量藥物濃度,在Ussings室中評估電生理功能,并通過Western印跡定量成熟的CFTR蛋白。

結(jié)果:

與lumacaftor或tezacaftor相比,CF-HBEs中ivacaftor的累積程度要大得多,并且在沖洗14天后仍然持續(xù)升高。CFTR活性在ZL7天達(dá)到峰值,但隨著ivacaftor的進(jìn)一步積累而降低,盡管沖洗后仍保持在基線以上。

結(jié)論:

慢性ZL期間和之后,CFTR調(diào)節(jié)劑的細(xì)胞內(nèi)累積和持續(xù)存在提示氣道上皮內(nèi)復(fù)雜的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)特性不能由血清藥代動力學(xué)預(yù)測??赡苄枰苯訙y量靶組織中的藥物以優(yōu)化劑量策略,并且ZL停止后CFTR調(diào)節(jié)劑的持續(xù)存在對個性化藥物ZL方法具有重要意義。

Sapphire 雙模式多光譜激光成像系統(tǒng)可完成NIR和RGB熒光,化學(xué)發(fā)光和磷屏成像等多種檢測。無論您的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行哪種成像,例如普通的Western Blot、Southern印跡、2D和2D DIGE、可視化組織或小型模式動物成像都可高質(zhì)量實(shí)現(xiàn)。


2020-06-18 10:29:22 467 0
文獻(xiàn)分享 | Echo Revolve在骨骼肌挫傷修復(fù)研究中

近日在《Stem Cells and Development》期刊雜志上發(fā)表題為《Bone Marrow Stromal Cell-Derived Exosomes promote muscle healing following contusion through macrophage polarization》的文章。在這項(xiàng)研究中,使用梯度離心從BMSC的上清液中分離和純化外泌體。納米粒子跟蹤分析,透射電子顯微鏡和蛋白質(zhì)印跡被用來鑒定外泌體。使用ECHO正倒置一體熒光顯微鏡對HE染色,Masson染色和免疫熒光的肌肉樣本進(jìn)行成像。ZH得到的結(jié)論:BMSC-Exos通過改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)YZ炎癥反應(yīng),減輕了小鼠的肌肉挫傷損傷并促進(jìn)了肌肉的愈合。


背景介紹:

骨骼肌挫傷是運(yùn)動醫(yī)學(xué)和臨床最常見的損傷之一。由于挫傷后局部纖維化形成,受傷的肌肉很容易再次受傷,骨骼肌纖維化被證明與損傷初期的過度炎癥反應(yīng)有關(guān),而與炎癥浸潤密切相關(guān)的巨噬細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)在骨骼肌的愈合過程中起著至關(guān)重要的作用。如何調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化仍然是肌肉愈合的重要問題。

最近的研究表明,骨sui基質(zhì)細(xì)胞源性外泌體(BMSC-Exos)可以影響炎癥和組織恢復(fù)。因此,作者假設(shè)BMSC-Exos可以通過影響巨噬細(xì)胞極化來下調(diào)炎癥反應(yīng),從而促進(jìn)挫傷后骨骼肌的愈合。在這項(xiàng)研究中,作者從BMSC中分離了BMSC-Exos,在體內(nèi)和體外測試了它們的功能,并研究了BMSC-Exos對巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)和肌肉愈合影響的潛在機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)方法:

通過粒度分析、透射電鏡和Western Blot方法鑒定外泌體,為了檢查靶蛋白的表達(dá)和位置,在TA(脛前?。┣衅线M(jìn)行了免疫熒光染色。使用的一抗是抗CD206,抗α-SMA,抗MyoD和抗Pax7,DAPI用于定位細(xì)胞核,通過熒光顯微鏡(ECHO Revolve,美國)觀察圖像。

結(jié)果:

總體外觀,相對重量,形態(tài)特征:挫傷損傷后3d,挫傷組的TA肌肉比BMSC-Exos組的肌肉血腫更大(圖3A)。兩組之間在第三天,TA肌肉的相對肌肉重量也顯著不同,挫傷組的TA肌肉較重(圖3B)。

對于HE染色,在陰性對照組中,肌肉纖維規(guī)則且密集地排列。但是,在挫傷組中,隨著時間的流逝,肌肉纖維變得越來越分散,許多增殖的膠原纖維占據(jù)了肌肉纖維的空間,這些現(xiàn)象在BMSC-Exos組中得到了改善。Masson染色中,在挫傷組中觀察到大量膠原纖維,而BMSC-ExosZL在所有時間點(diǎn)均顯著減少了纖維化區(qū)域(圖3C-D)。


此外,為了進(jìn)一步檢查纖維化狀況,作者對平滑肌肌動蛋白α(α-SMA)進(jìn)行了免疫熒光染色。形態(tài)學(xué)結(jié)果表明,BMSC-ExosZL顯著降低了挫傷在不同時間點(diǎn)引起的高蛋白表達(dá)和α-SMA的廣泛分布(圖4)。巨噬細(xì)胞耗竭后,BMSC-Exos的抗纖維化作用受到Y(jié)Z,挫傷和BMSC-ExosZL組在第14天均觀察到大的纖維化區(qū)域和廣泛分布的α-SMA蛋白。


為了確定衛(wèi)星細(xì)胞的不同成肌狀態(tài),進(jìn)行了Pax7和MyoD的共定位。形態(tài)上,從受傷后3天開始,總的Pax7 + / MyoD +衛(wèi)星細(xì)胞顯著增加。顯然,BMSC-ExosZL組的數(shù)量多于挫傷組和陰性對照組。在三個不同的組中,相對的Myod蛋白表達(dá)也呈現(xiàn)出類似的趨勢(圖5D)。綜上所述,BMSC-Exos注射液可在早期促進(jìn)肌肉再生。

結(jié)論:

研究表明局部使用BMSC-Exos可以減少挫傷后的纖維化組織,增強(qiáng)肌肉再生并改善骨骼肌的生物力學(xué)特性。BMSC-Exos通過促進(jìn)M2巨噬細(xì)胞極化,YZ了受傷肌肉的炎性微環(huán)境。作者的研究為BMSC-Exos在臨床實(shí)踐中可用于肌肉愈合提供了有力的支持。


Revolve正倒置一體顯微鏡

Revolve展現(xiàn)了其非凡的靈活性,可以輕松地實(shí)現(xiàn)正置和倒置顯微鏡轉(zhuǎn)換,創(chuàng)新性地把正倒置顯微鏡合二為一,開啟了顯微鏡Hybrid時代。


?   視網(wǎng)膜屏顯示技術(shù):比擬目鏡人眼觀察效果。

?  全視野觀察:更清晰,更方便。

?   多通道熒光:多達(dá)4個EPI熒光通道,無須暗室,就可以輕松快速地完成多色熒光顯微分析。

?   自動化操作:通過iPad Pro點(diǎn)觸操控相機(jī)及熒光通道之間的切換,實(shí)現(xiàn)了完全自動化操作。

?   App應(yīng)用軟件:基于IOS的Echo App是與Apple團(tuán)隊(duì)合作研發(fā)的專業(yè)顯微鏡軟件。

?   精湛的工藝盡顯高端品質(zhì):實(shí)現(xiàn)非凡的性能。


2020-12-25 16:10:49 335 0
顯微CT在齒科研究中的應(yīng)用

顯微CT分析可用于牙科研究中的各種應(yīng)用,如牙釉質(zhì)厚度、根管形態(tài)、根管預(yù)備、顱面部骨骼結(jié)構(gòu)、顯微有限元建模、牙體組織工程、牙硬組織礦物密度及種植體等方面。它可以提供高分辨率圖像以及牙齒、骨骼和植入物的定性和定量分析。      

根管是一種孔隙,這種在牙齒中間的低密度空間對牙髓病的研究起了可探索的方向。顯微CT在牙科填料的研究上,特別適用于三維定量評價根管充填物。

牙釉質(zhì)厚度在人類進(jìn)化中具有分類學(xué)和系統(tǒng)發(fā)育價值。顯微CT有效且無損的技術(shù)特性被用于測量各種考古標(biāo)本的牙釉質(zhì)厚度。在臨床研究中,牙釉質(zhì)厚度被認(rèn)為對于咬合負(fù)荷方案的解釋具有重要意義。

 

實(shí)例2:大鼠下頜骨和舀齒

大鼠或小鼠下頜骨和臼齒在牙周病和其他牙科相關(guān)領(lǐng)域的許多研究模型中有著重要價值。通過顯微CT對動物下頜骨和牙齒的測量研究,可進(jìn)一步分析牙周生物型各特征之間的相關(guān)性,為口腔美學(xué)修復(fù)、種植ZL方案的選擇、ZL預(yù)后的判斷以及LX的評估提供理論基礎(chǔ)

 

實(shí)驗(yàn)設(shè)備:VENUS? Micro-CT 

            中文名:桌面型高分辨顯微CT

            型號:VNC-100

影像軟件:Avatar 1.3 (平生YL科技)


2020-05-27 09:35:21 717 0
納米材料在生物醫(yī)藥中的應(yīng)用的中,英文文獻(xiàn)各5篇,急急急
 
2018-12-11 16:32:22 359 0

4月突出貢獻(xiàn)榜

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